重慶雙檢測模式超微量分光光度計(jì)樣品檢測

來源: 發(fā)布時間:2023-06-04

分光光度計(jì),又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源。上海寶予德科學(xué)儀器有限公司歡迎來電咨詢!Lowry法的原理是蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物。重慶雙檢測模式超微量分光光度計(jì)樣品檢測

超微量分光光度計(jì)不僅涵蓋了可見光分光光度計(jì)的功能而且也可以進(jìn)行紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用:
(二)UV-VIS常規(guī)可見-紫外檢測:
全波長超微量分光光度計(jì)可以像普通的紫外-可見分光光度計(jì)一樣行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值。**多可以同時指定檢測40個波長下的吸光值并把數(shù)據(jù)顯示在報(bào)告中。
(三)蛋白質(zhì)的直接定量(UV法):
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。蛋白質(zhì)測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質(zhì)的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。
上海全光譜波長超微量分光光度計(jì)紫外檢測寶予德MicroDrop超微量分光光度計(jì)既可使用超微量基座,也可使用常規(guī)比色皿檢測。

分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。常用的波長范圍為:(1)200~380nm的紫外光區(qū),(2)380~780nm的可見光區(qū),(3)2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見光分光光度計(jì)(或比色計(jì))、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度,所有儀器應(yīng)按照國家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。

Micro Drop為一款全波長(185~910nm)超微量紫外可見分光光度計(jì),不僅提供了便于測量小劑量樣本的基座模式,也可以使用傳統(tǒng)的比色皿來進(jìn)行樣本檢測。
基座模式下,本產(chǎn)品可以檢測0.5-2μl的樣本,而且檢測具有非常高的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。使用基座模式檢測樣本時,樣本保留系統(tǒng)應(yīng)用了表面張力來把樣本保留在兩根檢測光纖中間,這使得儀器可以檢測較高濃度的樣本而不用稀釋,測量濃度范圍可達(dá)普通分光光度計(jì)檢測濃度范圍的200倍,且可實(shí)時調(diào)控光纖之間的液柱高度,以獲得更準(zhǔn)確的檢測數(shù)據(jù)。相對于傳統(tǒng)的比色皿檢測方法,基座模式免去了復(fù)雜的比色皿清洗過程,只需使用無塵紙擦拭,清理簡便。另外,對于濃度低、易揮發(fā)或者表面張力比較低不易形成液柱的樣品,可以使用比色皿進(jìn)行測量。
開機(jī)后,按鈕亮起并持續(xù)保持光亮,在檢測過程中,按鈕指示燈會閃爍表示儀器正在運(yùn)行中。本產(chǎn)品無需預(yù)熱,即可直接進(jìn)行測量,操作簡單,快捷,且軟件可以直接給出濃度值。此外,本產(chǎn)品體積小,質(zhì)量輕,便于攜帶。
分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。

分光光度計(jì)采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強(qiáng)度;
I 為透射的單色光強(qiáng)度;
T 為物質(zhì)的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質(zhì)的濃度;
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
熒光分光光度計(jì)和紫外可見分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室常用的光學(xué)儀器。山東操作簡便超微量分光光度計(jì)

MicroDrop使用長壽命氙燈,滑動軸承結(jié)構(gòu)的升降檢測基座,確保檢測的穩(wěn)定性和儀器的使用壽命。重慶雙檢測模式超微量分光光度計(jì)樣品檢測

A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內(nèi);如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準(zhǔn)確,樣品內(nèi)有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關(guān),核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因?yàn)闃悠分械碾s質(zhì)和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標(biāo)明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機(jī)溶劑污染,需要純化樣品。
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