當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性DNA損害因子誘發(fā)細(xì)胞DNA鏈斷裂時(shí),其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞,在細(xì)胞裂解液作用下,細(xì)胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA以及其他成分均擴(kuò)散到細(xì)胞裂解液中,而核DNA因?yàn)榉肿恿刻笾荒芰粼谠?。在中性條件下,DNA可進(jìn)入凝膠發(fā)生搬遷,而在堿性電解質(zhì)的作用下,DNA發(fā)生解螺旋,損害的DNA斷鏈及片段被釋放出來。因?yàn)檫@些DNA的分子量小且堿變性為單鏈,所以在電泳過程中帶負(fù)電荷的DNA會(huì)離開核DNA向正極搬遷構(gòu)成“彗星”狀圖像,而未受損害的DNA部分保持球形。DNA受損越嚴(yán)重,發(fā)生的斷鏈和斷片越多,長(zhǎng)度也越小,在相同的電泳條件下搬遷的DNA量就愈多,搬遷的距離就愈長(zhǎng)。通過測(cè)定DNA搬遷部分的光密度或搬遷長(zhǎng)度就可以測(cè)定單個(gè)細(xì)胞DNA損害程度,然后確認(rèn)受試物的作用劑量與DNA損害效應(yīng)的聯(lián)系。彗星試驗(yàn)檢測(cè)低濃度基因毒物具有高靈敏性,研究的細(xì)胞不需處于有絲分裂期。一起,這種技術(shù)只需要少數(shù)細(xì)胞。斑馬魚試驗(yàn)成功驗(yàn)證中藥在體內(nèi)的效果機(jī)理。生物檢測(cè)技術(shù)斑馬魚
人們發(fā)現(xiàn),斑馬魚的優(yōu)點(diǎn)十分,比如斑馬魚與人類基因十分相似,其信號(hào)傳導(dǎo)通路與人類基本近似,生物結(jié)構(gòu)和生理功能與哺乳動(dòng)物高度相似,具有個(gè)體小、發(fā)育周期短、實(shí)驗(yàn)周期短、費(fèi)用低、體外受精、透明、單次產(chǎn)卵數(shù)較高以及實(shí)驗(yàn)用藥量小等優(yōu)點(diǎn),斑馬魚作為模式動(dòng)物受到運(yùn)用。之后的歷史上,科學(xué)家們用模式生物斑馬魚開展了許多實(shí)驗(yàn)。1995年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)得主ChristianeNusslein-Volhard致力于識(shí)別和分類對(duì)決定身體計(jì)劃和身體片段形成至關(guān)重要的少量基因,將目光轉(zhuǎn)向魚類,以此發(fā)現(xiàn)的突變。斑馬魚在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用實(shí)驗(yàn)、視網(wǎng)膜實(shí)驗(yàn)、心臟再生實(shí)驗(yàn)上發(fā)揮著關(guān)鍵作用,目前已建立高尿酸血癥、、抑制血管生成、發(fā)育毒性、睡眠行為等多種模型,并已應(yīng)用于多種藥物篩選評(píng)價(jià)。斑馬魚新藥篩選和研究平臺(tái)斑馬魚毒性測(cè)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)。
斑馬魚由于養(yǎng)殖方便、繁殖周期短、產(chǎn)卵量大、胚胎體外受精、體外發(fā)育、胚體透明,已成為生命科學(xué)研究的新寵。全球范圍內(nèi)有超過1500個(gè)斑馬魚實(shí)驗(yàn)室。利用斑馬魚,可以研究生命科學(xué)的基礎(chǔ)問題,揭示胚胎和組織***發(fā)育的分子機(jī)理;可以構(gòu)建人類的各種疾病和**模型,建立藥物篩選和***的研究平臺(tái);可以建立毒理學(xué)和水產(chǎn)育種學(xué)模型,研究和解決環(huán)境科學(xué)和農(nóng)業(yè)科學(xué)的重大問題。目前我國(guó)有250個(gè)以上的實(shí)驗(yàn)室利用斑馬魚開展相關(guān)科學(xué)研究。為進(jìn)一步加強(qiáng)國(guó)內(nèi)斑馬魚研究人員之間的交流,在2011年廣州舉辦的第二屆全國(guó)斑馬魚研討會(huì)上,包括孟安明院士在內(nèi)的全國(guó)斑馬魚研究學(xué)術(shù)集體商定,今后的全國(guó)性斑馬魚會(huì)議采取“PI大會(huì)”和“研究大會(huì)”的形式交替隔年舉行,并決定自今年起固定在水生所召開“全國(guó)斑馬魚PI大會(huì)”。此次舉行的斑馬魚PI大會(huì)也作為國(guó)家斑馬魚資源中心在水生所揭牌后所召開的一次學(xué)術(shù)慶祝大會(huì)。
【點(diǎn)評(píng)原理】關(guān)節(jié)軟骨遭到急性外傷和慢性磨損,出現(xiàn)不同程度的損害,導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼、活動(dòng)受限,乃至功能喪失。關(guān)節(jié)軟骨的修正首要靠軟骨細(xì)胞的增殖分化,生產(chǎn)滿足的細(xì)胞外基質(zhì)修正軟骨缺損。人軟骨細(xì)胞通常是停止的,血管化程度低,營(yíng)養(yǎng)首要來源于關(guān)節(jié)液和軟骨下骨,修正再生則顯得十分有限,需求外源性的手法來輔佐修正。DXMS破壞軟骨細(xì)胞的代謝平衡,引起軟骨細(xì)胞的逝世或凋亡,從而引起軟骨損害。斑馬魚的骨骼發(fā)育與其他脊椎動(dòng)物骨骼發(fā)育進(jìn)程極其類似,因此,可用于軟骨修正功效點(diǎn)評(píng)。斑馬魚的軟骨首要散布于頭部,包括七對(duì)咽顱軟骨弓(下頜弓、舌弓及五對(duì)鰓弓)和腦顱軟骨。根據(jù)轉(zhuǎn)基因軟骨熒光斑馬魚特性,患有軟骨損害的斑馬魚的軟骨熒光強(qiáng)度會(huì)顯著比正常斑馬魚的軟骨熒光強(qiáng)度要暗許多,能夠顯著被觀察到。斑馬魚基因保守性主要體現(xiàn)在與人類和其他脊椎動(dòng)物基因的相似性上,包括與神經(jīng)系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)等相關(guān)基因。
【斑馬魚高通量技術(shù)】斑馬魚高通量技術(shù),是一種可支持同時(shí)間對(duì)數(shù)十、上百樣品進(jìn)行檢測(cè),并以相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫(kù)支持整個(gè)實(shí)驗(yàn)體系高效運(yùn)轉(zhuǎn)的高可靠性篩選技術(shù)。目前,環(huán)特通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)分析等重要節(jié)點(diǎn)進(jìn)行深度優(yōu)化,強(qiáng)勢(shì)推出斑馬魚高通量篩選技術(shù)。該技術(shù)可將項(xiàng)目交付周期縮短至10-15天,并衍生出三個(gè)梯度的技術(shù)方案?!緝?yōu)勢(shì)】高效:斑馬魚胚胎發(fā)育速度快,其1天生長(zhǎng)相當(dāng)于鼠類8~10天,實(shí)驗(yàn)周期大幅縮短,效率更高。高可靠:基因相似度與人體達(dá)87%,與人體對(duì)應(yīng)性強(qiáng),雌魚單次產(chǎn)卵超200枚,樣本量大、個(gè)體差異小,結(jié)果更可靠。高性價(jià)比:斑馬魚實(shí)驗(yàn)用樣量*為小鼠的1/1000~1/100,加之實(shí)驗(yàn)效率大幅提升后,帶來極具吸引力的成本優(yōu)勢(shì)。定制靈活:方案設(shè)計(jì)靈活,可定制化程度高,能滿足不同樣品數(shù)量和實(shí)驗(yàn)?zāi)康男枨?。斑馬魚是什么?斑馬魚試驗(yàn)的來源及特色?斑馬魚檢測(cè)評(píng)價(jià)報(bào)告
斑馬魚實(shí)驗(yàn)環(huán)境毒理學(xué)評(píng)價(jià)。生物檢測(cè)技術(shù)斑馬魚
斑馬魚是功能基因組是科學(xué)研究中比較重要的模式生物之一,已經(jīng)推動(dòng)了遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和疾病研究等多個(gè)領(lǐng)域的研究與應(yīng)用發(fā)展。斑馬魚具有胚胎透明、體外發(fā)育等特點(diǎn),在受精后48小時(shí)內(nèi)基本形成,所有發(fā)育階段的胚胎均可在顯微鏡下操作和觀測(cè),不但可以直接觀察和追蹤基因和細(xì)胞在發(fā)育中的行為,而且易于在整體動(dòng)物模型中研究其調(diào)控機(jī)制。斑馬魚個(gè)體小,易于低成本地在實(shí)驗(yàn)室大量養(yǎng)殖,遺傳學(xué)和胚胎學(xué)操作比小鼠等哺乳動(dòng)物模型更易于掌握,適合多種疾病模型的建立。另外,斑馬魚胚胎產(chǎn)量高,可以用高通量方法篩選與基因和細(xì)胞功能相關(guān)的小分子化合物。生物檢測(cè)技術(shù)斑馬魚