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動(dòng)物血清在細(xì)胞培養(yǎng)中提供細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所需的生長(zhǎng)因子、***、蛋白、促接觸和伸展因子和其他多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),包括牛血清、馬血清、羊血清、雞血清、兔血清等,其中,牛血清適用于絕大部分細(xì)胞,而胎牛血清由于其采集時(shí)間,在品質(zhì)和性能上**為突出,應(yīng)用**為***。胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)是指在**母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清,由于血清采集時(shí)間早,其胎球蛋白較多,血清白蛋白含量高,而γ-球蛋白含量極低,并富含多種生長(zhǎng)因子,因此,是培養(yǎng)細(xì)胞**為質(zhì)量的牛血清。***血清:關(guān)愛細(xì)胞牛血清的成分復(fù)雜,主要包含蛋白質(zhì)、多肽、***、氨基酸、葡萄糖等多種營(yíng)養(yǎng)成分。雖然其中大部分成分已為人知,但還有一部分也還不清楚,而且其組分及含量常依動(dòng)物性別、年齡、生理狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)條件不同而有差異。血***含有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的成分外,同時(shí)含有內(nèi)***、血色素、補(bǔ)體、抗體等其他有害成分,影響細(xì)胞生長(zhǎng)甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡,因此,通常需要測(cè)試工作才知道對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的效果。低質(zhì)量的血清常被病毒、***和支原體等微生物***,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗,浪費(fèi)了科研人員的時(shí)間和精力。此外,由于血清是一種生物制品,來源動(dòng)物的血源地以及**狀況就會(huì)對(duì)血清的品質(zhì)有很大的影響。 要對(duì)胎牛血清進(jìn)行熱滅活應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和血清的質(zhì)量來決定。貴州胎牛血清
準(zhǔn)備一個(gè)可以控溫的儲(chǔ)藏箱,將玻璃瓶存放在儲(chǔ)存箱中,將儲(chǔ)存箱中的溫度控制在-5℃至-20℃的范圍內(nèi);s3:過濾,將生血清在受控條件下解凍,并通過無菌過濾,**后過濾步驟使用多個(gè),填料在層流罩內(nèi)進(jìn)行,層流罩經(jīng)認(rèn)證可維持100級(jí)條件,灌裝室用高效空氣過濾器過濾空氣保持正壓。血清被無菌地分配到伽瑪射線照射的無菌petg或pete瓶中,裝滿的容器立即貼上標(biāo)簽并冷凍,然后保持在-5℃以下的溫度以保持產(chǎn)品質(zhì)量;s4:離心,將過濾后血清在-5℃以下的溫度進(jìn)行離心后靜置,經(jīng)過沉淀后得到需要的血清,離心的過程注意控制溫度,防止溫度波動(dòng)過大,影響血清的離心,從血塊中小心地取出血清,以避免被紅細(xì)胞污染;s5:質(zhì)量測(cè)試,通過化學(xué)分析、微生物檢測(cè)和病毒檢測(cè)對(duì)血清進(jìn)行測(cè)試;s6儲(chǔ)存和運(yùn)輸,fbs采用伽瑪輻照、無菌petg或pete瓶供應(yīng)。將血清冷凍保存在-5℃至-20℃的溫度下,應(yīng)避免血清多次凍融循環(huán),導(dǎo)致產(chǎn)品變質(zhì),使用較小的包裝尺寸或?qū)⒀宸譃檫m合一次性使用的小份,在將血清和等分物放入無菌容器時(shí),務(wù)必使用無菌技術(shù)。本發(fā)明中,s1中,需要對(duì)血液提取裝置和玻璃瓶進(jìn)行消毒才能使用,s5中,化學(xué)分析是使用滲透壓(蒸汽壓法)和ph值是在儀器上測(cè)量的。安徽血清常見問題胎牛血清的資質(zhì)認(rèn)定是什么?
血清血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供***和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。目錄1血清類別2主要成分3鑒別方法4主要作用5常見問題比較好的方法??血清類別胎牛血清替代品胎牛血清、透析型胎牛血清、天然低IGG胎牛血清、干細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清、特殊用途胎牛血清、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清、胎牛血清替代物、小牛血清、新生牛血清、加強(qiáng)型小牛血清、補(bǔ)鐵小牛血清、成牛血清、供體馬血清、兔血清、雞血清、豬血清、馬血清、其他動(dòng)物血清、合成血清替代品。主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、***、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或**生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。主要是:***:血清的成份可能有幾百種之多。
如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用於貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x***中起重要作用,如SeO3,硒等常見問題保存血清比較好的方法?血清應(yīng)保存在-5C至-2OC。然而,若存放於4C時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出後,先置於2-8C冰箱使之溶解,然後在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。如何避免沉澱物的產(chǎn)生?1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉澱物。2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉澱的發(fā)生3、請(qǐng)勿將血清置於37。C太久。若在37。C放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害。胎牛血清未加工原料不含BSE嗎?
目前對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、***和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來許多困難;第二:血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制;第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。鑒別方法血清血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被***,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿比較大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。血漿血液成分血漿是血液的液體成分,血細(xì)胞懸濁于其中。血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?貴州胎牛血清
胎牛血清的貨源穩(wěn)定性是什么?貴州胎牛血清
胎牛血清的常見問題:保存方法血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍方法將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。3、請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。[3]5、若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物。
貴州胎牛血清