湖南Systec培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基配置原則：控制pH條件，當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時(shí)，H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物，培養(yǎng)基pH不會(huì)過度降低；如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加，OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物，培養(yǎng)基pH也不會(huì)過度升高。但KH2PO4和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍內(nèi)（6.4-7.2）起調(diào)節(jié)作用。有些微生物，如乳酸菌能大量產(chǎn)酸，上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用，此時(shí)可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽（如CaCO3）來進(jìn)行調(diào)節(jié)，CaCO3難溶于水，不會(huì)使培養(yǎng)基pH過度升高，但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸，同時(shí)釋放出CO2，將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內(nèi)。在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng)，如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)都屬于兩性電解質(zhì)，也可起到緩沖劑的作用。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：成分基本上溶于水，沒有明顯的固形物，。湖南Systec培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基配制：素：為防止培養(yǎng)時(shí)期細(xì)菌的污染，可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)素，一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素（PHA）：非增殖期的細(xì)胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細(xì)胞，但在離體培養(yǎng)過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞而進(jìn)入有絲分裂。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時(shí)和68-72小時(shí)。PHA有粘多糖，蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA的細(xì)胞數(shù)隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細(xì)胞均被為止，但PHA濃度過高會(huì)引起凝集，一般采用4%濃度為好。自動(dòng)培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器小倒管浸滿培養(yǎng)基（不留氣泡）后再加入到盛LST的試管中。

配制培養(yǎng)基的原則：滅菌處理：為了避免雜菌污染，獲得微生物純培養(yǎng)物，培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對糖類要求更高的培養(yǎng)基，可先將糖過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合。長時(shí)間高溫滅菌也會(huì)使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產(chǎn)生沉淀。為了防止這類沉淀發(fā)生，可將這些物質(zhì)分別滅菌，冷卻后再混合；也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸，即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡(luò)合物，防止沉淀的產(chǎn)生。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低，應(yīng)在配制培養(yǎng)基時(shí)加以調(diào)節(jié)。

天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外，也適于用來進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。組合培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如，高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng)，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長速度較慢，一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來進(jìn)行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制，同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備器具有液量分配，時(shí)間分配，復(fù)制分配三種工作模式。

配制培養(yǎng)基需要哪些制備：（1）稱出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖，加水直到培養(yǎng)基較終容積的34，加熱溶解，完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基（不加瓊脂）時(shí)無需加熱。（2）按需要加入一定量的各種貯存母液，包括生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要，培養(yǎng)基中所需的維生素，可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。（3）蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，一般以5.66.0為好。（4）培養(yǎng)基分裝，分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌，也可以高壓滅菌后再進(jìn)行培養(yǎng)基的無菌分裝，室溫下存放備用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存，而含有生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基。廣西瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一。湖南Systec培養(yǎng)基制備器

微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn)：調(diào)培養(yǎng)基pH，雖然中海培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì)，可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，但如果配制的培養(yǎng)基不能要求，則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過的pH計(jì)，則可以使用pH計(jì)。如果沒有，可以使用精確的pH試紙，然后根據(jù)需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進(jìn)行微調(diào)。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進(jìn)行調(diào)整至所需的pH值。培養(yǎng)基有酸性或堿性，pH值一般為7.4～7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質(zhì)，將pH調(diào)至比要求值高0.1～0.2個(gè)單位，因?yàn)橛脷溲趸c調(diào)節(jié)時(shí)，高壓滅菌后介質(zhì)的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養(yǎng)基中含有碳酸鈣，則無需調(diào)整pH值。湖南Systec培養(yǎng)基制備器