海南實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-08-05

培養(yǎng)基的制備:(1)稱(chēng)量:根據(jù)培養(yǎng)基的配方,稱(chēng)取適量藥品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;(3)分裝:根據(jù)不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過(guò)三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長(zhǎng)的1/5(需根據(jù)試管的大小而定).液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右.(4)塞硅膠塞:裝好培養(yǎng)基的試管應(yīng)塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內(nèi),這樣即可過(guò)濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā).(5)包裝:三角瓶棉塞頭部應(yīng)用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.2、無(wú)菌水的制備:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水(稀釋水)裝入試管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸餾水(稀釋水)裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶?jī)?nèi),防止暴沸.(3)量取240ml蒸餾水(稀釋水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。海南實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器

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天然培養(yǎng)基的血清種類(lèi):牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)很高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分很少。血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。江西瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器每稱(chēng)完一種成分即在配方面軍做出記號(hào),并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊,置于左側(cè)。

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制備培養(yǎng)基有什么要求:1、培養(yǎng)基需保持澄清,便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,培養(yǎng)基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過(guò)濾,以除去沉淀物,必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。2、盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。3、培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類(lèi)、血清、明膠等,則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):稱(chēng)取數(shù)量,用1/100的電子天平稱(chēng)出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計(jì)算出配制相應(yīng)培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量,然后用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取重量(將稱(chēng)量紙折疊成簸箕盛藥)。培養(yǎng)基過(guò)濾,如果對(duì)配制的培養(yǎng)基沒(méi)有特殊要求,這一步可以省略。中'海培養(yǎng)基如有渾濁和沉淀現(xiàn)象,可將需要澄清的液體培養(yǎng)基用油紙過(guò)濾。固體介質(zhì)可以用雙層紗布過(guò)濾,中間有一層薄薄的脫脂棉。如果過(guò)濾法不能滿(mǎn)足澄清要求,可以采用蛋清澄清法,即將培養(yǎng)基加熱冷卻至五十度至六十度,不超過(guò)三角瓶一半的容量。每一千毫升放入1~2個(gè)蛋清,用力搖晃三至五分鐘,用121℃高壓蒸汽滅菌二十分鐘,趁熱取出過(guò)濾。培養(yǎng)基制備器真彩色液晶屏顯示,觸摸屏加按鍵操作。

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血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題:血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來(lái)自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌有毒的等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),甚至造成細(xì)胞死亡。動(dòng)物個(gè)體不同,血清產(chǎn)地、批號(hào)不同,每批質(zhì)量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響,可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來(lái)源越來(lái)越困難,價(jià)格昂貴,是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)生產(chǎn)成本的主要部分之一。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題。培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器價(jià)格

培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。海南實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器

簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:需要對(duì)其進(jìn)行消毒處理,普通介質(zhì)使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質(zhì)的制備,如無(wú)特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應(yīng)該單獨(dú)制備20%或更多的濃縮液,過(guò)濾或間斷殺菌,然后通過(guò)無(wú)菌操作技術(shù)加入到培養(yǎng)液中。在低溫下,明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血、體液及素應(yīng)經(jīng)無(wú)菌處理后,加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)。每次處理完培養(yǎng)基,都要仔細(xì)檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進(jìn)行篩選和棄置,才能確定pH值。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚,若有細(xì)菌生長(zhǎng),培養(yǎng)基將被丟棄。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基,24h培養(yǎng),對(duì)生長(zhǎng)不良或無(wú)菌的菌株進(jìn)行培養(yǎng),追蹤其產(chǎn)生原因,并反復(fù)接種。如不發(fā)生變化,應(yīng)丟棄培養(yǎng)基,禁止使用。海南實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器

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