Recombinant Human Notch 1 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-09-15

NLS-Cas9-EGFPNuclease是一種融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信號(NLS)和EGFP(綠色熒光蛋白)組成。這種融合蛋白的特點和科研應(yīng)用如下:**特點:**1.**無DNA污染**:系統(tǒng)不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的風(fēng)險。2.**高切割效率**:NLS確保Cas9蛋白能夠高效地進(jìn)入細(xì)胞核,從而提高DNA切割效率。3.**低脫靶效應(yīng)**:由于Cas9核酸酶的瞬時表達(dá),減少了在非目標(biāo)位點切割的可能性。4.**節(jié)省時間**:與需要轉(zhuǎn)錄和翻譯的mRNA或質(zhì)粒系統(tǒng)相比,NLS-Cas9-EGFPNuclease可以直接進(jìn)入細(xì)胞核,無需等待轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。5.**EGFP標(biāo)簽**:EGFP作為報告基因,可用于追蹤或分選轉(zhuǎn)染細(xì)胞,便于通過熒光激起細(xì)胞分選(FACS)富集所需基因組編輯的細(xì)胞群,減少單細(xì)胞克隆和基因分型的勞動和成本。**科研應(yīng)用:**1.**體外DNA切割篩選**:可以用于篩選高效和特異性靶向的gRNA,通過體外DNA切割實驗來驗證gRNA的效率和特異性。2.**體內(nèi)基因編輯**:與特定的gRNA結(jié)合后,可以通過電穿孔或注射的方式進(jìn)行體內(nèi)基因編輯。3.**細(xì)胞追蹤和分選**:利用EGFP熒光標(biāo)記,可以追蹤轉(zhuǎn)染細(xì)胞并進(jìn)行分選,這對于研究基因編輯后的細(xì)胞群體特別有用。

利用牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的連接原理,可以在無需DNA連接酶的情況下,快速高效地連接DNA片段,實現(xiàn)克隆。Recombinant Human Notch 1 Protein,His-Avi Tag

Recombinant Human Notch 1 Protein,His-Avi Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

EndoS糖苷內(nèi)切酶S(Endo-S)的特異性主要體現(xiàn)在其對糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)的識別和切割能力上。以下是Endo-S的一些關(guān)鍵特異性特點:1.**糖鏈識別**:Endo-S能夠特異性識別糖鏈結(jié)構(gòu)中的某些特定序列或結(jié)構(gòu),尤其是N-連接糖鏈的殼二糖重要結(jié)構(gòu)。2.**切割位點**:Endo-S在糖鏈的特定位點進(jìn)行切割,通常是在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之間的β-N-糖苷鍵。3.**不影響抗原性**:Endo-S的切割位點選擇性高,不會破壞糖蛋白的抗原決定簇,因此在某些應(yīng)用中可以保持糖蛋白的免疫原性。4.**應(yīng)用多樣性**:Endo-S可以用于多種糖蛋白的去糖基化,包括抗體和其他具有N-連接糖鏈的蛋白質(zhì)。5.**研究和藥物開發(fā)**:在研究糖蛋白的結(jié)構(gòu)和功能時,Endo-S提供了一種工具來研究糖鏈對蛋白質(zhì)性質(zhì)的影響。此外,在藥物開發(fā)中,Endo-S用于制備糖鏈定點ADC化合物,通過精確控制藥物與抗體的連接點,提高藥物的療效和減少副作用。6.**兼容性**:Endo-S對多樣化的LacNAc修飾顯示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基團(tuán)、熒光基團(tuán)等衍生物作為底物,實現(xiàn)抗體糖基化修飾。7.**高效性**:Endo-S在催化糖鏈轉(zhuǎn)移或切割反應(yīng)中表現(xiàn)出高效性,有助于實現(xiàn)高效獲得功能修飾的糖工程抗體。Recombinant Human Notch 1 Protein,His-Avi Tag在目標(biāo)蛋白的C末端添加His標(biāo)簽和Avi標(biāo)簽。有助于通過親和層析進(jìn)行蛋白純化,而Avi標(biāo)簽則可以用于生物素。

Recombinant Human Notch 1 Protein,His-Avi Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

重組人血清白蛋白(rHSA)在藥物載體應(yīng)用中提高藥物穩(wěn)定性和靶向性的機(jī)制主要包括以下幾點:1.**延長半衰期**:通過與rHSA融合,可以延長藥物分子在體內(nèi)的循環(huán)時間。例如,阿必魯肽(Tanzeum)是GLP-1與HSA的融合蛋白,其半衰期可延長至5天,每周給藥一次即可。2.**提高穩(wěn)定性**:rHSA作為載體,可以保護(hù)藥物分子不受體內(nèi)酶解和其他降解因素的破壞,從而提高藥物的穩(wěn)定性。例如,F(xiàn)GF21與HSA融合后,其體外穩(wěn)定性升,抗胰蛋白酶降解能力和高溫條件下的穩(wěn)定性增加。3.**改善藥代動力學(xué)**:rHSA融合蛋白能夠改善藥物的藥代動力學(xué)特性,如改變藥物的分布和代謝,減少腎臟的損失,從而提高藥物在體內(nèi)的濃度和療效。4.**增強(qiáng)靶向性**:rHSA可以通過其天然的生物學(xué)特性,如與特定受體的結(jié)合,增強(qiáng)藥物對特定組織或細(xì)胞的靶向性。例如,rHSA可以通過其與FcRn受體的結(jié)合,實現(xiàn)對瘤組織的靶向性。5.**降低免疫原性**:rHSA作為一種內(nèi)源性蛋白質(zhì),具有較低的免疫原性,可以減少藥物引起的免疫反應(yīng),提高藥物的安全性和耐受性。

酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,具有以下特點:1.**高效性**:PNGaseF是去除幾乎所有N-連接寡糖從糖蛋白中有效的酶法方法。它能夠在幾分鐘內(nèi)快速且無偏倚地釋放所有的N-糖鏈,適合后續(xù)的色譜或質(zhì)譜分析。2.**重組酶**:該酶是重組的酰胺酶,能夠從高甘露糖、雜合和復(fù)雜寡糖中切割內(nèi)GlcNAc和天冬氨酸殘基之間的連接。3.**純度**:純度達(dá)到95%以上,通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進(jìn)行確定。4.**儲存穩(wěn)定性**:在含有50%甘油的儲存緩沖液中,好的活性和穩(wěn)定性可維持長達(dá)24個月。5.**使用條件**:可以在原生或變性條件下使用,對于變性條件下的去糖基化,建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用。6.**比活性**:具有高達(dá)100000U/mL的比活性。7.**His標(biāo)簽**:產(chǎn)品帶有His標(biāo)簽,常用于抗體及其相關(guān)蛋白的完全去糖基化。8.儲存條件:-25~-15℃保存,有效期1年。9.**無甘油版本**:還提供了無甘油版本的PNGaseF,這有助于在HPLC和質(zhì)譜分析中獲得結(jié)果。10.**酶活定義**:1個酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。這些特點使得酵母重組表達(dá)的PNGaseF成為研究和分析糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的重要工具。在gRNA的引導(dǎo)下,Cas9 NLS可以對特定DNA序列進(jìn)行剪切,適用于研究基因功能或進(jìn)行基因編輯 。

Recombinant Human Notch 1 Protein,His-Avi Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(RecombinantEnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP)是一種用于生物科學(xué)研究的工具。以下是重組EGFP的一些特點和應(yīng)用:1.**高熒光強(qiáng)度**:EGFP比野生型GFP具有更強(qiáng)的熒光,這使得它在成像和檢測時更為敏感和有效。2.**改進(jìn)的折疊效率**:EGFP在生理溫度(如37℃)下的折疊效率更高,這有助于在細(xì)胞內(nèi)快速形成成熟的熒光蛋白。3.**單一激發(fā)峰**:與野生型GFP相比,EGFP具有單一的激發(fā)峰,這簡化了成像條件的設(shè)置,并提高了信號的穩(wěn)定性。4.**適合多種生物系統(tǒng)**:EGFP可以用于多種生物系統(tǒng),包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動物細(xì)胞。5.**多功能性**:EGFP可以作為報告基因用于基因表達(dá)分析,也可以作為融合標(biāo)簽用于蛋白質(zhì)定位和動態(tài)研究。6.**非糖基化**:在大腸桿菌中表達(dá)的重組EGFP是非糖基化的,這有助于減少翻譯后修飾的復(fù)雜性。7.**純度高**:重組EGFP通常具有高純度,適合用于各種生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗。8.**穩(wěn)定性**:EGFP的熒光穩(wěn)定性好,適合長時間觀察和成像。9.**分子量**:重組EGFP的分子量約為26.9kDa,由239個氨基酸構(gòu)成。Taq DNA Polymerase 能夠在相對較高的溫度下保持穩(wěn)定,其適催化溫度在75-80°C。Recombinant Human FGFR1 alpha (IIIc) Protein,His-Avi Tag

Multiplex Probe qPCR Mix 是一種濃縮預(yù)混液,含有抗體技術(shù)修飾的熱啟動酶Hotstart Taq DNA聚合酶。Recombinant Human Notch 1 Protein,His-Avi Tag

高保真Cas9變體在實際應(yīng)用中的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下幾個方面:1.**降低脫靶效應(yīng)**:高保真Cas9變體通過減少與非目標(biāo)DNA序列的結(jié)合,從而降低了基因編輯過程中的脫靶風(fēng)險。這對于減少基因編輯可能帶來的非預(yù)期效果至關(guān)重要。2.**提高特異性**:通過工程化改造,如SpCas9-HF1、eSpCas9和HypaCas9等變體,通過在DNA相互作用位點引入突變,減少了對目標(biāo)DNA的非特異性識別和切割。3.**擴(kuò)展PAM序列兼容性**:一些高保真Cas9變體,如xCas93.7,能夠識別多種PAM序列,從而擴(kuò)展了可編輯基因組區(qū)域的范圍。4.**提高效果**:在臨床中,高保真Cas9變體可以減少由于脫靶效應(yīng)引起的潛在風(fēng)險,提高基因的安全性和有效性。然而,高保真Cas9變體也存在一些局限性:1.**編輯效率可能降低**:在提高特異性的同時,可能會一定的編輯效率。一些高保真變體可能在保持特異性的同時,編輯效率有所下降。2.**結(jié)構(gòu)和功能復(fù)雜性**:高保真Cas9變體的結(jié)構(gòu)改造可能增加其結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性,這可能對實際應(yīng)用中的穩(wěn)定性和可預(yù)測性帶來挑戰(zhàn)。3.**成本和可用性**:開發(fā)和生產(chǎn)高保真Cas9變體可能需要更多的研究和資源投入,這可能影響其在某些應(yīng)用中的成本效益。Recombinant Human Notch 1 Protein,His-Avi Tag