培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類(lèi)型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細(xì)菌核酸的光化學(xué)反應(yīng)引起細(xì)菌死亡。常用的是紫外線(xiàn),X射線(xiàn)和伽馬射線(xiàn)。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細(xì)胞中的成分發(fā)生反應(yīng),從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4、過(guò)濾滅菌原理方法:過(guò)濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進(jìn)行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細(xì)孔濾膜對(duì)壓縮空氣,酶溶液和其他對(duì)熱不穩(wěn)定的復(fù)合溶液進(jìn)行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對(duì)于培養(yǎng)基,管道和設(shè)備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時(shí)間,這稱(chēng)為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進(jìn)行滅菌。蒸汽冷凝后會(huì)釋放出大量潛熱。蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞細(xì)菌蛋白質(zhì)和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。湖南瓊脂培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基的種類(lèi):培養(yǎng)基種類(lèi)很多,根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線(xiàn)菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、病菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。湖南瓊脂培養(yǎng)基制備儀按一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配制的培養(yǎng)基即成為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的制備原則和要求:培養(yǎng)基是根據(jù)各類(lèi)微生物生長(zhǎng)繁殖的需要,用人工方法把多種物質(zhì)混合而成的營(yíng)養(yǎng)物。一般用來(lái)分離、培養(yǎng)菌類(lèi)。常用的培養(yǎng)基有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)掌握如下原則和要求:(一)培養(yǎng)基必須含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學(xué)藥品必須純凈,稱(chēng)取的份量務(wù)必準(zhǔn)確。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細(xì)菌生長(zhǎng)要求。按各種培養(yǎng)基要求準(zhǔn)確測(cè)定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細(xì)菌生長(zhǎng)的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。
培養(yǎng)基制備的基本方法:1.培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對(duì)。2、培養(yǎng)基的制備記錄,每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱(chēng),配方及其來(lái)源.和各種成份的牌號(hào)。較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份。3.培養(yǎng)基成分的稱(chēng)取。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂.較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號(hào),并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱(chēng)取完畢后,即移放于右側(cè)。5、培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是很常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它可作為一些特殊培養(yǎng)基的基本成分。
高壓滅菌造成培養(yǎng)基結(jié)焦焦化問(wèn)題:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,檢測(cè)人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結(jié)焦焦化現(xiàn)象。微生物認(rèn)為造成這種現(xiàn)象是:控制培養(yǎng)基在容器中不要超過(guò)百分之八十,避免填充過(guò)多。注意控制高壓滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過(guò)121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長(zhǎng)時(shí)間存放。以上原因都會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基結(jié)焦焦化。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為碳源或主要碳源,故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。湖南瓊脂培養(yǎng)基制備儀
調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同。湖南瓊脂培養(yǎng)基制備儀
分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料,適于作生理等研究,由于發(fā)酵率高,操作、方便,也常用于發(fā)酵工業(yè)。(3)半固體培養(yǎng)基。是在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態(tài)。固體培養(yǎng)基的制作步驟:1、首先我們要準(zhǔn)備好一個(gè)裝有1000ml的燒杯,然后在準(zhǔn)備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中。2、其次我們?cè)谡{(diào)節(jié)PH值,調(diào)節(jié)時(shí)需要百分之10的氫氧化鈉溶液,將PH值調(diào)到7.2,在此也要定容到1000ml,較后在將這些液體都分別放入10個(gè)錐形瓶?jī)?nèi),每一瓶都裝100ml。湖南瓊脂培養(yǎng)基制備儀
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