多通道膜片鉗離子電流

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-06-02

膜片鉗放大器是整個(gè)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中的主要,它可用來作單通道或全細(xì)胞記錄,其工作模式可以是電壓鉗,也可以是電流鉗。從原理來說,膜片鉗放大器的探頭電路即I-V變換器有兩種基本結(jié)構(gòu)形式,即電阻反饋式和電容反饋式,前者是一種典型的結(jié)構(gòu),后者因用反饋電容取代了反饋電阻,降低了噪聲,所以特別適合較低噪聲的單通道記錄。由于供膜片鉗實(shí)驗(yàn)的專門的計(jì)算機(jī)硬件及相應(yīng)的軟件程序的相繼出現(xiàn),使得膜片鉗實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便、效率提高、效率提高膜片鉗記錄不但能夠在神經(jīng)元胞體及其樹突上進(jìn)行,而且可同時(shí)在這兩個(gè)不同的部位作膜片鉗記錄。多通道膜片鉗離子電流

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細(xì)胞是動(dòng)物和人體的基本單元,細(xì)胞與細(xì)胞內(nèi)的通信是依靠其膜上的離子通道進(jìn)行的,離子和離子通道是細(xì)胞興奮的基礎(chǔ),亦即產(chǎn)生生物電信號(hào)的基礎(chǔ),生物電信號(hào)通常用電學(xué)或電子學(xué)方法進(jìn)行測(cè)量。由此形成了一門細(xì)胞學(xué)科--電生理學(xué)。膜片鉗技術(shù)已成為研究離子通道的黃金標(biāo)準(zhǔn)。電壓門控性離子通道:膜上通道蛋白的帶點(diǎn)集團(tuán)在膜電位改變時(shí),在電場(chǎng)的作用下,重新分布導(dǎo)致通道的關(guān)閉,同時(shí)有電荷移動(dòng),稱為門控電流。配體門控離子通道:神經(jīng)遞質(zhì)(如乙酰膽堿)、ji素等與通道蛋白上的特定位點(diǎn)結(jié)合,引起蛋白構(gòu)像的改變,導(dǎo)致通道的打開。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點(diǎn)的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,專業(yè)團(tuán)隊(duì),7*40小時(shí)隨時(shí)人工在線咨詢.芬蘭雙電極膜片鉗實(shí)驗(yàn)操作膜片鉗的設(shè)計(jì)使得夾持力均勻,不會(huì)損壞薄片材料。

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把膜電位鉗位電壓調(diào)到-80--100mV,再用鉗位放大器的控制鍵把全細(xì)胞瞬態(tài)充電電流調(diào)定至零位(EPC-10的控制鍵稱為C-slow和C-series;Axopatch200標(biāo)為全細(xì)胞電容和系列電阻)。寫下細(xì)胞的電容值Cc和未補(bǔ)整的系列電阻值Rs,用于消除全細(xì)胞瞬態(tài)電流,計(jì)算鉗位的固定時(shí)間(即RsCc),然啟根據(jù)歐姆定律從測(cè)定脈沖電流的振幅算出細(xì)胞的電阻RC。緩慢調(diào)節(jié)Rs旋鈕注意測(cè)定脈沖反應(yīng)的變化,逐漸增加補(bǔ)整的比例。如果RS補(bǔ)整非常接近振蕩的閾值,RS或Cc的微細(xì)變化都會(huì)達(dá)到震蕩的閾值,產(chǎn)生電壓的振蕩而使細(xì)胞受損。因此應(yīng)當(dāng)在RS補(bǔ)整水平寫不穩(wěn)定閾值之間留有10%-20%的余地為安全。準(zhǔn)備資料收集和脈沖序列的測(cè)定。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點(diǎn)的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,專業(yè)團(tuán)隊(duì),7*37小時(shí)隨時(shí)人工在線咨詢.

高阻封接問題的解決不僅改善了電流記錄性能,還隨之出現(xiàn)了研究通道電流的多種膜片鉗方式。根據(jù)不同的研究目的,可制成不同的膜片構(gòu)型。(1)細(xì)胞吸附膜片(cell-attachedpatch)將兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細(xì)胞膜表面上,形成高阻封接,在細(xì)胞膜表面隔離出一小片膜,既而通過微管電極對(duì)膜片進(jìn)行電壓鉗制,分辨測(cè)量膜電流,稱為細(xì)胞貼附膜片。由于不破壞細(xì)胞的完整性,這種方式又稱為細(xì)胞膜上的膜片記錄。此時(shí)跨膜電位由玻管固定電位和細(xì)胞電位決定。因此,為測(cè)定膜片兩側(cè)的電位,需測(cè)定細(xì)胞膜電位并從該電位減去玻管電位。從膜片的通道活動(dòng)看,這種形式的膜片是極穩(wěn)定的,因細(xì)胞骨架及有關(guān)代謝過程是完整的,所受的干擾小。膜片鉗記錄技術(shù)與較早的單電極電壓鉗位相比進(jìn)步了很多,尤其在單離子通道鉗位記錄方面。

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膜片鉗技術(shù)是一種用于研究生物細(xì)胞膜離子通道的實(shí)驗(yàn)方法。它通過在細(xì)胞膜上形成小孔,從而對(duì)細(xì)胞膜的離子通道進(jìn)行精確的電生理記錄和描述。在膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,研究人員通常會(huì)先將細(xì)胞膜上的脂質(zhì)雙層通過特殊設(shè)備進(jìn)行穿刺,形成一個(gè)小孔。然后,他們將一個(gè)玻璃微電極插入這個(gè)小孔中,以接觸并測(cè)量細(xì)胞膜內(nèi)部的電位變化。這個(gè)玻璃微電極的非常細(xì),不會(huì)對(duì)細(xì)胞膜產(chǎn)生太大的干擾。通過膜片鉗技術(shù),科學(xué)家可以精確地測(cè)量離子通道的活動(dòng),從而了解離子通道在細(xì)胞生理學(xué)中的作用。例如,他們可以測(cè)量離子通道在不同刺激下如何開啟或關(guān)閉,以及這些變化如何影響細(xì)胞的電活動(dòng)和化學(xué)信號(hào)傳遞。此外,膜片鉗技術(shù)還可以用于研究和鑒定新的藥物靶點(diǎn)。通過觀察藥物對(duì)離子通道活動(dòng)的影響,科學(xué)家可以評(píng)估新藥對(duì)特定疾病的zhi潛力。總的來說,膜片鉗技術(shù)是一種非常有用的實(shí)驗(yàn)方法,它為我們提供了深入研究細(xì)胞膜離子通道以及藥物作用機(jī)制的工具。了解離子通道的功能以及結(jié)構(gòu)的關(guān)系對(duì)于從分子水平深入探討某些疾病措施等均具有十分重要的理論和實(shí)際意義。美國可升級(jí)膜片鉗電生理技術(shù)

準(zhǔn)確捕捉離子通道動(dòng)態(tài),膜片鉗技術(shù)助您一臂之力!多通道膜片鉗離子電流

膜片鉗技術(shù)是由諾貝爾獎(jiǎng)獲得者Neher和Sakmann于1976年發(fā)展起來的一種記錄細(xì)胞膜離子通道電生理活動(dòng)的技術(shù)。該技術(shù)的應(yīng)用連接了細(xì)胞水平和分子水平的生理學(xué)研究,已成為現(xiàn)代細(xì)胞電生理學(xué)研究的常規(guī)方法。它廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、植物和微生物學(xué),并取得了豐碩的研究成果。膜片鉗技術(shù)點(diǎn)燃了細(xì)胞和分子水平生理學(xué)研究的**之火,并與基因克隆技術(shù)并駕齊驅(qū),給生命科學(xué)研究帶來了巨大的推動(dòng)力。鈣成像技術(shù)***用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)神經(jīng)元、心肌和各種細(xì)胞內(nèi)鈣離子的變化,從而檢測(cè)神經(jīng)元和心肌的活動(dòng)。這些技術(shù)是人們觀察神經(jīng)和各種細(xì)胞活動(dòng)的直接手段,現(xiàn)已發(fā)展成為生命科學(xué)研究的熱點(diǎn),也是國家自然科學(xué)基金鼓勵(lì)申報(bào)的重要領(lǐng)域。多通道膜片鉗離子電流