云南培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

在制備培養(yǎng)基時(shí)，通常要考慮以下因素：1.緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對(duì)培養(yǎng)物有營(yíng)養(yǎng)作用，因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。2.滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有很寬的耐受范圍，一般常用冰點(diǎn)降低或蒸汽壓升高測(cè)定。如果自己配培養(yǎng)基，可通過(guò)測(cè)定滲透壓防止3.粘度培養(yǎng)基的粘度主要受血清含量的影響，在多數(shù)情況下，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒有什么影響。在攪拌條件下，用羧甲基纖維素增加培養(yǎng)基的粘度，可減輕細(xì)胞損害。這對(duì)在低血清濃度或無(wú)血清下條件下培養(yǎng)細(xì)胞顯得尤為重要。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻。云南培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基配置原則：選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，總體而言，所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水及能源，但由于微生物營(yíng)養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物，因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以（或應(yīng)該）由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。在該培養(yǎng)基配制過(guò)程中并未專門加入其他碳源物質(zhì)，而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。就微生物主要類型而言，有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動(dòng)物、藻類及病毒之分，培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（或簡(jiǎn)稱普通肉湯培養(yǎng)基）培養(yǎng)細(xì)菌，用高氏I號(hào)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌，培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基，培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。云南培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。

培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基成分的稱取:培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，較好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼萵加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。

培養(yǎng)基的安全分裝：無(wú)菌補(bǔ)料：通過(guò)分裝口可以定量添加無(wú)菌添加劑。大尺寸的分裝口帶有安全鎖。通過(guò)使用一個(gè)瓶子將添加劑添加到分裝開口或通過(guò)一個(gè)septum膜，使用注射器將添加劑加入，確保了添加劑的無(wú)菌添加。無(wú)菌分裝：培養(yǎng)基制備器的分裝口可以在分裝的時(shí)候打開，用于無(wú)菌分裝培養(yǎng)基。硅膠管是使用分裝接頭連接到分裝口。為了確保培養(yǎng)基的無(wú)菌分裝，硅膠管和分裝接頭必須提前在滅菌器中滅菌。培養(yǎng)基可以通過(guò)集成的空壓機(jī)產(chǎn)生的無(wú)菌空氣壓力分裝或通過(guò)連接到常見的蠕動(dòng)泵或其他集成成泵的裝置，來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)基的分裝。分裝選項(xiàng)：制備和滅菌過(guò)的培養(yǎng)基可以通過(guò)一個(gè)軟管進(jìn)行分裝。在每次滅菌進(jìn)程中，內(nèi)吸管和分裝口也通過(guò)進(jìn)入的蒸汽進(jìn)行了滅菌。分裝軟管和連接到該軟管的分裝接頭必須使用合適的蒸汽滅菌工藝預(yù)先滅菌，并且必須在無(wú)菌條件下連接到分裝口。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí)，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。

牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(又稱營(yíng)養(yǎng)肉湯,用于培養(yǎng)細(xì)菌)：成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:將各成分溶解于水中，于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計(jì)校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜)，或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用。化學(xué)分類：天然培養(yǎng)基指一類利用動(dòng)、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。組合培養(yǎng)基又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基，是一類按微生物的營(yíng)養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制，同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。有的培養(yǎng)基還含有素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。天津自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器

半固體培養(yǎng)基，指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。云南培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器

制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基：培養(yǎng)基滅菌后，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基，須趁培養(yǎng)基未凝固時(shí)進(jìn)行。(1)制作斜面培養(yǎng)基。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上放1支長(zhǎng)0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右，將試管頭部枕在木條上，使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。(2)制作平板培養(yǎng)基。將剛剛滅過(guò)菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，點(diǎn)燃酒精燈，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒，左手打開培養(yǎng)皿蓋，右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，每皿約倒入10毫升，以鋪滿皿底為度。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右，待培養(yǎng)基凝固后，再5個(gè)培養(yǎng)皿一疊，倒置過(guò)來(lái)，平放在恒溫箱里，24小時(shí)后檢查，如培養(yǎng)基末長(zhǎng)雜菌，即可用來(lái)培養(yǎng)微生物。云南培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器