層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。柱層析的裝柱非常重要,裝柱的效果會(huì)直接影響層析分離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種方法。濕法裝柱很簡(jiǎn)單,使用也普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿,柱子底部先用脫脂棉塞緊,然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。用漏斗將活好的固定相倒入柱子中,打開(kāi)底部活塞,將柱子中高出固定相的溶劑放出。期間不斷用橡皮棒敲打,將固定相敲實(shí),做到密實(shí)均勻無(wú)氣泡即可。很多時(shí)候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子,而且在柱子中沒(méi)有氣泡產(chǎn)生。層析柱的種類繁多,新的技術(shù)和材料也在不斷發(fā)展中。青島中試小型玻璃層析柱規(guī)格
后一種方法洗脫時(shí),選擇一種與待分離物質(zhì)有較強(qiáng)親和力的物質(zhì)加入洗脫液,這種物質(zhì)與配體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)待分離物質(zhì)的結(jié)合,在在適當(dāng)?shù)臈l件下,如這種物質(zhì)與待分離物質(zhì)的親和力強(qiáng)或濃度較大,待分離物質(zhì)就會(huì)基本被這種物質(zhì)結(jié)合而脫離配體,從而被洗脫下來(lái)。例如用染料作為配體分離脫氫酶時(shí),可以選擇NAD+進(jìn)行洗脫,NAD+是脫氫酶的輔酶,它與脫氫酶的親和力要強(qiáng)于染料,所以脫氫酶就會(huì)與NAD+結(jié)合而從配體上脫離。特異性洗脫方法的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng),可以進(jìn)一步消除非特異性吸附的影響,從而得到較高的分辨率。另外對(duì)于待分離物質(zhì)與配體親和力很強(qiáng)的情況,使用非特異性洗脫方法需要較強(qiáng)烈的洗脫條件,很可能使蛋白質(zhì)等生物大分子變性,有時(shí)甚至只能使待分離的生物大分子變性才能夠洗脫下來(lái),使用特異性洗脫則可以避免這種情況。山西工業(yè)層析柱廠家電話9、層析通常用于脂質(zhì)或類固醇或類胡蘿卜素和葉綠素前體及其極性和非極性有機(jī)物的吸附分離不強(qiáng)。
干法裝柱的一個(gè)缺點(diǎn)就是在裝入洗脫劑后,由于溶劑和固定相之間的吸附放熱,所以柱子容易變花,影響分離效果。解決的方法是:(1)固定相一定要添加結(jié)實(shí);(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”,直到柱子的下端不再發(fā)燙,恢復(fù)到室溫后再撤去壓力。無(wú)論使用哪種方法裝柱,都要求所裝的柱子結(jié)實(shí)、勻稱、無(wú)氣泡。上樣也有濕法和干法之分:濕法一般用淋洗劑溶解樣品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等,但溶劑越少越好。再用膠頭滴管轉(zhuǎn)移得到的溶液,沿著層析柱內(nèi)壁緩慢地均勻加入。在不用海沙的情況下,盡量不要破壞硅膠面。加樣后,打開(kāi)柱底活塞,讓固定相充分地吸附所加樣品。然后再加入一些洗脫劑,再充分地吸附后將一團(tuán)脫脂棉塞至接近硅膠表面。
由于樣品中各組分的吸附能力不同,在洗脫過(guò)程中逐漸分離的部件會(huì)由于不同的移動(dòng)速度。在實(shí)驗(yàn)中使用的固體吸附劑有氧化鋁或硅酸鎂或磷酸鈣或氫氧化鈣或活性鈣、蔗糖、淀粉和纖維素。常用的洗脫液乙烷和苯醚或氯仿、乙醇或或水和有機(jī)溶劑的混合物。層析通常用于脂質(zhì)或類固醇或類胡蘿卜素和葉綠素前體及其極性和非極性有機(jī)物的吸附分離不強(qiáng)。在卵白質(zhì)溶液中參增中性雅至必要濃度時(shí),蛋白質(zhì)會(huì)沉沒(méi)析出,鹽析沉淀的蛋白質(zhì),其本體褂訕,經(jīng)透析或稀釋后仍可消溶。鹽析是可逆流程。γ-球蛋白被沉淀,依此可將γ-球蛋白分辯出來(lái),爾后再用凝膠過(guò)濾法除鹽即可獲得比擬純的γ-球蛋白。層析柱在臨床檢驗(yàn)中有著廣泛的應(yīng)用。
封裝組件:封裝組件是該設(shè)備的另一個(gè)重要組成部分,用于密封色譜柱管的兩端,防止填充劑泄漏。封裝組件通常由橡膠、聚四氟乙烯等材料制成,具有耐高壓、耐腐蝕、密封性好等特點(diǎn)。封裝組件的設(shè)計(jì)和質(zhì)量直接影響到穩(wěn)定性和可靠性??傊邏簩游鲋慕Y(jié)構(gòu)組成包括色譜柱管、填充劑、連接件、排氣閥、導(dǎo)向桿和封裝組件等部分。這些部分的設(shè)計(jì)和質(zhì)量直接影響到該設(shè)備的性能、穩(wěn)定性和可靠性。在使用高壓層析柱時(shí),用戶應(yīng)充分了解其結(jié)構(gòu)組成,選擇合適的設(shè)備和操作方法,以獲得更好的分離和分析效果。中壓層析柱是一種重要的分離技術(shù),在實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用。為了確保該柱的使用效果和操作安全,用戶在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和操作時(shí)需要遵守以下注意事項(xiàng)。對(duì)層析吸附是吸附到玻璃柱(柱層析法)或玻璃板上(薄層層析法)。青海工業(yè)生產(chǎn)化PP聚丙烯層析柱供應(yīng)商
層析柱主要是用于分離和分析混合物中的化學(xué)物質(zhì)。青島中試小型玻璃層析柱規(guī)格
在蛋白質(zhì)的分離純化過(guò)程中,離不開(kāi)層析柱的使用,但層析柱的裝填好壞,直接影響其分配效果,進(jìn)而影響產(chǎn)品的回收率及純度。目前,國(guó)內(nèi)外工業(yè)級(jí)層析柱的裝填方法主要為吸入式和置換式兩種。置換式在裝填小直徑層析柱時(shí)效果很好,但在層析柱直徑較大時(shí)(通常直徑在800mm以上)分配效果較差。因此采用的裝填方法為吸入式,即通過(guò)層析柱柱頭下壓至層析柱底部,將預(yù)先混勻的勻漿液通過(guò)活塞的方式吸入層析柱內(nèi)。層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。柱層析技術(shù)又稱柱色譜技術(shù),主要原理是根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離開(kāi)來(lái)。青島中試小型玻璃層析柱規(guī)格