背景技術(shù):培養(yǎng)基是供微生物、植物、動(dòng)物組織和細(xì)菌生長和維持生長用的人工配置的養(yǎng)料,完全滅菌后用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定,一般都是在無菌狀態(tài)下儲(chǔ)存,定量使用的,屬于一種高新產(chǎn)業(yè)。傳統(tǒng)的制備培養(yǎng)基的過程先將培養(yǎng)基粉末進(jìn)行人工配置,攪勻,然后再裝到錐形瓶里邊在蒸汽滅菌器里邊滅菌再使用,這需要耗費(fèi)大量的人力物力,而且效率不高。目前,國外進(jìn)口的培養(yǎng)基制備器,可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率,而且節(jié)省了人力物力,但是國外的的進(jìn)口設(shè)備價(jià)格比較昂貴,因此造成了生產(chǎn)成本的高居不下,在用戶的使用范圍上造成了一定的局限性。目前國內(nèi)沒有公司生產(chǎn)該的培養(yǎng)基制備器,因此,完成培養(yǎng)基配置、滅菌一體化顯得尤為重要。液體培養(yǎng)基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。中國臺(tái)灣培養(yǎng)基制備器報(bào)價(jià)
常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的較基本的營養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。安徽培養(yǎng)基制備器定制。液體培養(yǎng)基是培養(yǎng)基物理分類一種,是相對(duì)固體培養(yǎng)基而言的,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基配制--容器和水:配制培養(yǎng)基所用的容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量,一般為玻璃容器,培養(yǎng)基配制所用的容器和配套器具應(yīng)潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)殘留。在大體積配制培養(yǎng)基時(shí),企業(yè)也可根據(jù)自己的情況采用不銹鋼容器,建議專鍋,且容器應(yīng)潔凈。不建議使用陶瓷或搪瓷容器。培養(yǎng)基用水是培養(yǎng)基制備過程中非常重要的一個(gè)物質(zhì)。不可以使用自來水,自來水中的雜質(zhì)可能會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有一定的影響。許多法規(guī)在培養(yǎng)基配方中采用蒸餾水作為配制用水,實(shí)際上純化水的潔凈程度不差于蒸餾水,甚至更優(yōu),所以不必單獨(dú)制備蒸餾水,直接使用純化水即可,配制用純化水應(yīng)按藥典的要求定期進(jìn)行檢測。
平板的制備和儲(chǔ)存:傾注融化的培養(yǎng)基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3mm(直徑90mm的平皿,通常要加入18mL?20mL瓊脂培養(yǎng)基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲(chǔ)存,或者培養(yǎng)時(shí)間超過48h或培養(yǎng)溫度高于40℃,則需要傾注更多的培養(yǎng)基。凝固后的培養(yǎng)基應(yīng)立即使用或存放于暗處和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培養(yǎng)基成分的改變。在平板底部或側(cè)邊做好標(biāo)記,標(biāo)記的內(nèi)容包括名稱、制備日期和(或)有效期。也可使用適宜的培養(yǎng)基編碼系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)記。將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲(chǔ)存期限。為了避免冷凝水的產(chǎn)生,平板應(yīng)冷卻后再裝入袋中。儲(chǔ)存前不要對(duì)培養(yǎng)基表面進(jìn)行干燥處理。對(duì)于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,應(yīng)先對(duì)瓊脂表面進(jìn)行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱或培養(yǎng)箱中(溫度設(shè)為25~50℃);或放在有對(duì)流的無菌凈化臺(tái)中,直到培養(yǎng)基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)按照廠商提供的說明使用。培養(yǎng)基制備器可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率。
溶化:培養(yǎng)基放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。如果培養(yǎng)基中不含有瓊脂,培養(yǎng)基不需要加熱;如果含有瓊脂,則需要用本生燈或電磁爐加熱煮沸,完全溶解后,再補(bǔ)齊所需水,并攪拌均勻。如果配置的培養(yǎng)基量很大,可用不銹鋼鍋加熱溶化,可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng),防止焦化,如有焦化現(xiàn)象,配制的培養(yǎng)基就不能使用,要重新配制。配制培養(yǎng)基時(shí)不可用銅或鐵的容器溶化,因銅或鐵制容器可能會(huì)使培養(yǎng)基中的銅和鐵的含量超標(biāo),影響實(shí)驗(yàn)(培養(yǎng)基中銅含量大于0.3mg/L,細(xì)菌不宜生長,鐵含量超過0.14mg/L,妨礙細(xì)菌產(chǎn)有害)。對(duì)容易發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生沉淀的藥品,要分開溶解,較后加入培養(yǎng)基,如磷酸二氫鉀和硫酸鎂。培養(yǎng)基制備器解凍血清時(shí),請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)。新疆培養(yǎng)基制備器售后
液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。中國臺(tái)灣培養(yǎng)基制備器報(bào)價(jià)
血清培養(yǎng)基主要問題:血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌有毒的等都會(huì)影響細(xì)胞生長,甚至造成細(xì)胞死亡。動(dòng)物個(gè)體不同,血清產(chǎn)地、批號(hào)不同,每批質(zhì)量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響,可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來源越來越困難,價(jià)格昂貴,是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)生產(chǎn)成本的主要部分之一。中國臺(tái)灣培養(yǎng)基制備器報(bào)價(jià)