Recombinant Human LRIG1 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-08-09

5'DNA腺苷?;噭┖械膯尾椒磻且环N高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據(jù)試劑盒說明書,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA連接酶(或其他腺苷?;福?、ATP和相應的緩沖液按比例混合。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉(zhuǎn)移到DNA的5'端。3.**酶失活**:-反應完成后,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷?;?,這一步是為了防止后續(xù)的去腺苷酰化現(xiàn)象,確保反應的穩(wěn)定性。4.**產(chǎn)物收集**:-由于轉(zhuǎn)化效率高,通常不需要進行凝膠純化步驟??梢酝ㄟ^乙醇沉淀等方法收集腺苷?;蟮腄NA產(chǎn)物。5.**產(chǎn)物應用**:-收集的腺苷?;疍NA可以直接用于后續(xù)的克隆、測序、連接或其他分子生物學實驗。6.**注意事項**:-確保所有操作在無RNA酶和無DNA酶的環(huán)境中進行,以避免污染。-使用時需注意反應體系的準確性,確保底物、酶和ATP的比例適當。單步反應的優(yōu)勢在于簡化了操作流程,減少了樣品處理的復雜性,并且由于高轉(zhuǎn)化效率,避免了耗時的純化步驟,從而節(jié)省了時間和成本。利用His標簽通過親和層析從細胞裂解物中純化目標蛋白,然后可能通過離子交換層析、等方法進一步提純。Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag

Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag,標準物質(zhì)

DNA瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的分子生物學技術(shù),用于分離、鑒定和定量DNA片段。以下是關(guān)于DNA瓊脂糖凝膠電泳的一些關(guān)鍵點:1.**原理**:-利用瓊脂糖凝膠作為介質(zhì),DNA片段在電場作用下根據(jù)其大小和電荷差異進行分離。較小的DNA片段遷移速度快,而較大的片段遷移速度慢。2.**瓊脂糖**:-一種由瓊脂糖粉末和緩沖液(如TAE或TBE)混合制成的凝膠。瓊脂糖濃度通常在0.7%到2%之間,濃度越高,分辨率越高,但凝膠孔隙越小,遷移速度越慢。3.**樣品準備**:-DNA樣品通常需要在加載前進行適當?shù)奶幚恚缂兓?、稀釋,有時還需添加樣品緩沖液以保證樣品在電泳過程中的穩(wěn)定性。4.**加載樣品**:-使用微量移液管將樣品和加載緩沖液(通常含有追蹤染料,如溴酚藍)混合后,小心地加載到凝膠孔中。5.**電泳**:-將凝膠置于電泳槽中,連接電源,施加恒定電壓進行電泳。電壓和時間根據(jù)凝膠濃度和所需分辨率進行調(diào)整。6.**染色**:-電泳完成后,為了可視化DNA條帶,通常使用熒光染料如EB(溴化乙錠)或SYBRGreen進行染色。染色后的凝膠在紫外光下觀察,DNA條帶會發(fā)出熒光。7.**分析**:-通過比較DNA條帶的位置和已知大小的DNA標準品(DNAladder),可以估計DNA片段的大小。

RNA/DNA/蛋白抽提試劑盒牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I的反應溫度為37°C。在這個溫度下,酶的活性高,能夠有效地進行DNA的切割和連接。

Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag,標準物質(zhì)

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過特殊改造的融合蛋白,由ProteinA和高活性的Tn5轉(zhuǎn)座酶組成,具有以下主要應用:1.**高通量測序建庫**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶可以用于快速構(gòu)建用于高通量測序的DNA文庫,通過其轉(zhuǎn)座酶活性實現(xiàn)DNA片段化,同時加上測序接頭,簡化了傳統(tǒng)DNA測序建庫的多步過程。2.**CUT&Tag技術(shù)**:這是一種新興的蛋白質(zhì)與DNA相互作用研究方法,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶利用ProteinA與特定抗體結(jié)合,將轉(zhuǎn)座酶帶到目標蛋白附近進行DNA切割和標簽添加,實現(xiàn)對蛋白質(zhì)結(jié)合位點的高通量測序分析。CUT&Tag技術(shù)具有高特異性、低背景噪音、高靈敏度、良好重復性等優(yōu)點,適用于表觀遺傳學、干細胞等領(lǐng)域的研究。3.**ATAC-seq**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶也可用于ATAC-seq實驗,這是一種研究染色質(zhì)可及性的方法,通過轉(zhuǎn)座酶在沒有核酸酶消化的情況下切割染色質(zhì)DNA,然后在切割位點加上測序接頭,進行后續(xù)的測序分析。4.**轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫**:有研究開發(fā)了基于Tn5轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫方法,例如SHERRY方法,它利用Tn5轉(zhuǎn)座酶直接作用于RNA/DNA雜交鏈,簡化了建庫過程,適用于單細胞轉(zhuǎn)錄組測序,提高了樣本的利用率和測序速度。

SgMagBeads是一種磁性納米粒子,通常用于生物樣品的提取和純化過程,包括核酸(DNA或RNA)的提取。在磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒中,SgMagBeads或類似的磁珠產(chǎn)品作為組分之一,發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。以下是SgMagBeads與磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒之間的聯(lián)系:1.**純化介質(zhì)**:-SgMagBeads作為磁珠法質(zhì)粒抽提試劑盒中的一個關(guān)鍵組分,充當核酸純化介質(zhì)的角色。2.**特異性吸附**:-在質(zhì)粒DNA的提取過程中,SgMagBeads能夠特異性地吸附裂解后的質(zhì)粒DNA,而其他雜質(zhì)如蛋白質(zhì)、RNA等則不被吸附。3.**快速分離**:-利用外部磁場,SgMagBeads可以迅速與溶液分離,從而實現(xiàn)快速的樣品純化。4.**洗滌和去除雜質(zhì)**:-在吸附了質(zhì)粒DNA后,SgMagBeads可以通過洗滌步驟去除吸附在其表面的雜質(zhì),提高DNA的純度。5.**洗脫**:-在洗滌去除雜質(zhì)后,SgMagBeads上的質(zhì)粒DNA可以通過適當?shù)南疵撘合疵撓聛?,得到高純度的質(zhì)粒DNA樣品。6.**操作簡便性**:-SgMagBeads的使用簡化了質(zhì)粒DNA的提取過程,減少了傳統(tǒng)方法中需要的離心步驟,使得操作更加簡便快捷。

SpCas9-NLS的應用范圍廣泛,可用于細胞內(nèi)的CRISPR/Cas9系統(tǒng)介導的基因編輯。

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dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學試劑,通常以100mM的濃度提供。這種溶液主要用于支持DNA的合成過程,如聚合酶鏈反應(PCR)、DNA測序、填入反應、切口平移、cDNA合成和TdT加尾反應等。dATP的化學結(jié)構(gòu)是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,它是DNA聚合酶在DNA復制過程中用來合成DNA鏈的原料之一。在Sanger測序中,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,后者是dATP的一種衍生物,缺少3'-OH基團,用于鏈終止反應。dATP溶液應儲存在-20°C的條件下以保持其穩(wěn)定性和活性,有效期通常為兩年。在生產(chǎn)過程中,dATP通常按照ISO9001標準進行,并在D級清潔室中進行以確保高質(zhì)量和純度。HPLC確認的純度通常大于99%。dATP溶液不含qPCR、PCR、逆轉(zhuǎn)錄抑制劑,也不含DNase、RNase以及人類和大腸桿菌DNA,以避免實驗過程中的污染。FnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA(dsDNA)靶標,其PAM序列為5'-TTN-3',與Cas9的PAM序列不同。Kemptide (Phospho-Ser5)

與其他Cas12蛋白相比,F(xiàn)nCas12a蛋白的分子量較小,大約在400-700個氨基酸之間。Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag

T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環(huán)節(jié),確保了酶的穩(wěn)定性和活性。以下是根據(jù)搜索結(jié)果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,可以保持3年的有效期。-某些產(chǎn)品說明中提到,該制品不含甘油,可用于建立凍干體系,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,因為這可能會影響酶的活性。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質(zhì)粒載體中。-然后將這個質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細胞中,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,這些步驟可能包括細胞裂解、離心、層析等技術(shù)。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,以避免反復凍融。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,而是促進DNA鏈的重組。-本產(chǎn)品用于科研用途,不應用于臨床診斷。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術(shù),如重組酶聚合酶擴增(RPA),這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術(shù)。通過遵循這些保存和純化指南,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag