超微量分光光度計比色法測定蛋白質(zhì)濃度:
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物,比色法測定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng),產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān),從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應(yīng)為基礎(chǔ),并有所改進(jìn)。蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應(yīng)試劑;反應(yīng)需要的時間較長;容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA,Tritonx-100等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法。
寶予德MicroDrop超微量分光光度計既可使用超微量基座,也可使用常規(guī)比色皿檢測。吉林雙檢測模式超微量分光光度計蛋白檢測
Micro Drop超微量分光光度計基座的維護(hù):
檢測完樣品后請立即擦除基座上的液體,如不繼續(xù)檢測,請用純水清潔基座,并擦干,這樣溶液或溶劑不會對基座造成損傷。
禁止接觸任何形式的氟化氫(HF),氟離子會溶解基座內(nèi)的石英光纖。
請勿使任何液體進(jìn)入基座與機(jī)體之間的縫隙,否則可能會損壞機(jī)器。如有液體溢出,請立即擦除。
檢測完樣品后若未及時擦除基座上的液體,或儀器長期使用后,基座表面可能有樣本及其氧化物等雜質(zhì)殘留,可按如下兩種方法***。
1.用純水***基座表面樣本殘留或樣本氧化物等雜質(zhì),步驟方法如下:
1)在底部基座光纖金屬面加3-5ul純水;
2)將翻蓋放下使形成液柱,靜置2-3分鐘;
3)用干凈無絨布將純水擦拭干凈。
2.在純水未能有效***基座表面殘留物的情況下,需用稀鹽酸(0.5M/L)***基座表面樣本殘留或樣本氧化物等雜質(zhì),步驟方法如下:
1)在底部基座光纖金屬面加3-5ul稀鹽酸(0.5M/L);
2)將翻蓋放下使形成液柱,靜置2-3分鐘;
3)用干凈無絨布將稀鹽酸擦拭干凈。
注意:用稀鹽酸(0.5M/L)***光纖頭表面雜質(zhì)后,請務(wù)必用純水再***表面的稀鹽酸殘留液。
云南操作簡便超微量分光光度計MicroDrop可連接電腦/平板電腦,實現(xiàn)本地一指控制;WiFi無線連接功能,節(jié)省時間和空間。
Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能:
Protein Pierce 660nm檢測方式:
Protein Pierce 660nm主要用來定量檢測那些含有還原劑或者去污劑的總蛋白濃度,使用的的試劑/樣品體積比例為15:1。當(dāng)使用基座檢測時,推薦使用4μl樣品和60μl試劑。
按照試劑盒生產(chǎn)廠家的說明來準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品和和構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環(huán)境溫度一致??梢詮脑噭┖猩a(chǎn)廠家購買用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(BSA)。
當(dāng)使用4μl樣品和60μl試劑時,Pierce 660nm可以檢測的濃度范圍為50ug/ml到125ug/ml。
超微量分光光度計與傳統(tǒng)分光光度計相比,前者具備的獨特優(yōu)點在于(二):
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見),使用壽命更長;
(5)不需要預(yù)熱,可隨時檢測,檢測時間短【BIO-DL MicroDrop<5秒】;
(6)顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實驗室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計小很多【BIO-DL MicroDrop重量:2.1kg】。
上海寶予德科學(xué)儀器有限公司主營超微量分光光度計,歡迎大家來電咨詢!
Lowry法的原理是蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物。
寶予德超微量分光光度計使用時注意小貼士:
(1)測量前將樣品中度混勻(可采用震蕩器或用手指彈震管底)
(2)移液器吸頭插入液面下吸取樣品,可避免吸入氣泡;TIP頭貼著下光纖表面打出樣品,且只按到移液器***擋盡頭,第二擋不要按,可以避免吹出氣泡到樣品中。
(3)每次測量完畢后,用蒸餾水清潔上下光纖端面,這樣可以更好地保證下一次測量的準(zhǔn)確性(主要針對超高濃度樣品,一般樣品無此要求)。
(4)每次做空白檢測前一定要先用水清潔上下光纖表面,可保證空白檢測準(zhǔn)確。
(5)每次測量的核酸樣品量建議為1-2微升,蛋白樣品建議2微升。 過少可能無法形成水柱,過多可能溢出。
(6)加樣后盡快測量,以防蒸發(fā)濃縮以及灰塵落入,已加樣品不能多次檢測,如需重測需重新滴加同一樣品。
(7)儀器避免陽光直射,避免強風(fēng)吹拂,以避免蒸發(fā)。
(8)連續(xù)測量一段時間后擦凈樣品,用水清潔上下光纖表面,然后用水或緩沖液進(jìn)行重新空白后再檢測。
(9)清潔光纖端面(上樣基座)時必須用潔凈質(zhì)軟的實驗室用紙(擦鏡紙等)進(jìn)行輕輕擦拭。
使用光譜進(jìn)行定性分析的儀器叫做光譜儀。吉林超微量分光光度計樣品檢測
核酸的較高吸收峰的吸收波長260nm。吉林雙檢測模式超微量分光光度計蛋白檢測
分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。常用的波長范圍為:(1)200~380nm的紫外光區(qū),(2)380~780nm的可見光區(qū),(3)2.5~25μm(按波數(shù)計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度,所有儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。吉林雙檢測模式超微量分光光度計蛋白檢測
上海寶予德科學(xué)儀器有限公司是一家儀器儀表(除計量)、實驗室設(shè)備(除特種)的生產(chǎn)、銷售,科學(xué)儀器領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù),自有房屋租賃。移液器,移液耗材,酶標(biāo)儀,超微量分光光度計,核酸提取儀,研磨儀,混勻儀的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。寶予德?lián)碛幸恢Ы?jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計。寶予德始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團(tuán)隊取得成功。寶予德始終關(guān)注醫(yī)藥健康市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。