上海自動(dòng)培養(yǎng)基制備器

配制培養(yǎng)基的原則：根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。由于微生物營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型復(fù)雜，不同微生物有不同的營(yíng)養(yǎng)要求。因此，要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力，能以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物如co2和無(wú)機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此，培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適：微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低不能滿(mǎn)足現(xiàn)生長(zhǎng)需要，過(guò)高又抑制其生長(zhǎng)。例如，適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源，但高濃度蔗糖則抑制菌體生長(zhǎng)。金屬離子是微生物生長(zhǎng)所不可缺少的礦質(zhì)養(yǎng)分，但濃度擴(kuò)大，尤其是重金屬離子，反而抑制其生長(zhǎng)，甚至產(chǎn)生殺菌作用。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性。上海自動(dòng)培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對(duì)象，二是取材過(guò)程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無(wú)病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi)，取材過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定?！队脛?dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國(guó)家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。有些國(guó)家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌，保證無(wú)菌。無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國(guó)家要求無(wú)細(xì)菌噬菌體污染。對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。中國(guó)香港觸摸屏培養(yǎng)基制備器一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。

培養(yǎng)基在使用前通過(guò)高壓或過(guò)濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng)：確認(rèn)工作細(xì)胞庫(kù)是否被污染，確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染，確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細(xì)菌、及支原體無(wú)菌試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時(shí)即可觀察有無(wú)污染。其它：高壓滅菌設(shè)備、過(guò)濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證，后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作（至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次）。另外，應(yīng)將有毒區(qū)與無(wú)毒區(qū)嚴(yán)格分開(kāi)，并有各自獨(dú)自的空氣凈化系統(tǒng)及孵室，有毒區(qū)對(duì)無(wú)毒區(qū)應(yīng)保持相對(duì)負(fù)壓，防止病毒對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞（尤其是細(xì)胞庫(kù)）的污染。

培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源（生長(zhǎng)因子）等。（1）碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無(wú)機(jī)碳源；糖類(lèi)、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。（2）氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無(wú)機(jī)氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機(jī)氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培養(yǎng)基還要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無(wú)氧的條件。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。

培養(yǎng)基制備器：1.操作簡(jiǎn)單，安全可靠。溫度和壓力嚴(yán)格控制鎖定裝載艙口和外部蓋子，不存在意外打開(kāi)，保證了環(huán)境和操作者的安全。內(nèi)部的管道和容器可以更換，方便移除和清洗。每一款MediaPrep高壓滅菌器都是這樣裝配和控制的，是一種標(biāo)準(zhǔn)配置。2.高效而強(qiáng)大的加熱和制冷系統(tǒng)功能強(qiáng)大的加熱器，能夠迅速加熱；快速制冷是通過(guò)循環(huán)水和壓力(加入內(nèi)部的軟化水產(chǎn)生的)所進(jìn)行的。利用與外部水連接的盤(pán)狀熱交換器，能夠使內(nèi)部迅速冷卻，整個(gè)過(guò)程包括：加熱、滅菌和冷卻(至50°C)，依據(jù)容器的大小、培養(yǎng)基的數(shù)量和冷卻水的溫度，只需60－120分鐘即可完成。負(fù)載的壓力，有效地避免了培養(yǎng)基過(guò)溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生?？諝鈮嚎s機(jī)是內(nèi)置的。全自動(dòng)控制程序，確保內(nèi)部溫度均一，從而保證了配制和滅菌的培養(yǎng)基具有更高的質(zhì)量，整個(gè)過(guò)程，在一個(gè)設(shè)定溫度內(nèi)，從初的加熱到混合和滅菌，后到冷卻，都是微處理器控制的，而且滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大，并附有保險(xiǎn)鎖。殺菌劑可從此口加入，也可用注射器從硅酮膜注入。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)。河北實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的分裝：培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。上海自動(dòng)培養(yǎng)基制備器

無(wú)菌補(bǔ)料：通過(guò)分裝口可以定量添加無(wú)菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過(guò)使用一個(gè)瓶子將添加劑添加到分裝開(kāi)口或通過(guò)一個(gè)septum膜，使用注射器將添加劑加入，確保了添加劑的無(wú)菌添加。無(wú)菌分裝：培養(yǎng)基制備器的分裝口可以在分裝的時(shí)候打開(kāi)，用于無(wú)菌分裝培養(yǎng)基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養(yǎng)基的無(wú)菌分裝，硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養(yǎng)基可以通過(guò)集成的空壓機(jī)產(chǎn)生的無(wú)菌空氣壓力分裝或通過(guò)連接到常見(jiàn)的蠕動(dòng)泵或其他集成成泵的裝置，來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)基的分裝。上海自動(dòng)培養(yǎng)基制備器