山東全自動酶標(biāo)儀Elisa實(shí)驗(yàn)

來源： 發(fā)布時間：2023-06-10

酶標(biāo)儀的使用：
1. 準(zhǔn)備工作：在使用酶標(biāo)儀之前，需要將儀器進(jìn)行預(yù)熱，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的濾光片。同時，需要將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測樣品的反應(yīng)體系準(zhǔn)備好。
2. 測量吸光度：將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測樣品分別加入反應(yīng)體系中，然后將反應(yīng)體系放入酶標(biāo)儀中進(jìn)行測量。在測量過程中，需要選擇合適的波長和濾光片，并設(shè)置好空白對照組。
3. 計(jì)算結(jié)果：根據(jù)測量結(jié)果，可以計(jì)算出待測樣品中物質(zhì)的含量。具體計(jì)算方法如下：
（1）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出各個標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值和物質(zhì)含量。
（2）根據(jù)待測樣品的吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出待測樣品中物質(zhì)的含量。
（3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析。
國內(nèi)多家機(jī)構(gòu)，如衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和計(jì)劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性。山東全自動酶標(biāo)儀Elisa實(shí)驗(yàn)

TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長450nm處有比較大消光系數(shù)，如果HRP量少，H：O：和TMB過量時，則形成藍(lán)色的陽離子根。降低pH，即可使藍(lán)色的陽離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min。因此，450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定常用的。各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的部件，可以同時安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應(yīng)包括上述兩個波長，有的酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。除了這兩個基本濾光片外，考慮到雙波長比色的需要，還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，其他濾光片可根據(jù)自己的需要選擇。有時，有的實(shí)驗(yàn)室希望用酶標(biāo)儀作微量生化測定，故酶標(biāo)儀生產(chǎn)廠家對其生產(chǎn)的酶標(biāo)儀擴(kuò)展了紫外檢測功能，此時需要一個340 nm波長濾光片。此時，酶標(biāo)儀的測定波長范圍就成為340—750nm或800nm。北京雙檢測模式酶標(biāo)儀高清觸屏K3 Plus酶標(biāo)儀擴(kuò)展內(nèi)存可以儲存多達(dá)500個測定方法。

K3 Plus酶標(biāo)儀**于測量通過微孔板的吸光度值，采用8通道垂直檢測光路光密度檢測理念，**多可同時配置8塊濾光片，波長范圍400~750nm，儀器性能穩(wěn)定，更大的彩色液晶觸摸屏，可視用戶界面，簡單易用，在各種科研應(yīng)用中具有出色的靈活性。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
8通道垂直光路設(shè)計(jì)，提供標(biāo)準(zhǔn)的光度測量;
檢測波長范圍400nm-750nm，適合各種科研應(yīng)用 ;
雙檢測模式(連續(xù)和步進(jìn))，測量96孔板*需5秒，速度快且重復(fù)性好。
多種程序檢測模式可選，包括單波長、雙波長、雙時法、動力學(xué)及多波長模式
系統(tǒng)內(nèi)置開機(jī)自我診斷程序，確保儀器性能的穩(wěn)定可靠 ;
較大彩色液晶觸摸顯示幕，中英文界面，易于使用;
三檔速度可調(diào)的線性振蕩功能，滿足更多實(shí)驗(yàn)需求。

酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值大小。隨著檢測方式的不斷發(fā)展，擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀，可檢測吸光度（Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時間分辨熒光（TRF)、熒光偏振（FP)、和化學(xué)發(fā)光（Lum)。酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長，而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片，只能截取特定波長進(jìn)行檢測?？蓮V泛應(yīng)用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析（A260/A280）和蛋白定量（A280/BCA/Braford/Lowry），酶活、酶動力學(xué)檢測，酶聯(lián)免疫測定（ELISAs），細(xì)胞增殖與毒性分析，細(xì)胞凋亡檢測（MTT），報(bào)告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析（GPCR）等。K3 Plus酶標(biāo)儀顯示屏內(nèi)置軟件界面，分別4大菜單界面。

寶予德K3 Plus酶標(biāo)儀光學(xué)系統(tǒng)包括以下部件：
光源：光源為裝有鍍鋁橢圓反射器的石英鹵鎢燈（Osram 64607A，8V/50W）。為了延長燈具的使用壽命，不使用時請關(guān)閉儀器。開始測量前，必須先預(yù)熱一（1）分鐘。
斬光輪：斬光輪截?cái)喙馐?，以盡可能減少電子噪音。
半透明鏡：光束穿過聚光透鏡后照射到半透明鏡上。部分可見光與所有長波長均穿過鏡片及UV，而剩下的可見光反射到其它地方。此裝置能夠減少干涉濾光片的發(fā)熱，并使光譜強(qiáng)度分布均勻。
干涉濾光片：濾光片輪的一到八（1到8）個濾光片中選擇波長。
光纖束：穿過干涉濾光片后，光束到達(dá)光纖束的端點(diǎn)，光束折射為八（8）束平行向上的光線。
聚焦透鏡：經(jīng)折射后，光線穿過由八（8）個透鏡組成的聚焦系統(tǒng)。
檢測器：光束經(jīng)孔板底部，樣品及上部透鏡，***進(jìn)入檢測器，由檢測器測量光的強(qiáng)度。
K3 Plus酶標(biāo)儀適用于測量通過微孔板的吸光度值。山東全自動酶標(biāo)儀Elisa實(shí)驗(yàn)

光柵式酶標(biāo)儀使用方便靈活，可以通過軟件選擇任意波長的光。山東全自動酶標(biāo)儀Elisa實(shí)驗(yàn)

合適的軟件功能對于ELISA定量測定同樣很重要。有研究表明，四參數(shù)方程能較好地反映免疫測定的劑量反應(yīng)曲線，*為適合于定量酶免疫測定的曲線擬合。因此，如目的是定量測定，則在酶標(biāo)儀的軟件功能中，要有這種曲線回歸方程計(jì)算分析功能。其他諸如連點(diǎn)、直線等回歸計(jì)算，則可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定，如兼用于微量生化測定，則此類回歸計(jì)算就很有必要。此外，酶標(biāo)儀兼做酶標(biāo)動力學(xué)、凝集反應(yīng)測定所需的軟件是否應(yīng)具備，當(dāng)然也應(yīng)根據(jù)使用目的而定。由于此類軟件一般都較為昂貴，酶標(biāo)儀常另外單獨(dú)按需配備，如果不是實(shí)驗(yàn)室特殊需要，就不必強(qiáng)求這種軟件功能。山東全自動酶標(biāo)儀Elisa實(shí)驗(yàn)

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