斑馬魚基因敲入研究

斑馬魚功效評價體系●基于表型對斑馬魚的一些臟器或細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察，進(jìn)而評估功效，如血管、腸道、卵黃囊、神經(jīng)、中性粒細(xì)胞與紅細(xì)胞等●基于生化指標(biāo)通過染色、試劑盒等方法對功效進(jìn)行測試，如ROS染色、脂肪染色或酶含量檢測等●基于分子生物學(xué)通過PCR的方法對特定基因的表達(dá)水平進(jìn)行定量，也可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)的實驗●基于行為學(xué)通過對斑馬魚的運動情況對一些功效進(jìn)行評價，如睡眠、緩解體力疲勞、改善記憶等斑馬魚安全評價體系●胚胎毒性檢測將新受精的斑馬魚胚胎在受試物前處理液中暴露24h質(zhì)量產(chǎn)品處理的斑馬魚胚胎生長發(fā)育正常劣質(zhì)產(chǎn)品會誘發(fā)斑馬魚胚胎毒性甚至死亡科學(xué)家常通過改變斑馬魚的基因來探究特定基因功能。斑馬魚基因敲入研究

斑馬魚安全評價體系●急性毒性和靶organ毒性檢測更適用于產(chǎn)品安全風(fēng)險的深入評價和風(fēng)險物質(zhì)的評估可以識別毒性風(fēng)險作用在哪種organ上刺激性和致敏性風(fēng)險篩查●慢性毒性檢測將綠色熒光蛋白（諾貝爾獎技術(shù)）與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合，獲得了能夠檢測類雌jisu污染物的轉(zhuǎn)基因斑馬魚轉(zhuǎn)基因斑馬魚可以識別類雌jisu物質(zhì)并發(fā)出熒光●快速檢測開發(fā)“小硬件+大后臺”現(xiàn)場快檢體系基于斑馬魚的行為學(xué)對急性食物中毒風(fēng)險進(jìn)行控制檢測時間應(yīng)控制在1小時，適用于餐飲單位長春斑馬魚實驗室斑馬魚的聽覺organ能接收水中的聲波信號并作出反應(yīng)。

儀器設(shè)備，是實驗室功能的關(guān)鍵單元。在斑馬魚實驗室設(shè)備領(lǐng)域，環(huán)特自主開發(fā)了10余類具備帶動競爭力的智能化設(shè)備。比如斑馬魚養(yǎng)殖系統(tǒng)、斑馬魚獨特成像系統(tǒng)、斑馬魚3D行為分析系統(tǒng)、斑馬魚2D行為分析系統(tǒng)、斑馬魚強迫游泳試驗儀、斑馬魚胚胎分裝系統(tǒng)、斑馬魚培養(yǎng)箱、斑馬魚臭氧干燥箱和斑馬魚高通量工作站等獨特儀器設(shè)備，大幅提升實驗室運營效率，加速技術(shù)成果產(chǎn)出。環(huán)特實驗室已通過CNAS、CMA和AAALAC認(rèn)證，擁有實驗動物生產(chǎn)與使用許可證，自有8500m2實驗室。環(huán)特實驗室在技術(shù)研發(fā)與應(yīng)用領(lǐng)域，已牽頭起草發(fā)布團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)17項，申請發(fā)明專利66項，自主開發(fā)斑馬魚模型170多種，發(fā)表SCI及核心期刊論文220多篇，已有7個新藥項目成功將環(huán)特斑馬魚實驗數(shù)據(jù)用于NMPA（國家藥監(jiān)局）的臨床試驗申報，累計完成項目8000多個，長期合作客戶800多家。

PDX 斑馬魚模型成為了連接基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用的重要橋梁，即轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在基礎(chǔ)研究方面，它為科學(xué)家們提供了一個在活的生物體內(nèi)研究tumor發(fā)生的發(fā)展機制的理想平臺。研究人員可以深入分析tumor細(xì)胞的基因突變、信號通路異常等分子層面的變化，以及這些變化如何影響tumor的表型。在臨床應(yīng)用上，基于 PDX 斑馬魚模型的研究成果能夠直接指導(dǎo)臨床醫(yī)療決策。例如，通過模型篩選出對特定患者tumor有效的聯(lián)合治療方案，醫(yī)生可以據(jù)此為患者制定個性化的醫(yī)療計劃。這種從實驗室到病床的轉(zhuǎn)化，極大地推動了醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，使患者能夠受益于前沿的科研成果，提高了ancer等疾病的醫(yī)療質(zhì)量和預(yù)后效果。斑馬魚視覺系統(tǒng)發(fā)達(dá)，能敏銳感知光線變化與周圍物體移動。

運用 CRISPR-Cas9 系統(tǒng)時，設(shè)計特異性引導(dǎo) RNA（gRNA）精細(xì)靶向 Cdx 基因特定序列，Cas9 蛋白隨即切割 DNA 雙鏈，制造雙鏈斷裂。細(xì)胞自主修復(fù)過程中，通過插入、缺失或替換堿基，實現(xiàn) Cdx 基因定點突變。這一操作能模擬人類先天性疾病相關(guān)基因突變場景，如敲除斑馬魚 Cdx 基因關(guān)鍵位點，幼魚精細(xì)呈現(xiàn)脊柱發(fā)育不全、腸道畸形等表型，與人類患者病癥高度相似，為探究疾病發(fā)病分子機制提供活的模型。TALEN 技術(shù)則利用人工設(shè)計的轉(zhuǎn)錄jihuo樣效應(yīng)因子核酸酶，同樣精細(xì)定位 Cdx 基因，誘導(dǎo)突變。相較于 CRISPR-Cas9，它在某些復(fù)雜基因位點編輯上更具優(yōu)勢，脫靶率更低，保障實驗精細(xì)性。這些基因編輯技術(shù)不僅用于構(gòu)建疾病模型，還助力解析 Cdx 基因功能網(wǎng)絡(luò)，通過逐一敲除上下游調(diào)控基因，勾勒完整調(diào)控圖譜，明晰胚胎發(fā)育指揮鏈。許多藥物研發(fā)初期，會以斑馬魚為模型，測試藥物毒性與功效。斑馬魚基因編輯科研課題實驗

斑馬魚的心臟結(jié)構(gòu)簡單，卻有規(guī)律跳動，是心血管研究的好對象。斑馬魚基因敲入研究

斑馬魚 cdx 實驗為解析基因功能提供了一條行之有效的途徑。在實驗設(shè)計方面，研究人員可以利用轉(zhuǎn)基因斑馬魚技術(shù)，將帶有特定標(biāo)記的 cdx 基因構(gòu)建體導(dǎo)入斑馬魚胚胎中，從而在活的狀態(tài)下追蹤 cdx 基因的表達(dá)模式和動態(tài)變化。同時，結(jié)合基因編輯工具，如 CRISPR/Cas9 系統(tǒng)，創(chuàng)建 cdx 基因突變體斑馬魚品系，觀察其在多個發(fā)育階段與野生型斑馬魚的差異。從細(xì)胞層面來看，通過免疫熒光染色等技術(shù)，可以檢測與 cdx 基因相關(guān)的細(xì)胞信號通路中關(guān)鍵蛋白的分布和活性變化，進(jìn)而多面地解析 cdx 基因在細(xì)胞增殖、分化以及組織organ形成過程中的功能，為理解相關(guān)基因在脊椎動物發(fā)育中的保守性和特異性奠定基礎(chǔ)。斑馬魚基因敲入研究