芬蘭全自動膜片鉗離子電流

來源: 發(fā)布時間:2024-06-03

全細胞膜片鉗記錄(Whole-cellpatch-clamprecording)是一種早期且使用頻繁的鉗夾技術,相當于連續(xù)單電極電壓鉗夾記錄,也就是說,全細胞記錄類似于傳統(tǒng)的細胞內(nèi)記錄,但具有更大的優(yōu)勢,如分辨率高、噪聲低、穩(wěn)定性好、細胞內(nèi)成分可控等。全細胞記錄技術測量一個細胞內(nèi)所有通道的電流,記錄過程中電極的溶液代替原生質(zhì)的成分。雖然膜片鉗記錄技術相對于原來的單電極電壓鉗有了很大的進步,尤其是在單離子通道鉗記錄中,細胞或腦片的組織選擇和實驗溶液的制備仍然是非常重要的步驟。由于電極前列與細胞膜的高阻封接,在電極前列籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學上隔離。芬蘭全自動膜片鉗離子電流

芬蘭全自動膜片鉗離子電流,膜片鉗

細胞是動物和人體的基本單元,細胞與細胞內(nèi)的通信是依靠其膜上的離子通道進行的,離子和離子通道是細胞興奮的基礎,亦即產(chǎn)生生物電信號的基礎,生物電信號通常用電學或電子學方法進行測量。由此形成了一門細胞學科--電生理學。膜片鉗技術已成為研究離子通道的黃金標準。電壓門控性離子通道:膜上通道蛋白的帶點集團在膜電位改變時,在電場的作用下,重新分布導致通道的關閉,同時有電荷移動,稱為門控電流。配體門控離子通道:神經(jīng)遞質(zhì)(如乙酰膽堿)、ji素等與通道蛋白上的特定位點結(jié)合,引起蛋白構(gòu)像的改變,導致通道的打開。進口單通道膜片鉗實驗操作滔博生物膜片鉗實驗外包,數(shù)據(jù)準確,保結(jié)果。

芬蘭全自動膜片鉗離子電流,膜片鉗

膜片鉗技術是一種細胞內(nèi)記錄技術,是研究離子通道活動的蕞佳工具,也是應用的電生理技術之一。該技術通過施加負壓將微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)的前端與細胞膜緊密接觸,形成GΩ以上的阻抗,使電極開口處的細胞膜與其周圍膜在電學上絕緣。被孤立的小膜片面積為μm量級,內(nèi)中有少數(shù)離子通道。玻璃微電極中含有一根浸入電解溶液中的導線,用于傳導離子。在此基礎上對該膜片施行電壓鉗位(即保持跨膜電壓恒定),如果單個離子通道被包含在膜片內(nèi),則可對此膜片上的離子通道的電流進行監(jiān)測記錄。通過觀測單個通道開放和關閉的電流變化,可直接得到各種離子通道開放的電流幅值分布、開放幾率、開放壽命分布等功能參量,并分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關系。還可把吸管吸附的膜片從細胞膜上分離出來,以膜的外側(cè)向外或膜的內(nèi)側(cè)向外等方式進行實驗研究。這種技術對小細胞的電壓鉗位、改變膜內(nèi)外溶液成分以及施加藥物都很方便。

這一設計模式似乎幾十年都沒有改變過,作為一個有著近20年膜片鉗經(jīng)驗的科研工作者,記得自己進入實驗室次看到的放大器就差不多是這樣,也不覺得還會有什么變化。直到筆者在19年訪問歐洲的一個同樣做電生理的實驗室的時候,發(fā)現(xiàn)了這樣一款獨特的放大器,讓筆者眼前一亮,這款放大器從前置放大器出來的線竟然就直接連接在了電腦上,當筆者問他們放大器和數(shù)模呢?他們說,你看到的就是全部了,所以的部件都包含在了這個前置放大器中。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點的化合物體外篩選,服務于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實驗結(jié)果,專業(yè)團隊,7*63小時隨時人工在線咨詢.在膜電位改變時,在電場的作用下,重新分布導致通道的關閉,同時有電荷移動,稱為門控電流。

芬蘭全自動膜片鉗離子電流,膜片鉗

膜片鉗技術是當前研究細胞膜電流及離子通道的蕞重要的技術。從技術層面來解釋的話,膜片鉗技術(patchclamp)是指利用鉗制電壓或者電流的方法(通常為鉗制電壓)來記錄細胞膜離子通道電活動的微電極技術。膜片鉗技術的原理為:使用一個一頭尖一頭粗的錐狀玻璃管,管中設有微電極,管的前列直徑約1.5~3.0μm,通過負壓吸引使前列口與細胞膜形成千兆歐姆級的阻抗封接,前列口內(nèi)的細胞膜區(qū)域與周圍其他區(qū)域形成了電學分隔,然后人工鉗制此片區(qū)域細胞膜的電位,即可達到對膜片上離子通道電流的監(jiān)測與記錄。早期的研究多使用雙電極電壓鉗技術作細胞內(nèi)電活動的記錄。進口多通道膜片鉗電壓鉗制

細胞是動物和人體的基本組成單元,細胞與細胞內(nèi)的通信,是依靠其膜上的離子通道進行的。芬蘭全自動膜片鉗離子電流

1980年,Sigworth、Hamill、Neher等在記錄電極內(nèi)施加負壓吸引,得到了10~100GΩ的高阻封接(gigaseal),降低記錄噪聲,實現(xiàn)了單根電極既鉗制膜電位又記錄單通道電流。獲1991年Nobel獎。1955年,Hodgkin和Keens應用電壓鉗(Voltageclap)在研究神經(jīng)軸突膜對鉀離子通透性時發(fā)現(xiàn)放射性鉀跨軸突膜的運動很像是通過許多狹窄空洞的運動,并提出了"通道"的概念。1963年,描述電壓門控動力學的Hodgkin-Hx上模型(簡稱H-H模型)榮獲譜貝爾醫(yī)學/生理學獎。1976年,Neher和Sakmann建立膜片鉗(Patchclamp)按術。1983年10月,《Single-ChannelRecording》一書問世,奠定了膜片鉗技術的里程碑。1991年,Neher和Sakmann的膜片鋪技術榮獲諾貝爾醫(yī)學/生理學獎。芬蘭全自動膜片鉗離子電流