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酵母文庫實驗:MAPK級聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號傳導(dǎo)過程中的關(guān)鍵事件,MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子,**終響應(yīng)病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級聯(lián)的重要目標(biāo),在植物對各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋果如何響應(yīng)炭疽菌入侵,將信號傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi),以及哪個轉(zhuǎn)錄因子負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)促進(jìn)GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個由蘋果炭疽菌******誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個易感蘋果種質(zhì)中,MdWRKY17表達(dá)水平***高于6個耐受蘋果種質(zhì),同時對應(yīng)的水楊酸含量降低,證實了MdWRKY17介導(dǎo)的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。河南生物技術(shù)酵母文庫報價酵母文庫已知蛋白互作靈活定制建庫。
酵母雜交試驗:隨著分子生物學(xué)研究進(jìn)入以蛋白質(zhì)組學(xué)為標(biāo)志的后基因組時代,蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-DNA相互作用已成為互作組學(xué)研究的熱門主題。人類基因粗略約編碼2萬種蛋白,只算一對一的相互作用種類也有12萬到100萬種。而加上動態(tài)變化,每個物種、個體、細(xì)胞中都存在著一張張不同的互作網(wǎng)絡(luò)圖,這一張張圖譜中,蘊藏著各種生命的奧秘。有兩種通用的相互作用組圖譜繪制方式:第一種酵母雜交試驗,通過偶聯(lián)基因表達(dá)體現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生直接相互作用的蛋白對。第二種是通過抗體/標(biāo)簽分離純化復(fù)合體,然后用質(zhì)譜鑒定復(fù)合體內(nèi)部組分,識別直接相互作用或間接相互作用的蛋白質(zhì)。兩種高通量方法彼此互補,相互驗證。
酵母文庫實驗:本研究報道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá),而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá)。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補 lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常,種子變長、變窄、變薄,堊白率較高。此外,osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明,OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。歐易生物技術(shù)有限公司酵母文庫 技術(shù)服務(wù)一站式服務(wù)。
酵母雙雜交、GSTpull-down實驗顯示,SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用(圖A-C)。pull-down實驗顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用(圖D)。split-LUC、Co-IP實驗證實HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合(圖E-J)。下胚軸表型分析顯示,藍(lán)光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體,表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗顯示,藍(lán)光下,在 CRY1 存在下,SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強。表明藍(lán)光***的 CRY1 可能通過藍(lán)光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強 SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。酵母單雜交/雙雜交文庫構(gòu)建簡述酵母雙雜交。云南歐易生物酵母文庫做什么
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