斑馬魚實(shí)驗(yàn)室技術(shù)建設(shè)

斑馬魚血管生成基因如血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）、an-iopoietins、ephrions及相應(yīng)受體與哺乳動(dòng)物功能相似，而且斑馬魚血管系統(tǒng)及其對(duì)調(diào)節(jié)血管新生類藥物的***反應(yīng)與哺乳動(dòng)物類似。另外斑馬魚胚胎在血液循環(huán)系統(tǒng)嚴(yán)重缺陷的情況下仍能存活，且胚胎透明，利用血管轉(zhuǎn)基因熒光斑馬魚可以在24小時(shí)以內(nèi)就定量評(píng)價(jià)藥物的血管形成***作用。

與傳統(tǒng)的雞胚尿囊膜、小鼠角膜實(shí)驗(yàn)相比，斑馬魚更加便捷、快速、高效，而且結(jié)果定量分析的準(zhǔn)確度更高。

目前多個(gè)出于臨床試驗(yàn)階段的抗血管生成靶向候選***藥如SU5416、SU6668、TNP470、SU4312和AG1478等均對(duì)斑馬魚的血管形成有***的***效果。用斑馬魚篩選發(fā)現(xiàn)具有血管形成***活性的中***體化合物也有很多，如靛玉紅、呋喃二烯等。 斑馬魚急性毒性試驗(yàn)試驗(yàn)報(bào)告。斑馬魚實(shí)驗(yàn)室技術(shù)建設(shè)

1、斑馬魚可應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)的細(xì)胞譜系分析、突變鑒別、飽和誘變分析、基因轉(zhuǎn)移研究、基因連鎖圖的構(gòu)建，其體外受精、胚體透明、細(xì)胞分裂快等特點(diǎn)使它比起大小鼠有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。2、基因功能研究：斑馬魚繁殖速度快，能提供足夠量的胚胎用于基因篩選；其胚體透明的特點(diǎn)可以一目了然地觀察到基因突變后的表型變化。3、疾病發(fā)病機(jī)制研究：斑馬魚的發(fā)生、疾病生理、基因組與人類相似度較大，主要信號(hào)通路和基因具高度同源性，諸多斑馬魚疾病（如血、免疫性系統(tǒng)疾病、疾病等）模型已建立，利用斑馬魚的疾病模型來(lái)研究人類相關(guān)疾病是近年全球熱點(diǎn)的科研項(xiàng)目。斑馬魚實(shí)驗(yàn)室技術(shù)建設(shè)斑馬魚在工業(yè)實(shí)驗(yàn)室中常被用作毒理學(xué)檢驗(yàn)。

斑馬魚作為模式生物的起源和發(fā)展1938年，美國(guó)布朗大學(xué)Roosen-Rung教授***報(bào)道斑馬魚發(fā)育形態(tài)學(xué)研究成果。1950年代，美國(guó)羅格斯大學(xué)K.KennethHisaoka教授***報(bào)道斑馬魚毒理學(xué)研究成果。1972年，美國(guó)俄勒岡大學(xué)GeorgeStreisinge教授開始斑馬魚發(fā)育生物學(xué)研究和模式動(dòng)物建立工作。1989年，美國(guó)俄勒岡大學(xué)MonteWesterfield教授出版斑馬魚研究圣經(jīng)TheZebrafishBook***版。1998年，較早斑馬魚模式生物數(shù)據(jù)庫(kù)ZFIN成立。1998年，全球***家斑馬魚藥物研發(fā)服務(wù)外包公司成立。2004年，斑馬魚國(guó)際資源中心（ZIRC）在俄勒岡大學(xué)成立。2011年，斑馬魚模型和技術(shù)研究被列入中國(guó)科技部「重大新藥創(chuàng)制」專項(xiàng)十二五實(shí)施計(jì)劃。2012年，中國(guó)國(guó)家斑馬魚資源中心成立。目前，斑馬魚已經(jīng)成為繼小鼠和大鼠之后的第三大脊椎類模式生物，在發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、藥物研發(fā)以及生態(tài)環(huán)境評(píng)價(jià)等諸多領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。

斑馬魚模型既具有體外實(shí)驗(yàn)快速、高效、費(fèi)用低等優(yōu)勢(shì)，又具有哺乳類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)預(yù)測(cè)性強(qiáng)、可比度高等優(yōu)點(diǎn)，可以有效彌補(bǔ)體外實(shí)驗(yàn)和哺乳類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之間的巨大生物學(xué)斷層，完善現(xiàn)有藥物研發(fā)體系。將斑馬魚模型魚體外實(shí)驗(yàn)和哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相結(jié)合，可以從整體上縮短藥物臨床前早期研發(fā)的實(shí)驗(yàn)周期，降低實(shí)驗(yàn)成本，提高實(shí)驗(yàn)預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確性，進(jìn)而提高藥物研發(fā)效率，降低藥物研發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。全球醫(yī)藥巨頭輝瑞、羅氏、諾華、葛蘭素史克、阿斯利康等都逐漸開始使用斑馬魚技術(shù)進(jìn)行藥物篩選研發(fā)。2009年，斑馬魚藥物毒理學(xué)評(píng)價(jià)技術(shù)通過(guò)FDA和EMA的GLP認(rèn)證，這標(biāo)志著斑馬魚模型的安全藥理學(xué)和毒理學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果可以作為正式材料納入臨床試驗(yàn)申報(bào)資料。2013年，斑馬魚資料用于CFDA臨床申報(bào)，目前，中國(guó)使用斑馬魚實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)申報(bào)CFDA臨床試驗(yàn)批件的新藥研發(fā)項(xiàng)目已經(jīng)有4項(xiàng)，2項(xiàng)已經(jīng)獲得批件。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）越來(lái)越多地應(yīng)用斑馬魚對(duì)臨床前藥物進(jìn)行安全性與毒理性評(píng)價(jià)，并在其官網(wǎng)介紹其研究成果。和其它動(dòng)物模型相比較斑馬魚優(yōu)勢(shì)。

【點(diǎn)評(píng)原理】關(guān)節(jié)軟骨遭到急性外傷和慢性磨損，出現(xiàn)不同程度的損害，導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼、活動(dòng)受限，乃至功能喪失。關(guān)節(jié)軟骨的修正首要靠軟骨細(xì)胞的增殖分化，生產(chǎn)滿足的細(xì)胞外基質(zhì)修正軟骨缺損。人軟骨細(xì)胞通常是停止的，血管化程度低，營(yíng)養(yǎng)首要來(lái)源于關(guān)節(jié)液和軟骨下骨，修正再生則顯得十分有限，需求外源性的手法來(lái)輔佐修正。DXMS破壞軟骨細(xì)胞的代謝平衡，引起軟骨細(xì)胞的逝世或凋亡，從而引起軟骨損害。斑馬魚的骨骼發(fā)育與其他脊椎動(dòng)物骨骼發(fā)育進(jìn)程極其類似，因此，可用于軟骨修正功效點(diǎn)評(píng)。斑馬魚的軟骨首要散布于頭部，包括七對(duì)咽顱軟骨弓（下頜弓、舌弓及五對(duì)鰓弓）和腦顱軟骨。根據(jù)轉(zhuǎn)基因軟骨熒光斑馬魚特性，患有軟骨損害的斑馬魚的軟骨熒光強(qiáng)度會(huì)顯著比正常斑馬魚的軟骨熒光強(qiáng)度要暗許多，能夠顯著被觀察到。利用斑馬魚模型，研究人員可以快速評(píng)估藥物對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的影響，篩選出具有潛在療效的藥物。斑馬魚魚房安裝周期

利用斑馬魚實(shí)驗(yàn)成效點(diǎn)評(píng)。斑馬魚實(shí)驗(yàn)室技術(shù)建設(shè)

模式生物斑馬魚的應(yīng)用斑馬魚在工業(yè)實(shí)驗(yàn)室中常被用作毒理學(xué)檢驗(yàn)，是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織推薦的五種實(shí)驗(yàn)魚種之一。但隨著對(duì)斑馬魚的進(jìn)一步了解，其作為模式生物在生命科學(xué)以及醫(yī)學(xué)研究中的作用正在崛起。以斑馬魚為模型研究目的基因在脊椎動(dòng)物中的表達(dá)和功能利用斑馬魚胚胎透明的特點(diǎn)，構(gòu)建綠色熒光蛋白（GFP）與內(nèi)源性靶蛋白的融合蛋白，通過(guò)觀察融合蛋白的熒光分布情況，借以確定目的基因或目的蛋白的功能和表達(dá)特點(diǎn)。同時(shí)，還可通過(guò)檢測(cè)綠色熒光的分布，監(jiān)測(cè)外源蛋白的表達(dá)在斑馬魚中的表達(dá)與分布情況。斑馬魚實(shí)驗(yàn)室技術(shù)建設(shè)