超微量分光光度計(jì)比色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度:
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物,比色法測(cè)定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng),產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān),從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應(yīng)為基礎(chǔ),并有所改進(jìn)。蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺點(diǎn)是需要順序加入幾種不同的反應(yīng)試劑;反應(yīng)需要的時(shí)間較長(zhǎng);容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA,Tritonx-100等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法。
Bradford法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng)。河北全光譜波長(zhǎng)超微量分光光度計(jì)價(jià)格優(yōu)惠
光譜儀和分光光度計(jì)有什么區(qū)別?
使用光譜進(jìn)行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產(chǎn)生光譜,并利用其中特定的某個(gè)或某段光譜線強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行定量分析的儀器叫做分光光度計(jì)。這兩種叫法基本沒(méi)差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因?yàn)橹袊?guó)上海精密儀器廠首先將紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行了國(guó)產(chǎn)化,當(dāng)時(shí)的技術(shù)難點(diǎn)也就在分光技術(shù)上。老一代的分析員都是把紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)直接稱作分光光度計(jì),所以分光光度計(jì)也特指紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實(shí)也是要有分光組件的,現(xiàn)在都是用光譜儀這個(gè)名詞來(lái)統(tǒng)稱了,因此光譜儀的概念比分光光度計(jì)范圍要大一些,新一些。而分光光度計(jì)更集中在定量分析方面的稱呼,有人把AES、AAS也稱作分光光度計(jì)因?yàn)樗鼈冊(cè)谝话阈缘姆治龉ぷ髦幸仓饕怯脕?lái)定量的,這就造成了“分光光度計(jì)”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。
海南操作簡(jiǎn)便超微量分光光度計(jì)分光光度法是在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。
超微量分光光度計(jì)比色法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度:
BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測(cè)試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長(zhǎng)。此化合物與蛋白濃度的線性關(guān)系極強(qiáng),反應(yīng)后形成的化合物非常穩(wěn)定。相對(duì)于Lowry法,操作簡(jiǎn)單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點(diǎn)是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測(cè)試方法的2倍;操作更簡(jiǎn)單,速度更快;只需要一種反應(yīng)試劑;化合物可以穩(wěn)定1小時(shí),方便結(jié)果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應(yīng)的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對(duì)于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點(diǎn)是不同的標(biāo)準(zhǔn)品會(huì)導(dǎo)致同一樣品的結(jié)果差異較大,無(wú)可比性。
超微量分光光度計(jì)與傳統(tǒng)分光光度計(jì)相比,前者具備的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)在于(二):
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見(jiàn)),使用壽命更長(zhǎng);
(5)不需要預(yù)熱,可隨時(shí)檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間短【BIO-DL MicroDrop<5秒】;
(6)顯示吸光度值的同時(shí),程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實(shí)驗(yàn)室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計(jì)小很多【BIO-DL MicroDrop重量:2.1kg】。
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物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。
分光光度法是在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。常用的波長(zhǎng)范圍為:(1)200~380nm的紫外光區(qū),(2)380~780nm的可見(jiàn)光區(qū),(3)2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)(或比色計(jì))、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度,所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。熒光分光光度計(jì)的光源和檢測(cè)器是成直角分布的,而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是成一條直線的。廣東全光譜波長(zhǎng)超微量分光光度計(jì)菌液檢測(cè)
熒光分光光度計(jì)和紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室常用的光學(xué)儀器。河北全光譜波長(zhǎng)超微量分光光度計(jì)價(jià)格優(yōu)惠
使用Micro Drop可以方便地使用微量樣品進(jìn)行紫外-可見(jiàn)分光檢測(cè):
1. 不用稀釋就可以檢測(cè)濃度小于15000ng/μl(dsDNA)的核酸濃度;
2. 普通的紫外-可見(jiàn)分光光度檢測(cè);
3. 純蛋白濃度檢測(cè)(A280);
4. 微陣列和Protein & Labels應(yīng)用中的熒光染料基團(tuán)檢測(cè);
5. BCA蛋白定量分析;
6. Bradford蛋白定量分析;
7. Lowry法蛋白定量分析;
8. Pierce 660nm蛋白定量分析;
9. 微生物細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)。
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上海寶予德科學(xué)儀器有限公司致力于醫(yī)藥健康,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量管理的追求。寶予德作為醫(yī)藥健康的企業(yè)之一,為客戶提供良好的移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)。寶予德繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。寶予德始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè)。滿足市場(chǎng)需求,提高產(chǎn)品價(jià)值,是我們前行的力量。