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對LST(月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時,有時發(fā)酵管內(nèi)會有氣泡。為防止發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)生氣泡,可以采取以下幾項(xiàng)措施:(1)小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。(2)滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。(3)試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時候),勿使用橡皮塞。(4)不要過早打開滅菌鍋,要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡,可用水做培養(yǎng)基組的對照試驗(yàn),若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是培養(yǎng)基自身的原因。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。福建自動培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的脫氣:必要時,在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置:所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)半固體培養(yǎng)基,指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的制備步驟有哪些:第1,用水:培養(yǎng)基制備用水應(yīng)使用電阻率不小于30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質(zhì)的水,較好不使用離子交換器生產(chǎn)的去離子水。第二,稱量。稱量時要用獨(dú)有的角匙,避免交叉污染而影響檢驗(yàn)結(jié)果;干粉培養(yǎng)基易吸潮,如有條件,盡量在濕度較低的房間稱取培養(yǎng)基。第三,復(fù)水,復(fù)水時不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長;容器的大小需大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過程中,培養(yǎng)基溢出;含有瓊脂粉的培養(yǎng)基,在加熱溶解之前可以浸泡數(shù)分鐘;加熱培養(yǎng)基時一定要進(jìn)行攪拌,特別是瓊脂類培養(yǎng)基。為避免燒焦和沸騰溢出,對于少量的培養(yǎng)基較好使用沸水浴進(jìn)行加熱。
培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化,培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長。很好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,必須加以補(bǔ)足。液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對應(yīng)詞,是微生物或動植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。
在制備培養(yǎng)基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝,經(jīng)過滅菌等準(zhǔn)備就緒后,才能使用。新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時,使游離的堿性物質(zhì)除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉(zhuǎn)動容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,數(shù)分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應(yīng)在配制培養(yǎng)基時加以調(diào)節(jié)。中國香港不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
在配制培養(yǎng)基時應(yīng)盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分。福建自動培養(yǎng)基制備器
血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成的,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。若想去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。何謂熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和啟動。福建自動培養(yǎng)基制備器
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