Recombinant Cynomolgus AGER Protein

5'DNA腺苷酰化試劑盒的單步反應是一種高效的酶促反應，用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸（AMP）基團。這個過程通常涉及以下步驟：1.**準備反應混合物**：-根據(jù)試劑盒說明書，將所需的5'磷酸化的單鏈DNA（ssDNA或pDNA）、MthRNA連接酶（或其他腺苷?；福TP和相應的緩沖液按比例混合。2.**孵育反應**：-將混合好的反應體系在指定的溫度（通常是65℃）下孵育一定的時間，以允許酶將ATP中的AMP部分轉(zhuǎn)移到DNA的5'端。3.**酶失活**：-反應完成后，通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷?；?，這一步是為了防止后續(xù)的去腺苷?；F(xiàn)象，確保反應的穩(wěn)定性。4.**產(chǎn)物收集**：-由于轉(zhuǎn)化效率高，通常不需要進行凝膠純化步驟。可以通過乙醇沉淀等方法收集腺苷?；蟮腄NA產(chǎn)物。5.**產(chǎn)物應用**：-收集的腺苷?；疍NA可以直接用于后續(xù)的克隆、測序、連接或其他分子生物學實驗。6.**注意事項**：-確保所有操作在無RNA酶和無DNA酶的環(huán)境中進行，以避免污染。-使用時需注意反應體系的準確性，確保底物、酶和ATP的比例適當。單步反應的優(yōu)勢在于簡化了操作流程，減少了樣品處理的復雜性，并且由于高轉(zhuǎn)化效率，避免了耗時的純化步驟，從而節(jié)省了時間和成本。將合成的gRNA與Cas9 NLS蛋白混合，形成復合物。由于Cas9 NLS蛋白兩端都有NLS，有助于復合物快速進入細胞核。Recombinant Cynomolgus AGER Protein,His Tag

T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶，它是RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復和復制叉重新啟動的過程中起到重要作用。T4UvsX重組酶可以通過與其他DNA結(jié)合蛋白或輔助因子一起與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物，并通過尋找與靶標DNA的互補區(qū)域進行雜交，以完成鏈置換反應。此外，T4UvsX重組酶在生產(chǎn)時由大腸桿菌表達和純化。T4UvsX重組酶的產(chǎn)生過程涉及到基因工程和蛋白質(zhì)表達的常規(guī)技術(shù)。首先，T4噬菌體的基因序列被識別并克隆到適合的表達載體中，然后這個載體被轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細胞中。在宿主細胞內(nèi)，T4UvsX基因被轉(zhuǎn)錄和翻譯，產(chǎn)生重組酶蛋白。隨后，通過一系列步驟包括細胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)表達、細胞裂解、蛋白質(zhì)純化等，獲得所需的T4UvsX重組酶。這一過程通常在生物技術(shù)實驗室中進行，并且需要精確的分子生物學操作和蛋白質(zhì)工程知識。

5'DNA腺苷酰化試劑盒的適用性非常廣，主要包括以下幾個方面：1.**miRNA克隆**：該試劑盒可用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆時，3'端添加接頭的制備。2.**高通量測序建庫**：在高通量測序中，該試劑盒可用于制備5'端腺苷?；揎椀膯捂淒NA，這些DNA可以用于測序文庫的構(gòu)建。3.**PCR檢測**：在PCR檢測中，該試劑盒可以幫助制備具有特定5'端修飾的DNA片段，以適應某些PCR應用的需求。4.**單鏈DNA或RNA的5'端腺苷酰化**：試劑盒可以催化5'端磷酸化的單鏈DNA或單鏈RNA轉(zhuǎn)換成5'端腺苷?；疍NA或RNA，無論3'端是否進行了氨基化等封閉。5.**環(huán)狀DNA生成**：在不存在ATP的條件下，5'DNA/RNAAdenylase可以催化5'端磷酸化的單鏈DNA生成環(huán)狀DNA。6.**RNALigation**：該試劑盒包含的MthRNA連接酶，可以用于RNA的連接反應，尤其是在需要5'端腺苷酰化DNA作為連接接頭時。7.**科研實驗**：所有提到的產(chǎn)品信息都明確指出，5'DNA腺苷?；噭┖杏糜诳蒲袑嶒灒瑖澜糜谂R床醫(yī)療及其他非科研用途。

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)通常提供幾種不同類型的引物用于啟動cDNA的合成。這些引物包括：1.**Oligo(dT)引物**：這種引物通常與mRNA的poly(A)尾部互補配對，適用于從真核生物的mRNA中合成cDNA。它能夠產(chǎn)生大量全長cDNA，特別是當模板來源于真核生物時。2.**隨機六聚體引物（RandomHexamers）**：這些引物是一組隨機的六核苷酸序列，可以與RNA模板的任何部分結(jié)合，從而啟動cDNA的合成。它們適用于mRNA、rRNA、tRNA和長非編碼RNA等多種類型的RNA模板。3.**基因特異性引物（GeneSpecificPrimers）**：這些引物是針對特定基因序列設(shè)計的，可以用于從總RNA或mRNA中合成特定基因的cDNA。它們通常用于當需要選擇性地擴增特定基因或基因家族時。在選擇引物時，需要考慮RNA模板的來源、RNA的質(zhì)量和特性以及后續(xù)實驗的需求。例如，如果RNA模板具有復雜的二級結(jié)構(gòu)或較高的GC含量，可能需要使用隨機引物以提高cDNA合成的效率。另外，如果后續(xù)實驗是qPCR，可以將Oligo(dT)與隨機引物混合使用，以提高qPCR結(jié)果的真實性和重復性。FnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA（dsDNA）靶標，其PAM序列為5'-TTN-3'，與Cas9的PAM序列不同。

核酸（DNA和RNA）的可視化是分子生物學實驗中的一項基本技術(shù)，用于檢測和分析核酸的存在、大小、數(shù)量和純度。以下是幾種常用的核酸可視化方法：1.**紫外線（UV）檢測**：-利用核酸分子對UV光的吸收特性，特別是在260nm波長下的吸收峰。-常用的UV檢測方法包括凝膠電泳后的凝膠成像系統(tǒng)，可以觀察到凝膠中DNA或RNA的條帶。2.**熒光染料染色**：-使用熒光染料，如溴化乙錠（EthidiumBromide,EB）或SYBRGreen，這些染料可以與核酸結(jié)合并在特定波長的光照射下發(fā)出熒光。-EB常用于凝膠電泳后的DNA可視化，而SYBRGreen可用于實時定量PCR（qPCR）中DNA的檢測。3.**凝膠電泳**：-通過將核酸樣品加載到凝膠中，利用電場驅(qū)動核酸分子按大小分離，然后通過上述的UV或熒光染料進行可視化。4.**紫外交聯(lián)**：-某些熒光染料，如BODIPY或Cy5，可以通過紫外交聯(lián)直接結(jié)合到核酸上，提供更高的靈敏度和特異性。5.**銀染**：-一種比EB染色更靈敏的染色方法，通過銀離子與核酸的結(jié)合，然后還原成金屬銀，形成可見的黑色或棕色條帶。6.**化學發(fā)光檢測**：-使用特定的化學發(fā)光底物，如熒光素或魯米諾，與核酸結(jié)合后，在氧化過程中產(chǎn)生光信號。將含有重組質(zhì)粒的表達載體轉(zhuǎn)化到宿主細胞中，通常是大腸桿菌或其他合適的細胞系。Recombinant Human B7-H3(4Ig)/B7-H3b (hFc Tag)

在MAGE-A3基因序列的C末端添加His標簽和Avi標簽序列。His標簽有助于通過金屬螯合親和層析進行蛋白純化。Recombinant Cynomolgus AGER Protein,His Tag

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶，與ProteinA融合，形成一種新型融合酶，應用于CUT&Tag技術(shù)中，用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點：1.**高活性**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式，體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結(jié)構(gòu)域為ProteinA的一部分，可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用，特別是與大多數(shù)哺乳動物的IgG結(jié)合。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**：C端結(jié)構(gòu)域為Tn5轉(zhuǎn)座酶，能夠特異性識別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd)，并在形成轉(zhuǎn)座復合體后隨機插入靶DNA中。4.**應用廣**：適用于CUT&Tag技術(shù)、高通量測序建庫、ATAC-seq等，特別適用于早期胚胎發(fā)育、干細胞、以及表觀遺傳學等研究領(lǐng)域。5.**操作簡便**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡化了實驗步驟，可以在一步反應中實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接，從細胞到二代測序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時。6.**低細胞投入量**：CUT&Tag技術(shù)允許從低至60個細胞的樣本中獲得結(jié)果，甚至可以應用于單細胞水平的研究。7.**高質(zhì)量結(jié)果**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化，同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低。Recombinant Cynomolgus AGER Protein,His Tag