Recombinant Human LGR-5 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-05-30

Dabigatranetexilatemesylate,又稱甲磺酸達(dá)比加群酯,是可口服的凝血酶抑制劑,是一種抗凝藥,通過競爭結(jié)合凝血酶的纖維蛋白特異結(jié)合位點,阻礙纖維蛋白生成,從而抑制血栓的形成。產(chǎn)品信息英文別名(EnglishSynonym)Dabigatranetexilatemesylate,Pradaxa,BIBR1048MS,Dabigatranetexilatemethanesulfonate中文名稱(ChineseName)甲磺酸達(dá)比加群酯,達(dá)比加群酯甲磺酸鹽靶點(Target)Thrombin通路(Pathway)Protease/MetabolicEnzyme--ThrombinCAS號(CASNO.)872728-81-9分子式(Formula)C35H45N7O8S分子量(MolecularWeight)723.84外觀(Appearance)粉末純度(Purity)≥98%溶解性(Solubility)溶于DMSO運(yùn)輸和保存方法-25~-15℃保存,有效期3年。使用方法【數(shù)據(jù)來自于公開發(fā)表的文獻(xiàn),供參考,具體使用濃度請參考相關(guān)文獻(xiàn),并根據(jù)自身實驗條件(如實驗?zāi)康?,?xì)胞種類,培養(yǎng)特性等)進(jìn)行摸索和優(yōu)化?!縿游飳嶒灒w內(nèi)實驗)在體內(nèi),口服dabigatranetexilate在大10-50mg/kg)和恒河猴(1-5mg/kg)時間劑量依賴性地表現(xiàn)出抗凝效果。全長跨膜蛋白CB1它通過與G蛋白的相互作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的第二信使系統(tǒng),如cAMP水平。Recombinant Human LGR-5 Protein,hFc Tag

Recombinant Human LGR-5 Protein,hFc Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì),由于只需要簡單的培養(yǎng)基和條件,因此費(fèi)用低且方便。此外,除了無細(xì)胞表達(dá),它是速度的系統(tǒng),大腸桿菌倍增時間(約20min)比酵母(2h)、昆蟲細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞都快。一般來說,在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括:1.將一個編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌;2.培養(yǎng)細(xì)胞至對數(shù)生長期;3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后,相應(yīng)的有許多工程化克隆位點和用于驅(qū)動蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用。啟動子通常是可誘導(dǎo)的,以在細(xì)胞生長到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá)。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體Dynorphin A(1-13),porcinePNGase F可以用于從糖蛋白上釋放完整的N-連接寡糖鏈,這在蛋白質(zhì)組學(xué)和糖生物學(xué)研究中非常有用。

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RecombinantBiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProtein,hFc-AviTag分子別名(Synonyms)Mesothelin;CAK1;MSLN;MPFSMRP表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)BiotinylatedHumanMSLN/MesothelinProteinisexpressedfromHEK293withhFctagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsGlu296-Gly580.[Accession|Q13421-2]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto70-80kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedAnti-MSLNAntibody,hFcTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanMSLN,hFcTagwiththeEC50of18.4ng/mldeterminedbyELISA.

利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表達(dá)載體pGEX一4T一1的多克隆位點中,得到重組質(zhì)粒pGCPI,測序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),超聲波破茵后,通過谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白,純度大于97%。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98%的重組CPI,ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性,體外檢測表明其促進(jìn)纖溶的生物功能與天然CPI無明顯差異。在生物制藥工業(yè)中,腸激酶用于生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)藥物,通過專一性切割去除不需要的序列,提高藥物純度和活性。

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透明質(zhì)酸酶,英文名稱Hyaluronidase,一類能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸活性的酶的總稱,結(jié)構(gòu)上由4個相同亞基構(gòu)成,每個亞基分子量接近14kDa,該酶是一種糖蛋白,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上該酶可隨機(jī)裂解透明質(zhì)酸、軟骨素和硫酸軟骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷鍵。常與膠原酶聯(lián)合使用于降解細(xì)胞外基質(zhì),從而從組織中分離活細(xì)胞。本品來源于牛睪丸,活力值為400–1,000units/mg,合適的pH值為4.5–6.0。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(ChineseSynonym)玻璃糖醛酸酶;玻璃酸酶英文別名(EnglishSynonym)Hyaluronoglucosaminidase;Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS號(CASNO.)37326-33-3來源(Source)牛睪丸分子量(MolecularWeight)~55kDa類型(Type)I-S外觀(Appearance)淡黃色至米黃色至褐色粉末全長跨膜蛋白A2AR,也就是腺苷受體A2aR(ADORA2A),是一種七次跨膜蛋白,屬于G蛋白偶聯(lián)受體。Recombinant Human TREM1 Protein,His Tag

隨著醫(yī)藥科技的發(fā)展,透明質(zhì)酸在醫(yī)藥這方面的應(yīng)用將越來越多,包括作為藥物載體和組織工程的基質(zhì)。Recombinant Human LGR-5 Protein,hFc Tag

泛素化是通過三個酶促步驟實現(xiàn)的。在ATP依賴的過程中,泛素酶(E1)催化與泛素形成活性硫酯鍵,然后轉(zhuǎn)移到泛素載體蛋白的活性位點半胱氨酸(E2)。泛素級聯(lián)對特定底物蛋白的選擇性依賴于E2結(jié)合酶(細(xì)胞中包含的相對較少)和泛素-蛋白連接酶(E3)之間的相互作用,迄今為止已經(jīng)鑒定出600多種這種酶。E3s是一個大的,多樣化的蛋白質(zhì)組,其特征是幾個確定的基序之一。這些包括HECT(與e6相關(guān)蛋白c端同源),RING(真正有趣的新基因)或U-box(沒有Zn2+結(jié)合配體的完整補(bǔ)充的修飾的RING基序)結(jié)構(gòu)域。而HECTE3s在泛素化過程中具有直接的催化作用,RING和U-boxE3s促進(jìn)蛋白質(zhì)泛素化。后兩種E3類型充當(dāng)適配器類分子。它們使E2和底物足夠接近,從而促進(jìn)底物的泛素化。雖然許多RING-typee3,如MDM2和c-Cbl,可以單獨發(fā)揮作用,但其他一些是作為更大的多蛋白復(fù)合體的組成部分,如后期促進(jìn)復(fù)合體。綜上所述,這些多面的特性和相互作用使E3s能夠利用泛素-蛋白酶體系統(tǒng),在真核生物的所有細(xì)胞中提供一種強(qiáng)大而具體的蛋白質(zhì)機(jī)制。該篩選了11種常用E2結(jié)合酶,可以篩選具有E3連接酶活性的蛋白所匹配的E2酶.Recombinant Human LGR-5 Protein,hFc Tag