Recombinant Cynomolgus IL-1R3/IL-1 RAcP Protein

利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato，CPI)活性多肽基因，克隆于表達(dá)載體pGEX一4T一1的多克隆位點(diǎn)中，得到重組質(zhì)粒pGCPI，測(cè)序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，超聲波破茵后，通過(guò)谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白，純度大于97％。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98％的重組CPI，ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性，體外檢測(cè)表明其促進(jìn)纖溶的生物功能與天然CPI無(wú)明顯差異。透明質(zhì)酸的衍生物可以作為基因傳遞的載體，或用于疫苗佐劑，增強(qiáng)反應(yīng)。Recombinant Cynomolgus IL-1R3/IL-1 RAcP Protein,His Tag

胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組胰蛋白酶多用大腸桿菌或酵母系統(tǒng)重組表達(dá)并經(jīng)過(guò)多步層析純化獲得，無(wú)糜蛋白酶等雜酶污染。重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性，其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源。因其無(wú)動(dòng)物源污染性和純度高，在醫(yī)藥開(kāi)發(fā)、生化研究、蛋白組學(xué)等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。翌圣目前可提供2款重組胰蛋白酶，分別為藥典級(jí)（Cat#40512ES）、質(zhì)譜級(jí)（Cat#20416ES）藥典級(jí)：大腸桿菌表達(dá)的重組胰蛋白酶，氨基酸序列與豬胰腺來(lái)源的胰蛋白酶完全一致，生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料，無(wú)外源性的病毒污染，可替代豬胰腺來(lái)源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中，如：細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等。本產(chǎn)品純度高、不含雜酶、宿主蛋白和DNA殘留量符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，避免了雜質(zhì)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，pH為7.0-9.0，穩(wěn)定pH為2±0.5。質(zhì)譜級(jí)：畢赤酵母表達(dá)的重組豬胰蛋白酶，在GMP法規(guī)下生產(chǎn)，不含任何動(dòng)物源成分，無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染，天然缺乏糜蛋白酶活性，并已過(guò)濾除菌。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque Her3 Protein,His Tag透明質(zhì)酸的生物相容性使其在生物材料領(lǐng)域具有潛在應(yīng)用，如作為藥物遞送載體。

3C蛋白酶（3C Protease），也稱為3Cpro或3C樣蛋白酶（3CLpro），是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶。它們負(fù)責(zé)切割病毒的多聚蛋白前體，從而釋放出成熟的病毒蛋白，這些蛋白對(duì)于病毒的復(fù)制和組裝至關(guān)重要。3C蛋白酶在多種病毒中都有發(fā)現(xiàn)，包括冠狀病毒、小RNA病毒等。結(jié)構(gòu)與功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位點(diǎn)，能夠識(shí)別并切割特定的氨基酸序列。例如，小RNA病毒科的3C蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)為L(zhǎng)eu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro，切割位點(diǎn)位于谷氨酰胺（Gln）和甘氨酸（Gly）之間，稱為Q-G位點(diǎn)4。抗病毒藥物開(kāi)發(fā)3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的關(guān)鍵作用，成為抗病毒藥物開(kāi)發(fā)的重要靶點(diǎn)。通過(guò)抑制3C蛋白酶的活性，可以有效阻斷病毒的復(fù)制過(guò)程。例如，SARS-CoV-2（病毒）的3CLpro是抗冠狀病毒藥物的重要靶點(diǎn)，西湖大學(xué)胡奇團(tuán)隊(duì)等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潛在耐藥機(jī)制，為解決潛在的耐藥問(wèn)題提供了重要信息3。耐藥性研究隨著3CLpro抑制劑的使用，其耐藥問(wèn)題也日益受到關(guān)注。研究表明，3CLpro的某些突變可能導(dǎo)致病毒對(duì)抑制劑產(chǎn)生耐藥性。

抑肽酶（Aprotinin），又稱為抑蛋白酶肽，是一種競(jìng)爭(zhēng)性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑，可與絲氨酸蛋白酶形成穩(wěn)定復(fù)合物并阻斷酶的活性位點(diǎn)，這種結(jié)合是可逆的，大多數(shù)的抑肽酶-蛋白酶復(fù)合物在極端的pH<3.0的條件下解除結(jié)合。抑肽酶抑制糜蛋白酶、胰蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶，不能抑制Xa因子和凝血酶。從結(jié)構(gòu)上來(lái)說(shuō)，抑肽酶是一種來(lái)自牛肺的單體球狀蛋白，由58個(gè)氨基酸組成并排列在具有三個(gè)交聯(lián)二硫鍵的單個(gè)多肽鏈中。重組抑肽酶采用大腸桿菌表達(dá)，在GMP法規(guī)下生產(chǎn)，不含任何動(dòng)物源成分，無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染，氨基酸序列與來(lái)源于牛肺的抑肽酶完全一致，具有與動(dòng)物源性抑肽酶相同的酶學(xué)性質(zhì)，可替代動(dòng)物源性抑肽酶用于各種生物技術(shù)過(guò)程中，如：重組蛋白生產(chǎn)中抑制絲氨酸蛋白酶的活性；細(xì)胞培養(yǎng)等。腸激酶能夠特異性識(shí)別并切割含有Aspartate-Aspartate-Aspartate-Lysine (DDDK) 序列的蛋白質(zhì)。

重組腸激酶（rEK）是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段，氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致，有著和天然提取的腸激酶同樣特異的酶切位點(diǎn)，切割位點(diǎn)Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽，同時(shí)重組腸激酶（rEK）具有比天然酶更高的切割活性。重組腸激酶為采用重組大腸桿菌分泌表達(dá)的高純度、高活性、高特異的牛腸激酶，不含其他蛋白酶，可以在較寬pH范圍（4.5-9.5）和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割融合蛋白，并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。本品不含標(biāo)簽，由于具有極高酶切活性，酶切反應(yīng)使用量少，不影響下游蛋白應(yīng)用，可不考慮除去。產(chǎn)品信息規(guī)格100U/200U/500U/1000U/5000U產(chǎn)品性質(zhì)來(lái)源（Source）大腸桿菌表達(dá)分子量（MolecularWeight）理論值25.85kDa外觀（Appearance）澄清、無(wú)色至淡黃色液體酶濃度（EnzymeConcentration）≥5U/uL活性定義（ActivityDefinition）一個(gè)活性單位定義為25°C，12-16h，腸激酶用于重組抗體和其他蛋白質(zhì)的質(zhì)量檢測(cè)，確保其正確折疊和功能。Recombinant Human MSLN/Mesothelin Protein,His-Avi Tag

泛素蛋白（Ubiquitin，簡(jiǎn)稱Ub）是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的小分子蛋白，具有高度保守性。Recombinant Cynomolgus IL-1R3/IL-1 RAcP Protein,His Tag

N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義（UnitDefinition）1個(gè)酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中，37℃條件下1小時(shí)從10μg變性RNaseB中除去超過(guò)95%的碳水化合物所需要的酶量。儲(chǔ)存條件-15~-25℃保存，有效期1年。使用說(shuō)明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1）在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白（1-20μg），至終體積10μL；2）100℃溫度下煮沸10min使其變性，冰上冷卻，離心10秒；3）加入2μL的Buffer2、2μL的10％NP-40、6μL去離子水，總反應(yīng)體積20μL；4）加入0.2~0.5μL的PNGase，輕輕混勻。在37℃孵育1-3h。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1）在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白（1-20μg）至體積為20μL。2）加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3）37°C孵育4-24h。注意：在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化，在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。Recombinant Cynomolgus IL-1R3/IL-1 RAcP Protein,His Tag