Recombinant Cynomolgus IL-21R Protein

IdeSProtease全稱免疫球蛋白G降解酶，酶活（Enzymeactivity）40U/μL酶活定義（UnitDefinition）在37℃條件下，反應(yīng)30min，剪切＞95%的1μg重組單克隆IgG所需要的酶量定義為一個活性單位。儲存條件-25~-15℃保存，有效期1年。使用方法1.在消化液中加入適量IgG(加至5mg)；2.在IgG樣本中加入IdeS蛋白酶（每1μgIgG加入1個單位的IdeS）；3.將樣品置于37℃孵育30-60min。IdeS蛋白酶在中性pH或接近中性pH的緩沖中活性強(qiáng)。推薦反應(yīng)緩沖是50mM磷酸鈉，150mMNaCl（pH6.6），多數(shù)常見的生物緩沖也適用，比如Tris或PBS；注意：不在此pH范圍（例如乙酸鹽緩沖液）的緩沖也可能適用，但是孵育時間或酶量需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行優(yōu)化。注意事項(xiàng)1.IdeS不能識別切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠、豬、牛和山羊IgG，對小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性，酶切小鼠IgG2a和IgG3建議增加IdeS的用量（推薦用量為正常用量的5-10倍）。2.IdeS不能切割非IgG亞型的單抗分子，包括IgA、IgM、IgD和IgE。在蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域，泛素蛋白可以作為一種標(biāo)簽或融合蛋白，用于提高目標(biāo)蛋白的可溶性、穩(wěn)定性或功能性。Recombinant Cynomolgus IL-21R Protein,His Tag

Endo H糖苷內(nèi)切酶H：結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H（Endo H）是一種專門切割N-連接糖鏈的內(nèi)切酶，用于糖生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制、以及其在研究和臨床應(yīng)用中的潛力。引言N-連接糖基化是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的蛋白質(zhì)修飾方式，涉及將糖鏈添加到蛋白質(zhì)的天冬酰胺殘基上。Endo H作為一種內(nèi)切酶，能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵，從而在蛋白質(zhì)工程和生物制藥中發(fā)揮重要作用。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H通常來源于流感嗜血桿菌（Hemophilus influenzae），其分子質(zhì)量約為50 kDa。該酶由兩個結(jié)構(gòu)域組成：一個負(fù)責(zé)識別糖鏈的催化結(jié)構(gòu)域和一個有助于酶穩(wěn)定性的非催化結(jié)構(gòu)域。催化機(jī)制Endo H的催化機(jī)制涉及對N-連接糖鏈的特異性識別和切割。酶的活性位點(diǎn)含有多個氨基酸殘基，這些殘基與糖鏈的特定結(jié)構(gòu)相互作用，導(dǎo)致酶對底物的高特異性。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應(yīng)，需要水分子的參與。Biotinylated Recombinant Human CD40/TNFRSF5(His-Avi Tag)PNGase F可以用于從糖蛋白上釋放完整的N-連接寡糖鏈，這在蛋白質(zhì)組學(xué)和糖生物學(xué)研究中非常有用。

Name:AITRL,MouseSynonyms:Activation-inducedTNFRmemberLigand,TNFSF18,GITRL,TL-6Description:Activation-InducibleTNF-RelatedLigand(AITRL),alsoknownasGlucocorticoid-InducedTNF-RelatedLigand(GITRL),belongstothetumornecrosisfactorsuperfamily(TNFSF).AITRLisaTypeIIsingletransmembraneproteinandshareslowconservationwithintheextracellulardomainwithotherTNFSFmembers.AITRLisexpressedonmacrophages,immatureandmaturedendriticcellsandBcells.Itsreceptor,Activation-InducibleTNFRfamilyReceptor(AITR),isexpressedonTlymphocytes,naturalkiller(NK)cells,andantigen-presentingcells.AfterbindingbyAITRL,AITRcanbereleased.AITRactivationincreasesresistancetotumorsandviralinfectionsandisinvolvedinautoimmuneandinflammatoryprocesses.Inaddition,activatedAITRincreasesTCR-inducedTcellproliferationandcytokineproductionandrescuesTcellsandNKcellsfromapoptosis.RecombinantmouseActivation-InducibleTNF-RelatedLigand(rmAITRL)producedinE.

大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì)，由于只需要簡單的培養(yǎng)基和條件，因此費(fèi)用低且方便。此外，除了無細(xì)胞表達(dá)，它是速度的系統(tǒng)，大腸桿菌倍增時間（約20min）比酵母（2h）、昆蟲細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞都快。一般來說，在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括：1.將一個編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌；2.培養(yǎng)細(xì)胞至對數(shù)生長期；3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后，相應(yīng)的有許多工程化克隆位點(diǎn)和用于驅(qū)動蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用。啟動子通常是可誘導(dǎo)的，以在細(xì)胞生長到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá)。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類：E．coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體α-凝血酶是研究血液凝固機(jī)制和血栓性疾病發(fā)展的主要靶點(diǎn)。重組α-凝血酶用于體外測定。

表達(dá)與純化：重組抑肽酶在大腸桿菌中得到了高效表達(dá)，并通過純化過程獲得了純度達(dá)到95%以上的產(chǎn)品?；钚则?yàn)證：重組抑肽酶展現(xiàn)出與天然抑肽酶相似的酶學(xué)性質(zhì)，能夠有效抑制胰蛋白酶的活性。穩(wěn)定性測試：重組抑肽酶在推薦的儲存條件下（-20oC至2-8oC）具有長達(dá)24個月的穩(wěn)定性。討論生產(chǎn)優(yōu)勢：大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)具有成本低、表達(dá)速度快、易于擴(kuò)大生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。此外，重組抑肽酶無動物源性，減少了病毒污染的風(fēng)險，提高了產(chǎn)品的安全性?？蒲袘?yīng)用：重組抑肽酶可廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域，如蛋白純化、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等，提供了一種穩(wěn)定且可靠的實(shí)驗(yàn)工具。工業(yè)生產(chǎn)：在工業(yè)生產(chǎn)中，重組抑肽酶可用于重組蛋白藥物的生產(chǎn)過程中，防止蛋白酶降解，提高產(chǎn)品純度和產(chǎn)量。結(jié)論大腸桿菌表達(dá)的重組抑肽酶具有高純度、高活性和良好的穩(wěn)定性，是一種理想的科研和工業(yè)用蛋白酶抑制劑。其無動物源性和高生產(chǎn)效率的特點(diǎn)，為生物技術(shù)領(lǐng)域提供了一種安全、經(jīng)濟(jì)的替代品?？缒さ鞍椎谋磉_(dá)與制備需要采用合適的表達(dá)載體、宿主細(xì)胞、培養(yǎng)條件和純化工藝等方法，優(yōu)化表達(dá)和純化過程。Recombinant Human FGFR3 beta (IIIb) Protein,His-Avi Tag

在蛋白質(zhì)表達(dá)體系中，腸激酶常用于切割融合標(biāo)簽，從而釋放出目的蛋白，特別是在pET表達(dá)系統(tǒng)中。Recombinant Cynomolgus IL-21R Protein,His Tag

3C蛋白酶（3C Protease），也稱為3Cpro或3C樣蛋白酶（3CLpro），是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶。它們負(fù)責(zé)切割病毒的多聚蛋白前體，從而釋放出成熟的病毒蛋白，這些蛋白對于病毒的復(fù)制和組裝至關(guān)重要。3C蛋白酶在多種病毒中都有發(fā)現(xiàn)，包括冠狀病毒、小RNA病毒等。結(jié)構(gòu)與功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位點(diǎn)，能夠識別并切割特定的氨基酸序列。例如，小RNA病毒科的3C蛋白酶識別位點(diǎn)為Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro，切割位點(diǎn)位于谷氨酰胺（Gln）和甘氨酸（Gly）之間，稱為Q-G位點(diǎn)4。抗病毒藥物開發(fā)3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的關(guān)鍵作用，成為抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點(diǎn)。通過抑制3C蛋白酶的活性，可以有效阻斷病毒的復(fù)制過程。例如，SARS-CoV-2（病毒）的3CLpro是抗冠狀病毒藥物的重要靶點(diǎn)，西湖大學(xué)胡奇團(tuán)隊(duì)等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潛在耐藥機(jī)制，為解決潛在的耐藥問題提供了重要信息3。耐藥性研究隨著3CLpro抑制劑的使用，其耐藥問題也日益受到關(guān)注。研究表明，3CLpro的某些突變可能導(dǎo)致病毒對抑制劑產(chǎn)生耐藥性。Recombinant Cynomolgus IL-21R Protein,His Tag