如何測定的吸光度范圍?
通常,酶標儀的吸光度測定范圍在0-2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在0-2.5之間,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。
對于酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
酶標儀的光學系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導纖維,除測定通道外,有的酶標儀還有一個參比通道,每次測定可進行自我校準。酶標儀的光學系統(tǒng)功能如何,均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準確度等體現(xiàn)出來。光學系統(tǒng)好的話,則上述指標也應較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
波長100-400nm稱為紫外光,400-780nm之間的光稱為可見光,大于780nm稱為紅外光。四川多功能酶標儀高清觸屏
選擇酶標儀的檢測波長:
405nm:ELISA檢測,底物是PNPP;
405-420:ELISA檢測,底物是ABTS;
450nm:
1. 科研應用:
細胞增殖檢測CCK-8;ELISA檢測,底物是TMB;
ELISA檢測,底物是OPD(pH5.0,OPD比較**長450;pH1.0,OPD比較**長492);
2. 醫(yī)療應用:
丙肝、乙肝檢測;HIV檢測;甲胎蛋白的測定AFP(肺免疫學檢測);CA15-3(乳腺的測定);單純皰病毒的檢測等等。
3. 農(nóng)業(yè)檢測:
動物疫病檢測,禽類疫病檢測;
4. 食品與環(huán)境安全:
檢測,獸藥殘留檢測,添加劑檢測,檢測。
490nm:細胞增殖檢測MTT;
540nm:一氧化氮(NO)檢測;
562nm:蛋白質(zhì)濃度測定(BCA);
595nm:蛋白質(zhì)濃度測定(考馬斯亮藍染色);
河南操作簡便酶標儀酶聯(lián)免疫光吸收的檢測技術(shù)成熟,成本低,操作簡單。
國內(nèi)多家機構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調(diào)酶標儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應使用酶標儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應使用酶標儀,并提供酶標儀測定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是一些實質(zhì)性的和病變(如:肝炎、、優(yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴謹,由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、艾滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。
上海寶予德科學儀器有限公司為大家介紹:光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關(guān)系:
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。
酶標儀的檢測速度是指其完成比色測定所需要的時間。
根據(jù)不同的檢測模式和樣品類型,酶標儀需要選配不同波長的濾光片。一般來說,激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片應該匹配樣品的激發(fā)和發(fā)射譜,并且兩者之間應該有足夠的隔離以避免信號干擾。參考濾光片應該選擇與激發(fā)或發(fā)射波長相近但不重疊的波長,并且與樣品無關(guān)。常見的酶標儀濾光片波長有:
光吸收模式:340 nm、405 nm、450 nm、492 nm、620 nm等;
熒光模式:340/460 nm、360/460 nm、485/535 nm、490/520 nm等;
化學發(fā)光模式:400 nm、410 nm、430 nm等;
時間分辨熒光模式:337/620 nm、355/665 nm等;
熒光偏振模式:485/535 nm等。
濾光片酶標儀也有優(yōu)勢,例如價格較為便宜,檢測靈敏度高,帶寬的可選擇性。河南操作簡便酶標儀酶聯(lián)免疫
濾光片作用是根據(jù)不同的波長選擇性地透過或反射光線,從而實現(xiàn)對樣品信號的分離和增強。四川多功能酶標儀高清觸屏
酶標儀的震板功能是指酶標儀在對ELISA板孔進行比色測定前對其進行振蕩混勻,使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場上常見的酶標儀均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋轉(zhuǎn)等方式及振蕩幅度等任意調(diào)節(jié);有的則較為固定。使用有震板功能的酶標儀,在進行ELISA測定顯色反應完成加入終止劑后,可不必振蕩混勻,直接放人酶標儀上測定即可。溫育功能是指酶標儀本身能按要求自動精確地控制儀器內(nèi)部的溫度,使得ELISA測定中微孔板條的溫育過程可在儀器內(nèi)部完成,而無需再外配溫箱。目前,只有少部分酶標儀具有此種功能,溫育功能只是酶標儀的一個附加功能,是否具有并不能說明酶標儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實驗室是否選擇,則可根據(jù)自己實驗室的條件及需要來決定。四川多功能酶標儀高清觸屏
上海寶予德科學儀器有限公司是一家儀器儀表(除計量)、實驗室設備(除特種)的生產(chǎn)、銷售,科學儀器領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務,從事貨物及技術(shù)的進出口業(yè)務,自有房屋租賃。移液器,移液耗材,酶標儀,超微量分光光度計,核酸提取儀,研磨儀,混勻儀的公司,是一家集研發(fā)、設計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。公司自創(chuàng)立以來,投身于移液器,吸頭,酶標儀,分光光度計,是醫(yī)藥健康的主力軍。寶予德致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。寶予德始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè)。滿足市場需求,提高產(chǎn)品價值,是我們前行的力量。