廣東酶標(biāo)儀檢驗

來源: 發(fā)布時間:2023-05-24

熒光酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行熒光的檢測.通過激發(fā)光柵分光后的特定波長的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后,會發(fā)出波長更長的發(fā)射光,通過發(fā)射光柵后到達(dá)檢測器。熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例。熒光檢測靈敏度高,可實時檢測,使用方便,檢測模式多樣,但是容易受外界干擾,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響,干擾檢測。
化學(xué)發(fā)光是來自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光,可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發(fā)光持久,穩(wěn)定,能持續(xù)一段時間;閃光型發(fā)光時間短,變化快,穩(wěn)定性不強(qiáng),需要應(yīng)用自動加樣器才可以進(jìn)行?;瘜W(xué)發(fā)光中發(fā)出的光子數(shù)與樣品量呈一定比例關(guān)系,化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀靈敏度非常高,動力學(xué)范圍廣。
酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片輪,可選擇試驗所需的不同波長的濾光片來進(jìn)行分光。廣東酶標(biāo)儀檢驗

如何測定的吸光度范圍?
通常,酶標(biāo)儀的吸光度測定范圍在0-2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標(biāo)儀可測定的吸光度一般在0-2.5之間,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達(dá)到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。
對于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,除測定通道外,有的酶標(biāo)儀還有一個參比通道,每次測定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何,均可通過酶標(biāo)儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來。光學(xué)系統(tǒng)好的話,則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
浙江多功能酶標(biāo)儀波長范圍廣酶標(biāo)儀比較廣用于醫(yī)院、血站、防疫站、生物制品等部門。

選擇酶標(biāo)儀的檢測波長:
405nm:ELISA檢測,底物是PNPP;
405-420:ELISA檢測,底物是ABTS;
450nm:
1. 科研應(yīng)用:
細(xì)胞增殖檢測CCK-8;ELISA檢測,底物是TMB;
ELISA檢測,底物是OPD(pH5.0,OPD比較**長450;pH1.0,OPD比較**長492);
2. 醫(yī)療應(yīng)用:
丙肝、乙肝檢測;HIV檢測;甲胎蛋白的測定AFP(肺免疫學(xué)檢測);CA15-3(乳腺的測定);單純皰病毒的檢測等等。
3. 農(nóng)業(yè)檢測:
動物疫病檢測,禽類疫病檢測;
4. 食品與環(huán)境安全:
檢測,獸藥殘留檢測,添加劑檢測,檢測。
490nm:細(xì)胞增殖檢測MTT;
540nm:一氧化氮(NO)檢測;
562nm:蛋白質(zhì)濃度測定(BCA);
595nm:蛋白質(zhì)濃度測定(考馬斯亮藍(lán)染色);

濾光片是酶標(biāo)儀中重要的光學(xué)元件,它的作用是根據(jù)不同的波長選擇性地透過或反射光線,從而實現(xiàn)對樣品信號的分離和增強(qiáng)。濾光片可以分為干涉濾光片和吸收濾光片兩種,前者是利用多層薄膜之間的干涉效應(yīng)來實現(xiàn)波長選擇,后者是利用染料或金屬等材料對特定波長的吸收來實現(xiàn)波長選擇。干涉濾光片具有透過率高、帶寬窄、溫度穩(wěn)定性好等優(yōu)點,是目前酶標(biāo)儀中常用的濾光片類型。
酶標(biāo)儀中常用的濾光片有三種:激發(fā)濾光片、發(fā)射濾光片和參考濾光片。激發(fā)濾光片位于光源和樣品之間,用于選擇合適的激發(fā)波長來激發(fā)樣品發(fā)出熒光或化學(xué)發(fā)光。發(fā)射濾光片位于樣品和探測器之間,用于選擇合適的發(fā)射波長來檢測樣品發(fā)出的熒光或化學(xué)發(fā)光。參考濾光片位于參考探測器前面,用于消除環(huán)境因素對檢測結(jié)果的影響,提高檢測精度。
國內(nèi)多家機(jī)構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性。

酶標(biāo)儀的使用:
1. 準(zhǔn)備工作:在使用酶標(biāo)儀之前,需要將儀器進(jìn)行預(yù)熱,并根據(jù)實驗需要選擇合適的濾光片。同時,需要將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測樣品的反應(yīng)體系準(zhǔn)備好。
2. 測量吸光度:將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測樣品分別加入反應(yīng)體系中,然后將反應(yīng)體系放入酶標(biāo)儀中進(jìn)行測量。在測量過程中,需要選擇合適的波長和濾光片,并設(shè)置好空白對照組。
3. 計算結(jié)果:根據(jù)測量結(jié)果,可以計算出待測樣品中物質(zhì)的含量。具體計算方法如下:
(1)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出各個標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值和物質(zhì)含量。
(2)根據(jù)待測樣品的吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出待測樣品中物質(zhì)的含量。
(3)根據(jù)實驗需要進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。
光吸收的檢測技術(shù)成熟,成本低,操作簡單。山西酶標(biāo)儀檢驗

酶標(biāo)儀常用波長為:405nm,450nm,490nm與630nm。廣東酶標(biāo)儀檢驗

寶予德K3 Plus酶標(biāo)儀測量參數(shù):
1. 單波長檢測:在一個波長下測量吸光度(也稱為終點法)。
2. 雙波長檢測:用兩個波長測量吸光度,**終結(jié)果為***次的測量結(jié)果減去第二次測量的結(jié)果。
3. 雙時法檢測:在兩個不同的時間點測量板的吸光度。**終結(jié)果為第二次測量的結(jié)果減去***次測量的結(jié)果。
4. 動力學(xué)檢測:測量吸光度變化率。
5. 多波長檢測:每一列的吸光值用各自不同的波長檢測。只在基礎(chǔ)酶聯(lián)程序中可用。
K3 Plus酶標(biāo)儀**于測量通過微孔板的吸光度值,采用8通道垂直檢測光路光密度檢測理念,**多可同時配置8塊濾光片,波長范圍400~750nm,儀器性能穩(wěn)定,更大的彩色液晶觸摸屏,可視用戶界面,簡單易用,在各種科研應(yīng)用中具有出色的靈活性。
廣東酶標(biāo)儀檢驗

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