中國斑馬魚技術(shù)產(chǎn)業(yè)應(yīng)用史,就是環(huán)特生物的發(fā)展史。憑借在斑馬魚PDTX技術(shù)及科研服務(wù)方面逾20年的深厚積累,環(huán)特生物以斑馬魚轉(zhuǎn)基因、基因敲除、敲入,尤其是國際帶動(dòng)的基因置換技術(shù)為關(guān)鍵,專注于提供各種遺傳工程斑馬魚的定制、斑馬魚基因編輯技術(shù)及斑馬魚疾病模型開發(fā)等專業(yè)技術(shù)服務(wù),不僅可以實(shí)現(xiàn)構(gòu)建復(fù)雜基因敲入,包括點(diǎn)突變、條件性敲除等難度較高斑馬魚基因編輯技術(shù)服務(wù),而且可以通過斑馬魚基因編輯可視化技術(shù),實(shí)現(xiàn)可視化基因型篩選,減少其它動(dòng)物模型中大量的基因型篩選和鑒定工作,比較大化發(fā)揮斑馬魚模型未來的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。斑馬魚的皮膚有一定的保護(hù)功能,可抵御部分病菌入侵。肝臟熒光轉(zhuǎn)基因斑馬魚模型
斑馬魚終生棲居于復(fù)雜水生環(huán)境,水溫時(shí)冷時(shí)熱、水質(zhì)污染頻發(fā)、病原體伺機(jī)而動(dòng),面對(duì)重重生存挑戰(zhàn),Cdx 基因化身 “應(yīng)急指揮官”,迅速jihuo機(jī)體應(yīng)激響應(yīng)機(jī)制,全力守護(hù)生命火種。氣溫陡變的季節(jié),水溫猶如過山車般起伏,斑馬魚細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性岌岌可危。此時(shí),Cdx 基因緊急 “調(diào)兵遣將”,上調(diào)熱休克蛋白基因表達(dá),促使大量熱休克蛋白奔赴 “戰(zhàn)場(chǎng)”,它們緊緊簇?fù)碓诘鞍踪|(zhì)周圍,如同給脆弱分子披上堅(jiān)固 “鎧甲”,有效抵御溫度沖擊,防止蛋白質(zhì)變性、聚集,維系細(xì)胞正常代謝與生理功能。斑馬魚crispr-cas9基因敲入機(jī)構(gòu)它在水中的呼吸依靠鰓部,水流經(jīng)鰓時(shí)完成氣體交換。
在當(dāng)代d的生物科學(xué)研究領(lǐng)域,斑馬魚 Cdx 技術(shù)愈發(fā)凸顯其關(guān)鍵價(jià)值,融合了分子生物學(xué)、遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科精髓,助力科學(xué)家們攻克諸多復(fù)雜難題,從胚胎發(fā)育底層邏輯探索,到人類疾病準(zhǔn)確診療,再到環(huán)境毒理學(xué)監(jiān)測(cè),開辟出一條條全新的科研路徑。基因編輯堪稱現(xiàn)代的生物學(xué)研究的關(guān)鍵利器,斑馬魚 Cdx 基因編輯技術(shù)更是其中。Cdx 基因家族在斑馬魚胚胎發(fā)育進(jìn)程里把控關(guān)鍵環(huán)節(jié),借助 CRISPR-Cas9、TALEN 等前沿基因編輯手段,科研人員得以像精密工匠般雕琢斑馬魚的 Cdx 基因。
斑馬魚功效評(píng)價(jià)體系●基于表型對(duì)斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察,進(jìn)而評(píng)估功效,如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過染色、試劑盒等方法對(duì)功效進(jìn)行測(cè)試,如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測(cè)等●基于分子生物學(xué)通過PCR的方法對(duì)特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量,也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實(shí)驗(yàn)●基于行為學(xué)通過對(duì)斑馬魚的運(yùn)動(dòng)情況對(duì)一些功效進(jìn)行評(píng)價(jià),如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚安全評(píng)價(jià)體系●胚胎毒性檢測(cè)將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會(huì)誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡斑馬魚繁殖力強(qiáng),每周可產(chǎn)卵數(shù)百枚,為科研提供大量實(shí)驗(yàn)樣本。
運(yùn)用 CRISPR-Cas9 系統(tǒng)時(shí),設(shè)計(jì)特異性引導(dǎo) RNA(gRNA)精細(xì)靶向 Cdx 基因特定序列,Cas9 蛋白隨即切割 DNA 雙鏈,制造雙鏈斷裂。細(xì)胞自主修復(fù)過程中,通過插入、缺失或替換堿基,實(shí)現(xiàn) Cdx 基因定點(diǎn)突變。這一操作能模擬人類先天性疾病相關(guān)基因突變場(chǎng)景,如敲除斑馬魚 Cdx 基因關(guān)鍵位點(diǎn),幼魚精細(xì)呈現(xiàn)脊柱發(fā)育不全、腸道畸形等表型,與人類患者病癥高度相似,為探究疾病發(fā)病分子機(jī)制提供活的模型。TALEN 技術(shù)則利用人工設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)錄jihuo樣效應(yīng)因子核酸酶,同樣精細(xì)定位 Cdx 基因,誘導(dǎo)突變。相較于 CRISPR-Cas9,它在某些復(fù)雜基因位點(diǎn)編輯上更具優(yōu)勢(shì),脫靶率更低,保障實(shí)驗(yàn)精細(xì)性。這些基因編輯技術(shù)不僅用于構(gòu)建疾病模型,還助力解析 Cdx 基因功能網(wǎng)絡(luò),通過逐一敲除上下游調(diào)控基因,勾勒完整調(diào)控圖譜,明晰胚胎發(fā)育指揮鏈。斑馬魚的神經(jīng)系統(tǒng)相對(duì)簡(jiǎn)單,便于研究神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制。斑馬魚熒光試劑生產(chǎn)公司
其肝臟在物質(zhì)代謝等方面承擔(dān)重要任務(wù)。肝臟熒光轉(zhuǎn)基因斑馬魚模型
斑馬魚實(shí)驗(yàn)?zāi)P驮谒幬镅邪l(fā)過程中具有明顯的優(yōu)勢(shì),為藥物篩選和評(píng)價(jià)提供了高效、快速和經(jīng)濟(jì)的平臺(tái)。其繁殖速度快、子代數(shù)量多的特點(diǎn)使得能夠在短時(shí)間內(nèi)對(duì)大量化合物進(jìn)行高通量篩選。在藥物篩選實(shí)驗(yàn)中,將斑馬魚胚胎或幼魚暴露于不同的藥物或化合物中,通過觀察斑馬魚的生長發(fā)育、生理功能、行為變化以及疾病模型中的表型改善情況等指標(biāo),來評(píng)估藥物的有效性和安全性。例如,在抗癲癇藥物研發(fā)中,可以利用斑馬魚癲癇模型,觀察候選藥物對(duì)斑馬魚癲癇發(fā)作的抑制作用。如果一種藥物能夠明顯減少斑馬魚的癲癇發(fā)作頻率和強(qiáng)度,并且對(duì)斑馬魚的正常生長發(fā)育沒有明顯的不良影響,那么該藥物就具有進(jìn)一步開發(fā)的潛力。肝臟熒光轉(zhuǎn)基因斑馬魚模型