培養(yǎng)基的類型:天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng)、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來(lái)講,營(yíng)養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長(zhǎng)旺盛,而且來(lái)源普遍,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號(hào)等因素的影響。培養(yǎng)基制備器具有液量分配,時(shí)間分配,復(fù)制分配三種工作模式。江西培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀,因此,須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過(guò)濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過(guò)濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過(guò)濾。如過(guò)濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶?jī)?nèi),裝入量不得超過(guò)燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個(gè)雞蛋的蛋白.強(qiáng)力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過(guò)濾即可。江西培養(yǎng)基制備器售后制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻。
在制備培養(yǎng)基時(shí),通常要考慮以下因素:1.緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對(duì)培養(yǎng)物有營(yíng)養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。2.滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點(diǎn)降低或蒸汽壓升高測(cè)定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過(guò)測(cè)定滲透壓防止3.粘度培養(yǎng)基的粘度主要受血清含量的影響,在多數(shù)情況下,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有什么影響。在攪拌條件下,用羧甲基纖維素增加培養(yǎng)基的粘度,可減輕細(xì)胞損害。這對(duì)在低血清濃度或無(wú)血清下條件下培養(yǎng)細(xì)胞顯得尤為重要。
種子培養(yǎng)基:種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長(zhǎng)和大量繁殖菌絲體,并使菌體長(zhǎng)得粗壯,成為活力強(qiáng)的“種子”。所以種子培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達(dá)到較高的溶解氧,供大量菌體生長(zhǎng)繁殖。種子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過(guò)程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營(yíng)養(yǎng)豐富而完全的天然有機(jī)氮源,因?yàn)橛行┌被崮艽碳ゆ咦影l(fā)芽。但無(wú)機(jī)氮源容易利用,有利于菌體迅速生長(zhǎng),所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機(jī)及無(wú)機(jī)氮源。較后一級(jí)的種子培養(yǎng)基的成分好好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進(jìn)入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長(zhǎng)。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):全自動(dòng)程序,無(wú)人值守;分裝過(guò)程無(wú)需人工干預(yù)。
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:―般要求:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的好基礎(chǔ)步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說(shuō)明。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說(shuō)明配制。如重量(體積)、pH制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,并記錄相關(guān)信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無(wú)菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便溯源。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):一鍵選擇培養(yǎng)皿類型;整合數(shù)據(jù)庫(kù),預(yù)設(shè)培養(yǎng)皿尺寸選擇程序。中國(guó)香港培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):儀器蓋設(shè)計(jì)保護(hù)鎖,超過(guò)100度自動(dòng)加鎖,使實(shí)驗(yàn)環(huán)境更安全。江西培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基配制:素:為防止培養(yǎng)時(shí)期細(xì)菌的污染,可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)素,一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的細(xì)胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細(xì)胞,但在離體培養(yǎng)過(guò)程中,在PHA的作用下,可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞而進(jìn)入有絲分裂。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時(shí)和68-72小時(shí)。PHA有粘多糖,蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA的細(xì)胞數(shù)隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細(xì)胞均被為止,但PHA濃度過(guò)高會(huì)引起凝集,一般采用4%濃度為好。江西培養(yǎng)基制備器售后