上海雙檢測模式超微量分光光度計紫外檢測

來源: 發(fā)布時間:2023-05-17

超微量分光光度計在核酸定量和分析中的應(yīng)用:
分光光度測定法是一項定量和分析生物成分的成熟技術(shù)。其中,核酸是生物實驗室**常檢測的生物成分之一。確定這些樣品的濃度和純度對許多下游實驗至關(guān)重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,其濃度可以應(yīng)用朗伯比爾定律通過它們的相關(guān)消光系數(shù)和樣品光程計算出來。
首先,260nm的紫外光直接照射樣品,并且穿過樣品,而另一邊的光電檢測器則測定有多少光被吸收。通過對照參比(一般是樣品稀釋液),可以定量樣品中的核酸濃度。
不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。上海雙檢測模式超微量分光光度計紫外檢測

Micro Drop比色皿檢測基本操作:
1. 準(zhǔn)備好兩個比色皿,一個加入空白檢測液,一個加入樣品,保證加入的液體量足夠,能蓋過光束,光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請按照比色皿生產(chǎn)廠家的建議加入液體。
2. 抬起樣品臂,把比色皿插入到儀器中,插入比色皿時要注意透光面,與儀器上面的光路指向的方向相對應(yīng)。
3. 在做比色皿檢測時樣品臂必須放下來。
4. 在Micro Drop軟件上的“選項”框中選擇“使用比色皿”, 插入比色皿,勾選基線校正,設(shè)置相應(yīng)參數(shù)進(jìn)行空白檢測及檢測。
5. 當(dāng)檢測完成后,移出比色皿,倒出樣品,清洗干凈比色皿。
天津超微量分光光度計紫外檢測核酸的較高吸收峰的吸收波長260nm。

在分光光度計中,將不同波長的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與不同波長相對應(yīng)的吸收強(qiáng)度。如以波長(λ)為橫坐標(biāo),吸收強(qiáng)度(A)為縱坐標(biāo),就可繪出該物質(zhì)的吸收光譜曲線。利用該曲線進(jìn)行物質(zhì)定性、定量的分析方法,稱為分光光度法,也稱為吸收光譜法。用紫外光源測定無色物質(zhì)的方法,稱為紫外分光光度法;用可見光光源測定有色物質(zhì)的方法,稱為可見光光度法。它們與比色法一樣,都以Lambert-Bee定律為基礎(chǔ)。上海寶予德科學(xué)儀器有限公司歡迎大家來電咨詢!

Micro Drop基座檢測空白循環(huán):
我們建議把空白對照當(dāng)成樣品來檢測,這樣可以確認(rèn)儀器性能完好并且基座上沒有樣品殘留,按下列操作來運(yùn)行空白循環(huán):
1. 軟件中打開將進(jìn)行的操作模式,把空白對照加到基座上,并把樣品臂放下。
2. 點(diǎn)擊空白檢測來進(jìn)行空白對照檢測并保存參比圖譜。
3. 重新加空白對照到基座上,把它當(dāng)成樣品一樣來檢測,點(diǎn)擊檢測,結(jié)果應(yīng)該是差不多為一水平線,吸光
值變化應(yīng)不超過0.04A(10mm光程)。
4. 擦去上下基座上的液體,重新進(jìn)行上面的操作,直到檢測光譜圖的變化不超過0.04A(10mm光程)。
雖然不需要在每個樣品之間進(jìn)行空白檢測,但我們建議在檢測多個樣品時,比較好每30min進(jìn)行一次空白檢測。
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。

比色皿的清洗:
1、拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃,避免接觸光學(xué)面。 
2、不得將光學(xué)面與硬物或臟物接觸。加入溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。 
3、凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液,不得長期盛放在比色皿中。
4、比色皿在使用后,應(yīng)立即用水沖洗干凈。必要時可用1∶1的鹽酸浸泡,然后用水沖洗干凈。 
5、不能將比色皿放在火焰或電爐上進(jìn)行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤; 
6、在丈量時如對比色皿有懷疑,可自行檢測。用戶可將波長選擇置實際使用的波長上,將一套比色皿都注進(jìn)蒸餾水,將其中一只的透射比調(diào)至95%(數(shù)顯儀器調(diào)置100%)處,丈量其他各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。 無論選擇玻璃還是石英比色皿,都必須配對使用,即玻璃配玻璃的,且型號寬度都應(yīng)該一致。
分光光度計是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。江西超微量分光光度計紫外檢測

用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。上海雙檢測模式超微量分光光度計紫外檢測

超微量分光光度計檢測蛋白A280:
蛋白和核酸不一樣,具有很強(qiáng)的多樣性。Protein A280功能應(yīng)用于檢測那些含有Trp、Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm吸光度明顯。Protein A280功能不需要構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,而是檢測吸光度后,直接計算蛋白濃度。
Protein A280顯示紫外吸收光譜,檢測280nm處的吸光度后計算濃度(mg/ml)。和核酸檢測一樣,Protein A280記錄顯示的是10mm光程下的數(shù)據(jù)。
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