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配制培養(yǎng)基需要哪些制備:(1)稱出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖,加水直到培養(yǎng)基較終容積的34,加熱溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基(不加瓊脂)時無需加熱。(2)按需要加入一定量的各種貯存母液,包括生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要,培養(yǎng)基中所需的維生素,可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。(3)蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,一般以5.66.0為好。(4)培養(yǎng)基分裝,分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌,也可以高壓滅菌后再進行培養(yǎng)基的無菌分裝,室溫下存放備用。暫時不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存,而含有生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。福建大容量 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的制備原則和要求:培養(yǎng)基是根據(jù)各類微生物生長繁殖的需要,用人工方法把多種物質(zhì)混合而成的營養(yǎng)物。一般用來分離、培養(yǎng)菌類。常用的培養(yǎng)基有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時,應(yīng)掌握如下原則和要求:(一)培養(yǎng)基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈,稱取的份量務(wù)必準(zhǔn)確。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細菌生長的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。湖北培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),配制針對性強的培養(yǎng)基。
在制備培養(yǎng)基時,通常要考慮以下因素:(1)pH值多數(shù)細胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細胞株之間細胞生長*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細胞系以pH=7.4~7.7,轉(zhuǎn)化細胞以pH=7.0~7.4更合適。據(jù)報道,上皮細胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍色,pH=7.8呈紫色。由于對顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標(biāo)準(zhǔn)樣,放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。
培養(yǎng)基配置原則:選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源,但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡單的無機物組成。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。就微生物主要類型而言,有細菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動物、藻類及病毒之分,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實驗室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡稱普通肉湯培養(yǎng)基)培養(yǎng)細菌,用高氏I號合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌,培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。自動培養(yǎng)基制備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋。
培養(yǎng)基的過濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內(nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。為防止冷凝水過多,也可將培養(yǎng)基冷卻至45 ~ 50°C再倒平板。西藏不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)平板培養(yǎng)基也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。福建大容量 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細菌核酸的光化學(xué)反應(yīng)引起細菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細胞中的成分發(fā)生反應(yīng),從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法:過濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細孔濾膜對壓縮空氣,酶溶液和其他對熱不穩(wěn)定的復(fù)合溶液進行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對于培養(yǎng)基,管道和設(shè)備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時間,這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進行滅菌。蒸汽冷凝后會釋放出大量潛熱。蒸汽具有強大的穿透力,破壞細菌蛋白質(zhì)和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。福建大容量 培養(yǎng)基制備器
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