斑馬魚胚胎發(fā)育過程高度有序且具有典型性,是研究胚胎發(fā)育機(jī)制的理想模型。在胚胎發(fā)育實驗中,研究人員可以通過基因編輯技術(shù),如CRISPR/Cas9系統(tǒng),對斑馬魚的特定基因進(jìn)行敲除或修飾,觀察胚胎發(fā)育過程中的表型變化,從而確定這些基因在發(fā)育過程中的功能。例如,研究發(fā)現(xiàn)某些基因在斑馬魚胚胎的神經(jīng)管形成過程中起著關(guān)鍵的調(diào)控作用,當(dāng)這些基因發(fā)生突變時,胚胎會出現(xiàn)神經(jīng)管閉合不全等畸形現(xiàn)象。利用斑馬魚胚胎透明的特性,還可以進(jìn)行細(xì)胞追蹤實驗。通過將熒光標(biāo)記物導(dǎo)入特定的細(xì)胞群體,能夠?qū)崟r觀察這些細(xì)胞在胚胎發(fā)育過程中的遷移路徑和分化命運。比如,在神經(jīng)嵴細(xì)胞的研究中,借助熒光標(biāo)記可以清晰地看到神經(jīng)嵴細(xì)胞從神經(jīng)管遷移到身體各處,并分化為多種不同類型的細(xì)胞,如色素細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞等,這有助于深入理解細(xì)胞分化和組織形成的分子機(jī)制。斑馬魚的眼睛位置獨特,視野范圍較廣,利于捕食和防御。斑馬魚轉(zhuǎn)基因科研外包
斑馬魚功效評價體系●基于表型對斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察,進(jìn)而評估功效,如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過染色、試劑盒等方法對功效進(jìn)行測試,如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學(xué)通過PCR的方法對特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量,也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實驗●基于行為學(xué)通過對斑馬魚的運動情況對一些功效進(jìn)行評價,如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚安全評價體系●胚胎毒性檢測將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡斑馬魚課題立項斑馬魚的骨骼系統(tǒng)雖簡單,但支撐身體和保護(hù)內(nèi)臟。
看似專注于軀體架構(gòu)規(guī)劃的斑馬魚cdx基因,實則與神經(jīng)發(fā)育也有著千絲萬縷聯(lián)系。在胚胎腦部及脊髓雛形初現(xiàn)階段,cdx基因悄然施展影響力。它間接調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞的增殖與分化節(jié)拍,確保生成足量神經(jīng)元,滿足斑馬魚早期感知外界、驅(qū)動身體所需。舉例而言,科研人員利用基因編輯技術(shù)適度降低cdx表達(dá)量后,斑馬魚幼魚出現(xiàn)游泳姿態(tài)異常,頻繁打轉(zhuǎn)、失衡側(cè)翻。深入探究得知,脊髓中運動神經(jīng)元發(fā)育受損,軸突延伸受阻,無法精細(xì)連接肌肉纖維,致使肌肉接收指令紊亂。cdx基因還參與構(gòu)建神經(jīng)回路,協(xié)同其他神經(jīng)發(fā)育關(guān)鍵基因,塑造從感覺輸入到運動輸出的信息傳遞路徑,助力斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)精細(xì)“布線”,在水中靈動游弋、機(jī)敏避險。
斑馬魚功效評價體系:●基于表型:對斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察,進(jìn)而評估功效,如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等?!窕谏笜?biāo):通過染色、試劑盒等方法對功效進(jìn)行測試,如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學(xué):通過PCR的方法對特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量,也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實驗●基于行為學(xué):通過對斑馬魚的運動情況對一些功效進(jìn)行評價,如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等。斑馬魚對水質(zhì)要求不高,適應(yīng)力佳,能在多種淡水環(huán)境中生存。
斑馬魚通體透明,胚胎發(fā)育全程肉眼可視,但要精細(xì)追蹤C(jī)dx基因表達(dá)細(xì)胞軌跡、實時洞悉其功能動態(tài),熒光標(biāo)記技術(shù)不可或缺。通過基因融合手段,將熒光蛋白基因(如綠色熒光蛋白GFP、紅色熒光蛋白RFP)與Cdx基因相連,構(gòu)建重組基因?qū)氚唏R魚胚胎。發(fā)育進(jìn)程中,表達(dá)Cdx基因的細(xì)胞同步表達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下熠熠生輝??蒲腥藛T借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細(xì)胞里率先jihuo,例如在中胚層、內(nèi)胚層分化起始階段,熒光標(biāo)記的Cdx陽性細(xì)胞呈現(xiàn)有序遷移、聚集規(guī)律,宛如夜空中閃爍移動的星群,精細(xì)勾勒細(xì)胞分化路線。斑馬魚的脂肪組織可儲存能量,在食物短缺時供能。斑馬魚模型軟骨損傷
斑馬魚的壽命較短,一般為 2 - 3 年,利于世代研究。斑馬魚轉(zhuǎn)基因科研外包
環(huán)特一站式斑馬魚實驗室建設(shè)與運營解決方案,是環(huán)特實驗室面向醫(yī)院、疾控中心、海關(guān)、科研院所和藥物、保健食品和化妝品企業(yè)等行業(yè),推出的一項基于斑馬魚實驗平臺構(gòu)建與技術(shù)應(yīng)用為目標(biāo)的整體性技術(shù)平臺建設(shè)服務(wù)。我們以自身近20年斑馬魚技術(shù)應(yīng)用的深厚積累為依托,通過深刻總結(jié)斑馬魚從養(yǎng)殖、模型開發(fā)、設(shè)備配置、資質(zhì)認(rèn)可/認(rèn)證、標(biāo)準(zhǔn)化運營管理,再到成果輸出等能力模塊的發(fā)展需求,從而形成一套專業(yè)高效、可信賴的技術(shù)解決方案:涵蓋實驗室規(guī)劃設(shè)計、軟硬件能力配置、斑馬魚合規(guī)魚種供應(yīng)、試劑耗材、人員培訓(xùn)與運維技術(shù)咨詢等全周期綜合服務(wù)。斑馬魚轉(zhuǎn)基因科研外包