光譜儀和分光光度計(jì)有什么區(qū)別?
使用光譜進(jìn)行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產(chǎn)生光譜,并利用其中特定的某個(gè)或某段光譜線(xiàn)強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行定量分析的儀器叫做分光光度計(jì)。這兩種叫法基本沒(méi)差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因?yàn)橹袊?guó)上海精密儀器廠首先將紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行了國(guó)產(chǎn)化,當(dāng)時(shí)的技術(shù)難點(diǎn)也就在分光技術(shù)上。老一代的分析員都是把紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)直接稱(chēng)作分光光度計(jì),所以分光光度計(jì)也特指紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實(shí)也是要有分光組件的,現(xiàn)在都是用光譜儀這個(gè)名詞來(lái)統(tǒng)稱(chēng)了,因此光譜儀的概念比分光光度計(jì)范圍要大一些,新一些。而分光光度計(jì)更集中在定量分析方面的稱(chēng)呼,有人把AES、AAS也稱(chēng)作分光光度計(jì)因?yàn)樗鼈冊(cè)谝话阈缘姆治龉ぷ髦幸仓饕怯脕?lái)定量的,這就造成了“分光光度計(jì)”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。
蛋白質(zhì)在280nm波長(zhǎng)處有較大吸光值。江西高靈敏度超微量分光光度計(jì)試用
包括波長(zhǎng)范圍為400~760 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~400 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。
鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400~760nm波長(zhǎng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍(lán)靛,紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源。
氫燈(或氘燈)的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185~400 nm波長(zhǎng)的光譜可作為紫外光光度計(jì)的光源。
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江西性能穩(wěn)定超微量分光光度計(jì)核酸檢測(cè)測(cè)試在紫外區(qū)有吸收的樣品時(shí)用石英比色皿。
Micro Drop快速啟動(dòng)操作:
1. 雙擊軟件圖標(biāo),并在功能鍵中選擇感興趣的軟件應(yīng)用。
2. 輸入樣品編號(hào)。
3. 用干凈的無(wú)塵紙擦干凈上下基座,用合適的液體建立空白對(duì)照,空白對(duì)照液體是溶解目標(biāo)分子的液體。
空白對(duì)照液體的pH值和離子濃度應(yīng)和檢測(cè)樣品一樣。
基座模式:取1-2μl空白對(duì)照加到基座上,放下檢測(cè)臂,勾選基線(xiàn)校正,點(diǎn)擊空白檢測(cè)鍵。
比色皿模式:插入比色皿時(shí)注意儀器上箭頭指示方向。光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請(qǐng)按照比色皿生產(chǎn)廠家的建議加入液體。
比色皿的正確使用方法 在使用比色皿時(shí),兩個(gè)透光面要完全平行,并垂直置于比色皿架中,以保證在測(cè)量時(shí),進(jìn)射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。 比色皿有方向性。有些比色皿上標(biāo)有方向標(biāo)記,無(wú)方向標(biāo)記的比色皿應(yīng)予以校正,校正時(shí)要先確定方向并作好標(biāo)記,以減少測(cè)定誤差。比色皿的校正方法是:將純凈的蒸餾水注入比色皿中,把其中吸收*小的比色皿的吸光度置為零,并以此為基準(zhǔn),測(cè)出其它比色皿的相對(duì)吸光度。同一組比色皿相互間的差異應(yīng)小于測(cè)定誤差在測(cè)定同一溶液時(shí),吸光度差值應(yīng)小于0.5%,否則應(yīng)對(duì)差值進(jìn)行校正。
MicroDrop使用長(zhǎng)壽命氙燈,滑動(dòng)軸承結(jié)構(gòu)的升降檢測(cè)基座,確保檢測(cè)的穩(wěn)定性和儀器的使用壽命。
超微量分光光度計(jì)比色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度:
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物,比色法測(cè)定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng),產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān),從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應(yīng)為基礎(chǔ),并有所改進(jìn)。蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺點(diǎn)是需要順序加入幾種不同的反應(yīng)試劑;反應(yīng)需要的時(shí)間較長(zhǎng);容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA,Tritonx-100等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法。
A260/A280:是核酸純度的指示值。云南雙檢測(cè)模式超微量分光光度計(jì)樣品檢測(cè)
不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。江西高靈敏度超微量分光光度計(jì)試用
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光線(xiàn)透過(guò)測(cè)試的樣品后,部分光線(xiàn)被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過(guò)被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長(zhǎng)度)成正比,其關(guān)系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強(qiáng)度;
I 為透射的單色光強(qiáng)度;
T 為物質(zhì)的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長(zhǎng);
c 為物質(zhì)的濃度;
物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測(cè)定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見(jiàn)光區(qū),除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒(méi)有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過(guò)處理使其顯色后再測(cè)定,故又稱(chēng)比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測(cè)定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。
江西高靈敏度超微量分光光度計(jì)試用
上海寶予德科學(xué)儀器有限公司是一家生產(chǎn)型類(lèi)企業(yè),積極探索行業(yè)發(fā)展,努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。公司是一家有限責(zé)任公司(自然)企業(yè),以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、專(zhuān)業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶(hù)提供***的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì),價(jià)格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶(hù)的歡迎。寶予德將以真誠(chéng)的服務(wù)、創(chuàng)新的理念、***的產(chǎn)品,為彼此贏得全新的未來(lái)!