Recombinant Cynomolgus CDH3/Cadherin 3 Protein

重組酶是一類能夠促進(jìn)DNA分子之間同源或非同源序列的重組的酶。它們?cè)诜肿由飳W(xué)、遺傳工程和細(xì)胞生物學(xué)中扮演著重要角色。重組酶的作用機(jī)制通常涉及識(shí)別特定的DNA序列，催化DNA鏈的斷裂和重新連接，從而實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重組。重組酶的主要類型和功能包括：1.限制性內(nèi)切酶**（RestrictionEnzymes）：這些酶可以識(shí)別特定的DNA序列并在這些序列處切割DNA鏈。它們是基因工程中常用的工具，用于DNA片段的精確切割和克隆。2.連接酶（Ligases）：連接酶可以將兩個(gè)DNA片段連接在一起，形成穩(wěn)定的DNA分子。在DNA克隆和修復(fù)過(guò)程中，連接酶用于封閉切割位點(diǎn)產(chǎn)生的缺口。3.整合酶（Integrases）：整合酶能夠?qū)⒁欢蜠NA序列插入到宿主基因組的特定位置。它們?cè)诨蚝瓦z傳工程中具有應(yīng)用。4.轉(zhuǎn)座酶（Transposase）：轉(zhuǎn)座酶可以催化DNA片段從一個(gè)位置移動(dòng)到另一個(gè)位置，這種機(jī)制在基因組中存在，并且在遺傳多樣性和進(jìn)化中起著作用。5.**重組酶**（Recombinases）：如RecA蛋白和Rad51蛋白，它們?cè)谕粗亟M中發(fā)揮作用，促進(jìn)DNA雙鏈斷裂的修復(fù)和遺傳物質(zhì)的重組。6.DNA聚合酶：這類酶在DNA復(fù)制和修復(fù)中添加新的核苷酸，以現(xiàn)有DNA鏈為模板合成新的DNA鏈。

5'DNA腺苷酰化試劑盒是一種用于將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷?；揎椀膶?shí)驗(yàn)工具，其主要應(yīng)用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測(cè)序建庫(kù)或PCR檢測(cè)等時(shí)，在3'端添加的接頭的制備。以下是5'DNA腺苷酰化試劑盒的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和使用方法：1.**高效轉(zhuǎn)化**：該試劑盒能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉(zhuǎn)化成腺苷酰化DNA(AppDNA)，從而提高產(chǎn)量并避免膠回收提純步驟。2.**操作簡(jiǎn)便**：?jiǎn)尾椒磻?yīng)即可完成腺苷?；瑹o(wú)需復(fù)雜的操作或額外的純化步驟。3.**高溫反應(yīng)**：在65℃的高溫下進(jìn)行反應(yīng)，這有助于避免DNA或RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)腺苷?；磻?yīng)的干擾。4.**適用性廣**：適用于pmol級(jí)別至μmol級(jí)別的底物量，可以方便地根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要放大反應(yīng)體系。5.**組成成分**：試劑盒通常包含腺苷?；?Adenylase)、ATP和所需的緩沖液，以及用于啟動(dòng)反應(yīng)的5'-磷酸化的單鏈DNA。6.**保存條件**：一般建議在-20℃保存，有效期至少一年，長(zhǎng)期儲(chǔ)存建議在-70℃。7.**注意事項(xiàng)**：底物單鏈DNA或RNA的5'端磷酸化是必須的，而3'端可以進(jìn)行氨基化等封閉，也可以不封閉。反應(yīng)完成后推薦在85℃孵育5分鐘以失活A(yù)denylase，防止去腺苷?；F(xiàn)象。Recombinant Human ULBP-1 Protein,His-Avi TagCas9 NLS與CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的gRNA兼容，可以進(jìn)行位點(diǎn)特異性的DNA切割 。

5'DNA腺苷酰化試劑盒通過(guò)酶學(xué)方法高效地將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷酰化，通常轉(zhuǎn)化效率可達(dá)95%以上。以下是實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵步驟和特點(diǎn)：1.**單步反應(yīng)**：與傳統(tǒng)化學(xué)方法相比，該試劑盒可以在一個(gè)簡(jiǎn)單的步驟中完成5'端磷酸化修飾的單鏈DNA或RNA的腺苷?；揎棧瑹o(wú)需多步驟操作或純化。2.**高效率**：試劑盒通常能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉(zhuǎn)化成腺苷酰化DNA(AppDNA)，從而提高產(chǎn)量并避免膠回收提純步驟。3.**高溫孵育**：在65℃的高溫下進(jìn)行反應(yīng)，有助于避免DNA或RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)腺苷酰化反應(yīng)的干擾。4.**酶的來(lái)源**：試劑盒中的腺苷?；?Adenylase)通常來(lái)源于嗜熱古細(xì)菌，在大腸桿菌中表達(dá)獲得，保證反應(yīng)的高效性。5.**操作簡(jiǎn)便**：使用MthRNA連接酶、ATP和5'-磷酸化的單鏈DNA進(jìn)行反應(yīng)，操作簡(jiǎn)單，且腺苷化產(chǎn)物通常不需要進(jìn)行電泳切膠回收，可以直接通過(guò)乙醇沉淀進(jìn)行進(jìn)一步濃縮后用于后續(xù)的連接反應(yīng)。6.**失活酶**：反應(yīng)完成后推薦在85℃孵育5分鐘以失活A(yù)denylase，防止去腺苷?；F(xiàn)象，確保腺苷?；嚷什幌陆?。

核酸（DNA和RNA）的可視化是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一項(xiàng)基本技術(shù)，用于檢測(cè)和分析核酸的存在、大小、數(shù)量和純度。以下是幾種常用的核酸可視化方法：1.**紫外線（UV）檢測(cè)**：-利用核酸分子對(duì)UV光的吸收特性，特別是在260nm波長(zhǎng)下的吸收峰。-常用的UV檢測(cè)方法包括凝膠電泳后的凝膠成像系統(tǒng)，可以觀察到凝膠中DNA或RNA的條帶。2.**熒光染料染色**：-使用熒光染料，如溴化乙錠（EthidiumBromide,EB）或SYBRGreen，這些染料可以與核酸結(jié)合并在特定波長(zhǎng)的光照射下發(fā)出熒光。-EB常用于凝膠電泳后的DNA可視化，而SYBRGreen可用于實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）中DNA的檢測(cè)。3.**凝膠電泳**：-通過(guò)將核酸樣品加載到凝膠中，利用電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)核酸分子按大小分離，然后通過(guò)上述的UV或熒光染料進(jìn)行可視化。4.**紫外交聯(lián)**：-某些熒光染料，如BODIPY或Cy5，可以通過(guò)紫外交聯(lián)直接結(jié)合到核酸上，提供更高的靈敏度和特異性。5.**銀染**：-一種比EB染色更靈敏的染色方法，通過(guò)銀離子與核酸的結(jié)合，然后還原成金屬銀，形成可見(jiàn)的黑色或棕色條帶。6.**化學(xué)發(fā)光檢測(cè)**：-使用特定的化學(xué)發(fā)光底物，如熒光素或魯米諾，與核酸結(jié)合后，在氧化過(guò)程中產(chǎn)生光信號(hào)。使用體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)合成gRNA，確保gRNA的質(zhì)量和純度，這對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功至關(guān)重要 。

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是通過(guò)將ProteinA與Tn5轉(zhuǎn)座酶進(jìn)行融合來(lái)構(gòu)建的。ProteinA是一種來(lái)源于金黃色葡萄球菌的蛋白質(zhì)，它具有高親和力結(jié)合大多數(shù)哺乳動(dòng)物IgG抗體的Fc片段的能力。Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種能夠識(shí)別特定DNA序列并在基因組上進(jìn)行“剪切-粘貼”或“復(fù)制-粘貼”的酶。融合ProteinA的目的是為了在實(shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)對(duì)特定蛋白質(zhì)的靶向。下面是pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶融合的一般步驟：1.**基因克隆**：首先，將Tn5轉(zhuǎn)座酶的基因和ProteinA的基因克隆到一個(gè)表達(dá)載體中。這通常涉及到分子克隆技術(shù)，如PCR擴(kuò)增、限制性內(nèi)切酶消化和連接酶連接。2.**融合蛋白設(shè)計(jì)**：設(shè)計(jì)一個(gè)融合蛋白，其中ProteinA的基因序列和Tn5轉(zhuǎn)座酶的基因序列通過(guò)一個(gè)短的連接肽（LinkerPeptide）相連。這個(gè)連接肽通常包含幾個(gè)氨基酸殘基，以確保兩個(gè)蛋白部分在融合后仍能保持各自的構(gòu)象和功能。3.**表達(dá)載體構(gòu)建**：將融合基因插入到適合的表達(dá)載體中，這個(gè)載體應(yīng)該包含適當(dāng)?shù)膯?dòng)子、標(biāo)記基因（如抗性基因）和終止子，以確保融合蛋白在宿主細(xì)胞中得到高效表達(dá)。4.**宿主細(xì)胞表達(dá)**：將構(gòu)建好的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞（如大腸桿菌）中，通過(guò)誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白。在基因編輯中，Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或編輯工具的克隆，減少克隆過(guò)程中的非目標(biāo)突變。Endo S糖苷內(nèi)切酶S

將合成的gRNA與Cas9 NLS蛋白混合，形成復(fù)合物。由于Cas9 NLS蛋白兩端都有NLS，有助于復(fù)合物快速進(jìn)入細(xì)胞核。Recombinant Cynomolgus CDH3/Cadherin 3 Protein,His Tag

磁珠，也稱為磁性微球，是一種具有磁性內(nèi)核的微粒，表面通常包覆有一層特定材料，如聚合物、硅酸鹽或金屬。在生物醫(yī)學(xué)研究和診斷領(lǐng)域，磁珠因其獨(dú)特的物理和化學(xué)特性而被廣泛應(yīng)用。以下是磁珠的一些特異性：1.**磁性內(nèi)核**：-磁珠的內(nèi)核通常由鐵氧化物等磁性材料構(gòu)成，使其在外部磁場(chǎng)作用下能夠快速聚集或分散。2.**表面修飾**：-磁珠的表面可以進(jìn)行化學(xué)修飾，如包覆聚合物、硅酸鹽或金屬等，以適應(yīng)不同的應(yīng)用需求。3.**特異性結(jié)合**：-磁珠表面可以修飾有特定的配體或抗體，使其能夠特異性地結(jié)合目標(biāo)分子，如蛋白質(zhì)、核酸或細(xì)胞等。4.**生物相容性**：-許多磁珠具有良好的生物相容性，可以用于活細(xì)胞的分離和分析，而不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成損傷。5.**穩(wěn)定性**：-磁珠在不同的化學(xué)和物理?xiàng)l件下表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性，適用于各種實(shí)驗(yàn)環(huán)境。6.**易于操作**：-利用簡(jiǎn)單的磁鐵或磁分離裝置，可以快速實(shí)現(xiàn)磁珠與溶液的分離，操作簡(jiǎn)便。7.**多功能性**：-磁珠可以用于多種生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用，包括但不限于核酸提取、蛋白質(zhì)純化、細(xì)胞分離、免疫檢測(cè)、藥物篩選等。Recombinant Cynomolgus CDH3/Cadherin 3 Protein,His Tag