高壓滅菌造成培養(yǎng)基結(jié)焦焦化問題:在實驗過程中,檢測人員發(fā)現(xiàn)在高壓滅菌后的培養(yǎng)基有結(jié)焦焦化現(xiàn)象。微生物認為造成這種現(xiàn)象是:控制培養(yǎng)基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長時間存放。以上原因都會導致培養(yǎng)基結(jié)焦焦化。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基pH值的調(diào)正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化。自動培養(yǎng)基制備器哪家好
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后.還應進行一次檢查。2.培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。自動培養(yǎng)基制備器哪家好培養(yǎng)基制備器可直接連接標準、通用的蠕動泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補足。
Systec培養(yǎng)基準備器可以快速的準備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導),加入培養(yǎng)基原料,準備啟動滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內(nèi)懸浮溶解。強力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性,并防止凝結(jié)。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水?。┠J筋A先溶解。同時,直觀的圖形化界面使沒有經(jīng)過專門培訓的人員也能方便的操作。用戶可以自定義設置多達50個滅菌程序,比如滅菌溫度、時間、分裝溫度等。它們可以被儲存起來并隨時調(diào)用。培養(yǎng)基制備器對于采用表面接種形式培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基,應先對瓊脂表面進行干燥。
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基滅菌處理:分裝完成的培養(yǎng)基應馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養(yǎng)基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當中'海培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時可以使用此方法。一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。自動培養(yǎng)基制備器哪家好
低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。自動培養(yǎng)基制備器哪家好
MS培養(yǎng)基的特點:MS培養(yǎng)基普遍被使用,它的無機鹽濃度較高,十分有利于組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)和加速愈傷組織的生長。因為配方中的離子濃度高,在配制、貯存、消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來對愈傷組織可以進行誘導,或者用來培養(yǎng)胚、莖段、莖尖及花藥。在進行細胞懸浮培養(yǎng)時,它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,有比較適當比例和數(shù)量的無機養(yǎng)分,能夠滿足植物細胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分不需要再被添加。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。自動培養(yǎng)基制備器哪家好