斑馬魚cas9基因敲除

水生環(huán)境日益惡化，斑馬魚Cdx環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)化身靈敏哨兵，守護(hù)水域生態(tài)平衡。斑馬魚生存與水環(huán)境緊密相連，Cdx基因作為應(yīng)激響應(yīng)關(guān)鍵樞紐，對(duì)溫度波動(dòng)、化學(xué)污染、病原體入侵等脅迫反應(yīng)迅速。水溫驟變時(shí)，Cdx環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)顯示Cdx基因上調(diào)熱休克蛋白基因表達(dá)，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定；若水體遭受重金屬、有機(jī)污染物污染，Cdx基因jihuo肝臟、腎臟jiedu酶基因，科研人員通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR、基因芯片等技術(shù)監(jiān)測(cè)Cdx及相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平變化，量化污染程度。它在水中的呼吸依靠鰓部，水流經(jīng)鰓時(shí)完成氣體交換。斑馬魚cas9基因敲除

環(huán)特生物提供基于斑馬魚模型的基因編輯服務(wù)，利用CRISPR/Cas9技術(shù)快速在斑馬魚模型中驗(yàn)證人類遺傳病、篩選致病基因、研究基因功能及作用通路等，主要研究領(lǐng)域?yàn)閶胗變喊l(fā)育畸形、罕見(jiàn)病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心腦的血管疾病、血液病、生殖缺陷等。相較于哺乳動(dòng)物基因編輯的試驗(yàn)周期長(zhǎng)（一般1年以上）、表型不直觀（一般需染色）、研究成功率低等缺點(diǎn)，斑馬魚基因編輯模型主要優(yōu)勢(shì)有：1.實(shí)驗(yàn)周期快，快可在2周內(nèi)進(jìn)行疾病相關(guān)的表型觀察（F0代高效瞬時(shí)敲降），3個(gè)月內(nèi)完成穩(wěn)定品系構(gòu)建（雜合子F1代3個(gè)月，純合子F2代6個(gè)月，子代數(shù)量多）；2. 直觀、多維度地活的動(dòng)態(tài)觀察（可對(duì)特定organ組織細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記，利用透明斑馬魚活的觀察和成像，哺乳動(dòng)物上很難實(shí)現(xiàn))；3. 研究成功率高（與哺乳動(dòng)物相比較，斑馬魚基因編輯效率高，樣本數(shù)量多，可同時(shí)測(cè)試多個(gè)相關(guān)基因，比較大化保證研究的成功率）。斑馬魚基因編輯科研課題外包許多藥物研發(fā)初期，會(huì)以斑馬魚為模型，測(cè)試藥物毒性與功效。

斑馬魚與人類在基因水平上具有較高的相似度，許多人類疾病相關(guān)的基因在斑馬魚中也有保守存在。因此，斑馬魚實(shí)驗(yàn)在人類疾病研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。在心血管疾病研究方面，斑馬魚的心臟結(jié)構(gòu)和功能與人類心臟有一定的相似性。通過(guò)誘導(dǎo)斑馬魚產(chǎn)生心血管系統(tǒng)的基因突變或使用藥物處理，可以模擬人類心血管疾病的發(fā)生過(guò)程，如先天性心臟病、心肌病等。研究人員可以觀察斑馬魚心臟的形態(tài)變化、心率異常以及血管的發(fā)育缺陷等表型，進(jìn)而探究疾病的發(fā)病機(jī)制，并篩選潛在的醫(yī)療藥物。例如，一些研究發(fā)現(xiàn)特定的化合物能夠改善斑馬魚因基因突變導(dǎo)致的心臟功能障礙，這為開(kāi)發(fā)醫(yī)療人類心血管疾病的新藥提供了線索。

在藥物研發(fā)進(jìn)程中，PDX 斑馬魚模型發(fā)揮著極為關(guān)鍵的作用。傳統(tǒng)的藥物研發(fā)模式往往面臨諸多挑戰(zhàn)，如藥物在動(dòng)物模型和人體臨床試驗(yàn)中的效果差異較大等問(wèn)題。而 PDX 斑馬魚模型能夠較好地模擬人體tumor的異質(zhì)性和復(fù)雜性。將患者tumor組織移植到斑馬魚后，可以針對(duì)特定tumor類型快速測(cè)試多種藥物的療效。由于斑馬魚體型小、用藥量少，很大降低了藥物篩選成本。例如，在抗ai藥物研發(fā)中，通過(guò)觀察藥物對(duì) PDX 斑馬魚模型中tumor生長(zhǎng)的抑制情況，能夠在早期階段淘汰無(wú)效藥物，加速有潛力藥物的研發(fā)進(jìn)程，為患者爭(zhēng)取更多的醫(yī)療時(shí)間，同時(shí)也提高了藥物研發(fā)的成功率，促進(jìn)整個(gè)制藥行業(yè)的創(chuàng)新與發(fā)展。研究斑馬魚的腦結(jié)構(gòu)有助于理解認(rèn)知和學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)。

看似專注于軀體架構(gòu)規(guī)劃的斑馬魚cdx基因，實(shí)則與神經(jīng)發(fā)育也有著千絲萬(wàn)縷聯(lián)系。在胚胎腦部及脊髓雛形初現(xiàn)階段，cdx基因悄然施展影響力。它間接調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞的增殖與分化節(jié)拍，確保生成足量神經(jīng)元，滿足斑馬魚早期感知外界、驅(qū)動(dòng)身體所需。舉例而言，科研人員利用基因編輯技術(shù)適度降低cdx表達(dá)量后，斑馬魚幼魚出現(xiàn)游泳姿態(tài)異常，頻繁打轉(zhuǎn)、失衡側(cè)翻。深入探究得知，脊髓中運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元發(fā)育受損，軸突延伸受阻，無(wú)法精細(xì)連接肌肉纖維，致使肌肉接收指令紊亂。cdx基因還參與構(gòu)建神經(jīng)回路，協(xié)同其他神經(jīng)發(fā)育關(guān)鍵基因，塑造從感覺(jué)輸入到運(yùn)動(dòng)輸出的信息傳遞路徑，助力斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)精細(xì)“布線”，在水中靈動(dòng)游弋、機(jī)敏避險(xiǎn)。某些基因突變會(huì)導(dǎo)致斑馬魚身體形態(tài)或生理功能異常。斑馬魚基因編輯科研課題外包

它的腎臟在維持體內(nèi)水鹽平衡和排泄廢物中起重要作用。斑馬魚cas9基因敲除

斑馬魚通體透明，胚胎發(fā)育全程肉眼可視，但要精細(xì)追蹤C(jī)dx基因表達(dá)細(xì)胞軌跡、實(shí)時(shí)洞悉其功能動(dòng)態(tài)，熒光標(biāo)記技術(shù)不可或缺。通過(guò)基因融合手段，將熒光蛋白基因（如綠色熒光蛋白GFP、紅色熒光蛋白R(shí)FP）與Cdx基因相連，構(gòu)建重組基因?qū)氚唏R魚胚胎。發(fā)育進(jìn)程中，表達(dá)Cdx基因的細(xì)胞同步表達(dá)熒光蛋白，在熒光顯微鏡下熠熠生輝。科研人員借此可觀察到Cdx基因在胚胎早期哪些細(xì)胞里率先jihuo，例如在中胚層、內(nèi)胚層分化起始階段，熒光標(biāo)記的Cdx陽(yáng)性細(xì)胞呈現(xiàn)有序遷移、聚集規(guī)律，宛如夜空中閃爍移動(dòng)的星群，精細(xì)勾勒細(xì)胞分化路線。斑馬魚cas9基因敲除