培養(yǎng)基制備的基本方法:1、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基制備器可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率。陜西進(jìn)口培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,避免有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。Z好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,Z后必須加以補(bǔ)足。新疆瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷。
種子培養(yǎng)基:種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長(zhǎng)和大量繁殖菌絲體,并使菌體長(zhǎng)得粗壯,成為活力強(qiáng)的“種子”。所以種子培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達(dá)到較高的溶解氧,供大量菌體生長(zhǎng)繁殖。種子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過(guò)程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營(yíng)養(yǎng)豐富而完全的天然有機(jī)氮源,因?yàn)橛行┌被崮艽碳ゆ咦影l(fā)芽。但無(wú)機(jī)氮源容易利用,有利于菌體迅速生長(zhǎng),所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機(jī)及無(wú)機(jī)氮源。較后一級(jí)的種子培養(yǎng)基的成分好好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進(jìn)入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長(zhǎng)。
固體斜面培養(yǎng)基配制步驟:1、培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成分的稱?。号囵B(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào),并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。培養(yǎng)基制備器開(kāi)始運(yùn)行樣品量配器并根據(jù)培養(yǎng)基的黏度調(diào)整樣品劑量。
培養(yǎng)基配制--稱量:培養(yǎng)基的制備環(huán)節(jié),應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照培養(yǎng)基配方制備,在培養(yǎng)基的稱量過(guò)程中,建議在干爽、無(wú)風(fēng)的區(qū)域或者通風(fēng)柜中進(jìn)行,這樣能夠避免培養(yǎng)基吸潮使稱量結(jié)果不準(zhǔn)。應(yīng)當(dāng)選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準(zhǔn)確性,同時(shí)稱量過(guò)程中要選擇的稱量匙,避免其他雜質(zhì)混入培養(yǎng)基中。操作人員應(yīng)當(dāng)對(duì)稱量過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)的記錄,記錄中應(yīng)該體現(xiàn)培養(yǎng)基名稱、批號(hào)、稱量數(shù)量、具體配制方法、制備人姓名日期、復(fù)核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調(diào)查。培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌。天津培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大,會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高,使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。陜西進(jìn)口培養(yǎng)基制備器
配制培養(yǎng)基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對(duì)糖類要求更高的培養(yǎng)基,可先將糖過(guò)濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。長(zhǎng)時(shí)間高溫滅菌也會(huì)使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽(yáng)離子形成難溶性化合物而產(chǎn)生沉淀。為了防止這類沉淀發(fā)生,可將這些物質(zhì)分別滅菌,冷卻后再混合;也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡(luò)合物,防止沉淀的產(chǎn)生。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應(yīng)在配制培養(yǎng)基時(shí)加以調(diào)節(jié)。陜西進(jìn)口培養(yǎng)基制備器