二項式分布是一個離散概率分布,它給出了m次試驗中k次成功的可能性,每次試驗的概率為p,例如當(dāng)擲骰子時,二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數(shù)字PCR的情況中,投擲骰子類似于將一個目標(biāo)實體隨機“投擲”到一組分區(qū)中,當(dāng)目標(biāo)落在選定的分區(qū)中時,就是成功。如果有n個分區(qū),并且分區(qū)過程是完全隨機的,則目標(biāo)出現(xiàn)在所選分區(qū)中的概率為1/n。該試驗重復(fù)m次,樣品中的每個分子一次。更多關(guān)于PCR的相關(guān)信息,歡迎咨詢廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司。數(shù)字PCR等新興技術(shù)要在臨床應(yīng)用上得到爆發(fā)式增長,有賴于LDT市場的放開。美國數(shù)字PCR解決方案
ThermoFisherQuantStudio3D是另一個經(jīng)典的芯片式數(shù)字PCR平臺,其基本的檢測流程是:將反應(yīng)液加入到涂布器中,通過涂布器將反應(yīng)液均勻涂布在有20000個微孔的芯片上,將芯片放在PCR儀上擴(kuò)增,將芯片放入讀取儀中采取拍照的方式讀取熒光信號。操作較為復(fù)雜,整個過程在封閉的芯片中進(jìn)行,污染的風(fēng)險較低。STILLANaica是一個較新的數(shù)字PCR平臺,基本的檢測流程是:將反應(yīng)液加入芯片,將芯片放入微滴生成擴(kuò)增系統(tǒng),生成30,000個微滴單層平鋪于芯片中,PCR擴(kuò)增在芯片上完成。然后將擴(kuò)增后的芯片轉(zhuǎn)移至微滴閱讀分析系統(tǒng),采取拍照的方式讀取熒光信號。由于整個過程在封閉的芯片中進(jìn)行,污染的風(fēng)險較低。珠三角一體化數(shù)字PCR數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊,可用于病原微生物檢測、基因檢測、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查、測序結(jié)果驗證等領(lǐng)域。
目前全球數(shù)字PCR的市場規(guī)模約1.5億-2.5億美元,約占熒光定量PCR市場規(guī)模(約20億美元)的10%,但增長趨勢明顯,有望逐步替代熒光定量PCR技術(shù)。目前國際市場有伯樂、賽默飛、凱杰、Stilla、羅氏等主要數(shù)字PCR玩家。根據(jù)MordorIntelliaence研究報告預(yù)測,2019-2024年全球qPCR和dPCR市場將以8.8%的年復(fù)合增長率增長,從2014年的41.13億美元增長到2024年的62.7億美元。其中,dPCR的增速更快達(dá)11.9%,將從2014年的4.75億美元,增長到2024年8.34億美元,為PCR檢測帶來極大的市場。但其預(yù)測的發(fā)展趨勢仍有參考價值。
20世紀(jì)末,Vogelstein等提出數(shù)字PCR(digitalPCR,dPCR)的概念,通過將一個樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應(yīng)單元,每個單元至少包含一個拷貝的目標(biāo)分子(DNA模板),在每個反應(yīng)單元中分別對目標(biāo)分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)束后對各個反應(yīng)單元的熒光信號進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。PCR實際上是一個在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下,DNA聚合酶依賴的酶促合成反應(yīng),擴(kuò)增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結(jié)合。全自動數(shù)字PCR平臺,讓數(shù)字PCR真正邁入新時代,助推數(shù)字PCR普及應(yīng)用。
PCR已成為分子診斷領(lǐng)域重要的技術(shù)手段之一,占據(jù)分子診斷市場的半壁江山。數(shù)字PCR是一代PCR技術(shù),也是當(dāng)前靈敏度和定量精度比較高的分子檢測技術(shù)。但數(shù)字PCR使用成本仍然相對較高,檢測靶點數(shù)少(一般≤6靶點/反應(yīng)),阻礙了其在臨床中的大規(guī)模應(yīng)用,提高數(shù)字PCR的多重檢測能力迫在眉睫?;跓晒馔ǖ罃?shù)的增加和基于探針濃度梯度增加,均可以在一定程度上提高數(shù)字PCR檢測重數(shù),然而只能達(dá)到"線性"增加的目的?;谔结槤舛忍荻鹊亩嘀貦z測技術(shù)雖然光'f明顯增加多重能力,但由于無法避免交叉反應(yīng)現(xiàn)象,不能確保獲得位點特異性的分簇,因此穩(wěn)定性不足、靈敏度較差,難以滿足臨床級別的數(shù)據(jù)要求。而基于創(chuàng)新的且數(shù)字PCR獨特適用的熒光編碼技術(shù)可以實現(xiàn)“指數(shù)”級的多重檢測,顛覆性的提高數(shù)字PCR檢測重數(shù),覆蓋臨床應(yīng)用多場景需求。dPCR的測量結(jié)果通常表示為含量,即拷貝數(shù)轉(zhuǎn)基因質(zhì)量百分比,而QPCR結(jié)果通常表示為拷貝數(shù)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。蘇州全自動數(shù)字PCR試劑盒
PCR本質(zhì)上是將一個傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬個PCR反應(yīng)。美國數(shù)字PCR解決方案
基于數(shù)字PCR技術(shù)平臺,塔歌生物成功地開發(fā)了胎兒染色體非整倍體(T21,T18和T13)無創(chuàng)產(chǎn)前篩查試劑盒(數(shù)字PCR-NIPT),并已完成數(shù)百例臨床樣本驗證。數(shù)字PCR-NIPT的陽性檢出率和NGS相似,且成本接近血清學(xué),可以在上述應(yīng)急策略中取代血清學(xué)作為靈敏度和特異性更高的初篩方法,以有效提高陽性檢出率,降低需要復(fù)篩的假陽性樣本數(shù)和節(jié)省總的篩查成本。數(shù)字PCR應(yīng)用前景廣闊,可用于病原微生物檢測、基因檢測、無創(chuàng)產(chǎn)前篩查、測序結(jié)果驗證等領(lǐng)域。但目前,大多數(shù)醫(yī)院采購的數(shù)字PCR儀器是用于科研層面,在臨床應(yīng)用上仍處于起步階段,未得到普遍應(yīng)用。美國數(shù)字PCR解決方案
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司是一家儀器儀表批發(fā);商品批發(fā)貿(mào)易(許可審批類商品除外);商品零售貿(mào)易(許可審批類商品除外);教學(xué)設(shè)備的研究開發(fā);辦公設(shè)備耗材批發(fā);生物技術(shù)開發(fā)服務(wù);生物技術(shù)推廣服務(wù);計算機批發(fā);生物技術(shù)轉(zhuǎn)讓服務(wù);農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗發(fā)展;水處理設(shè)備的研究、開發(fā);食品科學(xué)技術(shù)研究服務(wù);環(huán)保設(shè)備批發(fā);辦公設(shè)備批發(fā);的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。公司自創(chuàng)立以來,投身于數(shù)字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀,是精細(xì)化學(xué)品的主力軍。雙螺旋科學(xué)儀器繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。雙螺旋科學(xué)儀器始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時代,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使雙螺旋科學(xué)儀器在行業(yè)的從容而自信。