流式細(xì)胞儀主要由流動室及液流系統(tǒng)、激光器及光學(xué)系統(tǒng)、光電管及檢測系統(tǒng)、計算機及分析系統(tǒng)組成。流式細(xì)胞儀的流體系統(tǒng)負(fù)責(zé)將樣品從樣品管轉(zhuǎn)移到流動池。一旦通過流動池（并通過激光束），樣品將被分選出來（在細(xì)胞分選儀中）或移到廢液中。光學(xué)系統(tǒng)的元件包括激發(fā)光源、透鏡和濾光片（用于收集和移動儀器周圍的光）以及用于產(chǎn)生光電流的檢測系統(tǒng)。電子系統(tǒng)是流式細(xì)胞儀的大腦。在這里，來自檢測器的光電流經(jīng)過數(shù)字化、處理和保存，以用于后續(xù)分析。簡單的流式細(xì)胞儀可用于檢測細(xì)胞特征，包括細(xì)胞大小、細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞周期和細(xì)胞表型分析等。山東倍性分析儀配套試劑
菌類的基因組大小信息很少，只有不到 2000 個物種的信息可用。到目前為止，大多數(shù)記錄都是使用靜態(tài)的、基于顯微鏡的細(xì)胞計數(shù)方法獲得的，或者來自基因組測序項目。流式細(xì)胞術(shù)現(xiàn)在被認(rèn)為是獲得基因組大小測量的較先進方法，并且可以使用適當(dāng)?shù)姆椒ê?DNA 標(biāo)準(zhǔn)，從而能夠以快速、可靠和廉價的方式分析大多數(shù)基因組大小范圍。平均菌類基因組大小為 60 Mbp，但大小因系統(tǒng)發(fā)育而異，從 2.2到 3706 Mbp 。在幾個菌類進化枝中，基因組大小的擴張似乎伴隨著植物共生或植物寄生的進化，與植物相互作用的菌類似乎比腐生菌和與動物相互作用的菌類具有更大的基因組。雖然用于核 DNA 定量的流式細(xì)胞術(shù)在植物科學(xué)中常規(guī)用于基因組大小和倍性研究，但其在菌類生物學(xué)中的使用仍然很少。此處描述了適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)、方法和比較好實踐，旨在促進流式細(xì)胞術(shù)在菌類基因組大小測量中更普遍和更多的應(yīng)用。高精確性倍性分析儀染色速度CyFlow Analyser倍性分析儀在醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、育種水產(chǎn)養(yǎng)殖等應(yīng)用領(lǐng)域提供完美解決方案。
待測細(xì)胞被制備成單細(xì)胞懸液，經(jīng)特異性熒光染料染色后置于專門樣品管中，在氣體壓力推動下被壓入流動室，流動室內(nèi)充滿鞘液（不含細(xì)胞或微粒的緩沖液），在高壓作用下從鞘液管噴出包裹細(xì)胞，使細(xì)胞排成單列形成細(xì)胞液柱，依次通過檢測區(qū)。液柱與高度聚焦的激光束垂直相交，被熒光染料染色的細(xì)胞受到激光激發(fā)產(chǎn)生熒光信號和散射光信號，這些光信號通過波長選擇的濾光片，由相應(yīng)的光電管和電子檢測器接收并轉(zhuǎn)換成電信號，經(jīng)放大器放大后送入計算機并進行分析顯示和結(jié)果輸出，測定的結(jié)果常用單參數(shù)直方圖、雙參數(shù)散點圖、輪廓（等高）圖和三維立體圖來表示。
使用熒光核酸染料標(biāo)記植物中DNA含量，隨后用流式細(xì)胞儀高通量進行植物倍性分析，已經(jīng)成為植物研究中的常用分析手段[1]。相較傳統(tǒng)的根尖壓片染色體計數(shù)，流式細(xì)胞法制備樣本簡單，無需制備中期染色體，通量高，結(jié)果準(zhǔn)確，并且可以兼容幾乎所有植物的任何組織。使用Sysmex-Partec原廠倍性分析試劑和CellTrics過濾器，只需要：1、切碎2、過濾3、上機三步，2分鐘內(nèi)完成倍性分析實驗。使用Sysmex-Partec CyFlow PA對植株基因組大小進行預(yù)測，染色體倍性進行預(yù)測，對突變株進行倍性鑒定，構(gòu)建植物進化樹。我們使用流式細(xì)胞術(shù)和成像流式細(xì)胞術(shù)分析了 10 色雙等位基因 Confetti 報告基因。
CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀注意事項：1、儀器的外殼不要隨意打開；、2實驗樣品的前處理要和儀器盡量避開，比方液體飛濺損傷儀器；3、上機操作請一定要進行應(yīng)用培訓(xùn)，或者請參加過培訓(xùn)的老師、同學(xué)進行指導(dǎo)，切不可單獨上機；、4制作好預(yù)約流程，盡量避免一日之內(nèi)重復(fù)開機，并做好實驗上機記錄，以更好的評估儀器的使用情況；5、如果操作過程中出現(xiàn)堵孔現(xiàn)象，啟動清洗功能，并重新用超純水沖洗2min；6、將儀器的操作手冊、光路圖及部件做好詳細(xì)表格標(biāo)注，放在實驗室明顯的地方，方便使用者查閱；7、實驗數(shù)據(jù)在進行拷貝時，盡量不要使用自帶的優(yōu)盤，較好外接一個光驅(qū)，將數(shù)據(jù)拷貝在光盤中，如果實驗條件有限，應(yīng)在使用前將優(yōu)盤進行格式化后方可操作。流式倍性分析儀是一種用于生物學(xué)、農(nóng)學(xué)、林學(xué)領(lǐng)域的分析儀器。華南地區(qū)高精確性倍性分析儀原理
CyFlow Analyser倍性分析儀具有直觀強大的FCM軟件系統(tǒng)，較小設(shè)定時間。山東倍性分析儀配套試劑
擬南芥是一種生長迅速的小型植物，可進行范圍廣的核內(nèi)復(fù)制，在不發(fā)生有絲分裂的情況下進行基因組擴增。該物種含有有花植物中較小的基因組，約157Mb，C值為0.321pg。這些特征使得擬南芥特別適合作為測定基因組大小的內(nèi)參，并且可以用于儀器線性度的質(zhì)量控制。用于流式實驗的植物樣品通常只需少量植物組織。使用標(biāo)準(zhǔn)手術(shù)刀片將植物組織切碎并浸泡于緩沖液中，過濾含植物細(xì)胞核的勻漿以去除大的碎片，用DNA特異性熒光染料進行標(biāo)記，然后在流式細(xì)胞儀上采集數(shù)據(jù)，根據(jù)每個細(xì)胞核的熒光強度來計算DNA含量。通過與已知標(biāo)準(zhǔn)品比較，可以用熒光強度換算出DNA含量的相對值。擬南芥通常用作內(nèi)參，只需將內(nèi)參樣品和未知樣品的細(xì)胞核同時進行分離、染色和分析即可。山東倍性分析儀配套試劑
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