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在做第三方檢測時為什么主帶之外有時會出現(xiàn)雜帶?導(dǎo)致雜帶出現(xiàn)的可能原因包括:抗體特異性不足,目的蛋白存在不同修飾狀態(tài)或有剪切降解形式,一抗或二抗使用過量,蛋白上樣量過大,曝光時間過長,膜漂洗不充分,等原因。通過條件優(yōu)化盡量減少雜帶出現(xiàn),但當(dāng)抗體或樣品特性造成少量雜帶存在時,只要不影響主目的條帶判別并不影響數(shù)據(jù)圖片的應(yīng)用。為什么有時膠片會出現(xiàn)明顯較深的背景?在通過條件優(yōu)化排除諸如封閉不充分、樣品中存在雜質(zhì)、抗體過量、漂洗不充分等實驗原因之外,當(dāng)特異性識別的目的條帶信號太弱時,為了顯示出目的條帶而不得不延長曝光時間,隨之使得背景變臟,此時關(guān)鍵點在于整個反應(yīng)的“性噪比”太低,比較好換用特異性、親和力更佳的一抗。陜西WB蛋白第三方檢測公司
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