山西生物技術(shù)酵母文庫做什么

來源: 發(fā)布時間:2023-03-14

利用酵母文庫進(jìn)行雙雜交篩選,結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于細(xì)胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感,可以引起其發(fā)生降解,PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進(jìn)一步的酵母一對一雜交驗證實驗表明,兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(圖 A-B)。并通過 GST pull-down、BiFC 實驗也證實了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合(圖 C-D)。細(xì)胞外降解實驗顯示,與對照相比,MdRGL3a 與過表達(dá) MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解加快;而與抑制 MdBT2 表達(dá)的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解減緩(圖 A)。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(圖 B)。改變 MdRGL3a 表達(dá)量并不影響 MdBT2 的降解。以上結(jié)果表明,MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。酵母單雜交技術(shù)是在酵母雙雜基礎(chǔ)上發(fā)展而來的一種研究核酸。山西生物技術(shù)酵母文庫做什么

酵母雙雜交文庫:為研究松樹生長時相轉(zhuǎn)變和生殖發(fā)育的奧秘,本研究收集了油松 7 個年齡段的葉片進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測序。加權(quán)基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)分析(WGCNA)鑒定到一個與年齡***相關(guān)的基因模塊(圖 A)。按照表達(dá)模式,可以分為 2 個子模塊:隨年齡增長而表達(dá)上升的基因子模塊、隨年齡增長而表達(dá)降低的基因子模塊(圖 B-D)。這些基因在 5-7 年營養(yǎng)生長至生殖生長過渡期發(fā)生了一個明顯的表達(dá)模式轉(zhuǎn)變,表明在生殖發(fā)育啟動階段存在一個相對劇烈的時相轉(zhuǎn)變過程。廣東發(fā)展酵母文庫報價酵母文庫篩選方案可提供核體系和膜體系篩庫工作。

本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選,繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制,以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子(PHR)為中心。PHRs 是菌根共生所必需的,通過 P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達(dá)。高磷條件下,SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對菌根共生相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控,進(jìn)而抑制菌根共生。過表達(dá) OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn),植物直接營養(yǎng)吸收和通過菌根共生的間接營養(yǎng)吸收,都受到相同的磷信號網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。

進(jìn)行了酵母雙雜交文庫的篩選,結(jié)果顯示鈣依賴的種子特異性蛋白激酶SPK可以與OsNF-YB9相互作用,分段截取互作驗證顯示OsNF-YB9的N端是互作所必須的(圖a-b),并通過雙熒光分子互補實驗、BiFC、體外GST-pulldown實驗得以證實(圖c-e)。亞細(xì)胞定位顯示SPK主要在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá),OsNF-YB9在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中都有表達(dá),共表達(dá)SPK和OsNF-YB9***促進(jìn)了OsNF-YB9的入核(圖f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促進(jìn)了OsNF-YB9從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的運輸。RT-PCR顯示SPK在發(fā)育中的種子中高表達(dá),在5DAF開始***,并在10-30DAF維持高表達(dá)水平(圖a-b)。spk敲除突變體種子中堊白率的增加(圖c-e),但粒形和粒重與野生型沒有***差別。使用原裝酵母技術(shù)試劑盒、培養(yǎng)基,保證實驗質(zhì)量。實驗流程細(xì)致謹(jǐn)慎,實驗團(tuán)隊經(jīng)驗豐富。

歐易生物酵母文庫技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應(yīng)的阻遏物,通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號?;ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉、花和果實中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,可充當(dāng)抗氧化劑,幫助***活性氧和對**老,對人類健康具有重要價值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中,蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機(jī)制仍有待深入研究。酵母文庫是歐易生物***服務(wù)項目。廣東發(fā)展酵母文庫報價

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酵母文庫實驗由歐易生物完成。2021 年 3 月,山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金教授為通訊作者,在 Plant Physiology 雜志(IF: 6.902)在線發(fā)表了題為“Interaction of BTB-TAZ protein MdBT2 and DELLA protein MdRGL3a regulates nitrate-mediated plant growth”的研究論文,深入探討了硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果生長調(diào)控分子機(jī)制。氮素是植物生長發(fā)育所必須的營養(yǎng)物質(zhì)之一,硝酸鹽是植物根系吸收無機(jī)氮的主要形式。除了營養(yǎng)功能,硝酸鹽還可以通過多種信號途徑來調(diào)節(jié)植物生長和發(fā)育過程。赤霉素(gibberellin,GA)是一種植物***,同樣可以調(diào)控植物生長發(fā)育過程。然而,硝酸鹽和赤霉素信號通路如何共同調(diào)節(jié)植物生長的確切分子機(jī)制仍知之甚少。山西生物技術(shù)酵母文庫做什么

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