微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基擺斜面,滅菌完成后,將試管中的中海瓊脂培養(yǎng)基放在木棒或玻璃棒上,同時它很熱,并且有適當?shù)钠露?。冷卻后使瓊脂凝固并變成斜面。斜面長度不超過試管的二分之一。微生物培養(yǎng)基質(zhì)檢,檢驗培養(yǎng)基滅菌后,發(fā)現(xiàn)有破損,浸水,顏色異常,棉塞被培養(yǎng)基污染。所有這些都必須丟棄,不能重復使用,并確定其很終pH值。無菌檢查和效果檢查也是必需的。無菌檢查是取1~2瓶無菌培養(yǎng)基,37℃孵育一兩天,確認無細菌生長;效果檢查是將標準菌株接種到相關(guān)培養(yǎng)基上進行細菌檢查。動物的生長、形態(tài)和生化條件與已知條件一致。兩個條件都合格,準備好的培養(yǎng)基就可以使用了。培養(yǎng)基制備器可直接連接標準、通用的蠕動泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。中國香港培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量標準:血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi),取材過程應(yīng)嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴格的質(zhì)量鑒定?!队脛游锛毎w外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。對細胞有良好的支持繁殖作用。山西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì),在細菌和細胞培養(yǎng)中十分必要。
培養(yǎng)基配置原則:在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養(yǎng)基時,常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。在配制培養(yǎng)基過程中,泡沫的存在對滅菌處理極不利,因為泡沫中的空氣形成隔熱層,使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當提高滅菌溫度。
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基溶化,將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水攪拌均勻。如準備的北京中海培養(yǎng)基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象,則制備好的培養(yǎng)基將無法使用,必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基,因為銅或鐵容器可能會導致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標,影響實驗結(jié)果,其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升,細菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升,防止細菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應(yīng)和沉淀的藥物應(yīng)單獨溶解,然后加入培養(yǎng)基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內(nèi)。
分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料,適于作生理等研究,由于發(fā)酵率高,操作、方便,也常用于發(fā)酵工業(yè)。(3)半固體培養(yǎng)基。是在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態(tài)。固體培養(yǎng)基的制作步驟:1、首先我們要準備好一個裝有1000ml的燒杯,然后在準備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中。2、其次我們在調(diào)節(jié)PH值,調(diào)節(jié)時需要百分之10的氫氧化鈉溶液,將PH值調(diào)到7.2,在此也要定容到1000ml,較后在將這些液體都分別放入10個錐形瓶內(nèi),每一瓶都裝100ml。脫水培養(yǎng)基,又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。山西不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器
選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基。中國香港培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器
配制好的培養(yǎng)基保存:滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度,避免長時間保存在滅菌鍋內(nèi),造成過度滅菌,影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。所配制的培養(yǎng)基的量,應(yīng)該是在較長保存期限內(nèi)正好使用完。含染料的培養(yǎng)基應(yīng)閉光保存;倒好的瓊脂平板如果配制的當天未使用完,應(yīng)于冷藏保存,如果保存時間超過2天,應(yīng)將其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養(yǎng)基如果保存時間超過2個星期,應(yīng)將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發(fā)。中國香港培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器