山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

三角培養(yǎng)瓶是細胞培養(yǎng)中的常用耗材，也可用于培養(yǎng)基的配制、混合及儲存。利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可以按照以下步驟操作：配料：配方換算→在容器中加入少量水（蒸餾水，自然水）→按照配方稱取各種藥品（依次加入）→加足所需水量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。溶解：淀粉溶解：少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH：用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過濾：濾紙或棉花進行過濾。分裝：一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。三角培養(yǎng)瓶：若作靜置培養(yǎng)，則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角培養(yǎng)瓶，很多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養(yǎng)，則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶，保證通氣良好。試管分裝：液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml，約試管的1/4高度；固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml，約試管的1/5高度。在配制培養(yǎng)基時應(yīng)盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備基本方法：培養(yǎng)基配方的選定，同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的加以選用，記錄其來源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整，培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此，對這個步驟，操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。中國香港自動攪拌培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器微生物細胞組成元素的調(diào)查或分析，是設(shè)計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù)。

液體培養(yǎng)基：為確定液體培養(yǎng)基的生長率，應(yīng)接種適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養(yǎng)基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養(yǎng)后，計數(shù)或計算液體培養(yǎng)基分?jǐn)?shù)而得出其生長數(shù)量的。對于液體培養(yǎng)基定性測試方法，則通過肉眼觀察來實現(xiàn)。目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的定量稀釋法步驟如下：選擇液體培養(yǎng)基10mL/管待檢。接種目標(biāo)菌：將少量測試菌株培養(yǎng)物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯，混勻。接種非目標(biāo)菌：將大量測試菌株培養(yǎng)物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯，混勻。

培養(yǎng)基的分裝：培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎（現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時滅菌，以為測定該批培養(yǎng)基好終pH之用。培養(yǎng)基制備器滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前，將鍋內(nèi)氣體排干凈。

微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點：培養(yǎng)基分裝，準(zhǔn)備好的中.海培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器，分裝試管量大采用自動分液器，分裝試管量小，可以用漏斗分液。分液量不超過容器體積的三分之二。三角瓶不要超過體積的二分之一；瓊脂斜面不要超過試管長度的五分之一。滅菌后斜面應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之一，底層應(yīng)為培養(yǎng)基量的三分之二；半固態(tài)瓊脂的體積為三分之一；用于接種或保護細菌的高級瓊脂，分裝試管長度的三分之一和四分之一，接種厭氧菌的量應(yīng)達到三分之二；瓊脂平板90毫米內(nèi)徑13~15毫升，內(nèi)徑70毫米8~10毫升。如果瓊脂平板表面較水，可將平板倒置，置于37℃培養(yǎng)箱中三十分鐘，晾干后使用。每批培養(yǎng)基分裝在二十毫升左右的小玻璃瓶中，與該批培養(yǎng)基同時滅菌，在以確定這批培養(yǎng)基的很終pH值。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法，濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形，以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。中國香港自動攪拌培養(yǎng)基制備器

固體培養(yǎng)基根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

制備的方法和注意事項：1培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。山東瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器