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One Step RT-qPCR SYBR Green Kit:有效、便捷的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種基于SYBR Green I染料的一步法實時熒光定量PCR試劑盒,為RNA模板的定量檢測而設(shè)計。該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中,簡化了實驗操作,降低了污染風(fēng)險,同時提高了檢測效率。產(chǎn)品特點操作簡便:RT和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,無需反復(fù)開蓋或移液,減少了操作步驟和污染風(fēng)險。高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的反應(yīng)體系和熱啟動Taq DNA聚合酶,確保高效的逆轉(zhuǎn)錄和特異的qPCR擴(kuò)增。防污染設(shè)計:部分產(chǎn)品包含dUTP/UDG防污染系統(tǒng),可有效消除PCR產(chǎn)物污染。適用范圍廣:適用于多種RNA模板,包括總RNA、mRNA和RNA病毒等,尤其適合微量目標(biāo)基因的檢測。兼容性強:適用于多種qPCR儀器,如ABI、Bio-Rad、Agilent等。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:快速定量檢測特定基因的表達(dá)水平。病毒檢測:適用于RNA病毒的定量檢測,如流感病毒、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測,尤其在臨床檢測和大規(guī)模樣本分析中表現(xiàn)出色。Taq PCR Master Mix (2×)優(yōu)化了反應(yīng)體系,能夠高效擴(kuò)增長達(dá)5 kb的DNA片段對于復(fù)雜模板也表現(xiàn)出良好的擴(kuò)增效果。Recombinant Cynomolgus B7-2/CD86 Protein,His Tag
Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) (5U/μl):高效去除尿嘧啶的分子生物學(xué)工具Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一種來源于大腸桿菌的重組酶,能夠高效催化DNA鏈中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖骨架之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對單鏈和雙鏈DNA均有效,但對RNA或短于6個堿基的DNA寡核苷酸無活性。產(chǎn)品特點UDG酶的主要特點是能夠在PCR反應(yīng)中有效防止產(chǎn)物污染。通過在PCR反應(yīng)中摻入dUTP替代dTTP,生成含有dU的DNA產(chǎn)物,UDG可以特異性降解這些含dU的DNA,從而避免PCR產(chǎn)物的交叉污染。此外,UDG酶在較寬的pH范圍內(nèi)具有活性,適pH為8.0,且不需要二價陽離子。應(yīng)用場景UDG酶廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR產(chǎn)物防污染:通過降解含dU的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。單核苷酸多態(tài)性檢測:用于檢測基因組中的單核苷酸變異?;蚓庉嬇c位點特異性突變:用于制備和處理含有dU的DNA模板。蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究:通過去除尿嘧啶,研究DNA修復(fù)機(jī)制。在PCR反應(yīng)中,UDG酶的推薦使用濃度為0.01U/μl,通常在反應(yīng)體系中加入適量的UDG Buffer以確保比較好活性。此外,UDG酶在RT-PCR中需謹(jǐn)慎使用,因為其可能消化新合成的cDNA。Recombinant Mouse TPBG/5T4 Protein,His TagUltra-Long Master Mix (2×)Without Dye是一種專為長片段PCR設(shè)計的預(yù)混液成分是一種經(jīng)過熱穩(wěn)定Taq DNA聚合酶。
一、產(chǎn)品特點(一)高靈敏度Probe qPCR Mix (2×) 采用了先進(jìn)的酶制劑配方,成分為經(jīng)過優(yōu)化的熱啟動Taq酶。這種酶在常溫下處于抑制狀態(tài),只有在高溫條件下才被激發(fā),從而有效避免了非特異性擴(kuò)增的發(fā)生。其靈敏度極高,能夠準(zhǔn)確檢測到低至單個拷貝的核酸靶標(biāo),即使在樣本中目標(biāo)基因含量極低的情況下,也能輕松實現(xiàn)定量。例如,在對稀有細(xì)胞類型中的特定基因表達(dá)進(jìn)行分析時,該試劑能夠快速且準(zhǔn)確地檢測到目標(biāo)基因的表達(dá)水平,為研究人員提供了可靠的實驗數(shù)據(jù)。(二)高特異性該qPCR Mix的特異性主要得益于其獨特的探針設(shè)計和優(yōu)化的反應(yīng)體系。它與熒光探針配合使用,通過探針與目標(biāo)核酸序列的特異性結(jié)合來實現(xiàn)信號的檢測。這種探針檢測方式具有極高的特異性,能夠有效區(qū)分單個堿基的差異,從而避免了非特異性產(chǎn)物的干擾。在復(fù)雜的基因組背景下,即使存在高度同源的序列,該試劑也能準(zhǔn)確地識別并擴(kuò)增目標(biāo)基因,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。例如,在對病毒核酸進(jìn)行檢測時,即使病毒基因與宿主基因存在部分序列相似性,該試劑仍能準(zhǔn)確地檢測到病毒核酸,為病原體的快速診斷提供有力支持。
Pfu DNA Polymerase:高保真PCR的選擇Pfu DNA Polymerase(Pfu酶)是一種源自嗜熱菌 Pyrococcus furiosus 的高保真DNA聚合酶,因其性能和廣泛的應(yīng)用而備受科研工作者青睞。產(chǎn)品特點Pfu DNA Polymerase具有高度的熱穩(wěn)定性和保真性。其分子量為90 kDa,具備5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,能夠在PCR擴(kuò)增過程中糾正錯誤摻入的堿基,降低錯誤率。與傳統(tǒng)的Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的保真性高出8倍以上,錯誤率為1.3×10??。此外,Pfu酶在95°C孵育1小時后仍能保持90%以上的活性。性能優(yōu)勢Pfu DNA Polymerase在擴(kuò)增效率和速度上也表現(xiàn)出色。其擴(kuò)增速度可達(dá)4 kb/min,是普通Pfu酶的8倍。這種高效的擴(kuò)增能力使其能夠快速、準(zhǔn)確地擴(kuò)增長片段DNA,可擴(kuò)增長度達(dá)10 kb。同時,Pfu酶對低濃度模板的檢測靈敏度極高,即使在1 pg的模板量下也能有效擴(kuò)增。Cas9 NLS與CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的gRNA兼容,可以進(jìn)行位點特異性的DNA切割 。
Hot-Start Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)過改良的Taq DNA聚合酶,專為提高PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度而設(shè)計。它通過結(jié)合一種溫度敏感的抑制劑(如核酸適配體或抗體)來實現(xiàn)熱啟動功能。在室溫下,抑制劑與酶結(jié)合,阻止Taq酶的活性,從而避免因引物錯配或二聚體形成導(dǎo)致的非特異性擴(kuò)增。當(dāng)反應(yīng)體系升溫至PCR循環(huán)條件時,抑制劑釋放,酶活性被啟動,確保反應(yīng)在高溫下特異性進(jìn)行。與普通Taq酶相比,Hot-Start Taq DNA Polymerase 的優(yōu)勢在于其提高了PCR的特異性和重復(fù)性,同時減少了因非特異性擴(kuò)增導(dǎo)致的背景信號。這種酶還支持在室溫下配制反應(yīng)體系,無需額外的高溫啟動步驟,簡化了實驗操作。此外,Hot-Start Taq DNA Polymerase 適用于多種復(fù)雜的PCR應(yīng)用場景,包括常規(guī)PCR、多重PCR、高GC含量模板擴(kuò)增以及甲基化分析等。例如,某些版本的Hot-Start Taq酶經(jīng)過優(yōu)化,能夠擴(kuò)增經(jīng)過亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA,這對于表觀遺傳學(xué)研究具有重要意義??傊琀ot-Start Taq DNA Polymerase 通過其獨特的熱啟動機(jī)制,為PCR反應(yīng)提供了更高的特異性和靈敏度,是分子生物學(xué)研究和診斷應(yīng)用中的理想選擇。Pfu DNA Polymerase在定點突變中的應(yīng)用:Pfu DNA Polymerase是定點突變實驗的酶,因其高保真性和穩(wěn)定性。Recombinant Mouse TPBG/5T4 Protein,His Tag
在目標(biāo)蛋白的C末端添加His標(biāo)簽和Avi標(biāo)簽。有助于通過親和層析進(jìn)行蛋白純化,而Avi標(biāo)簽則可以用于生物素。Recombinant Cynomolgus B7-2/CD86 Protein,His Tag
在分子生物學(xué)實驗中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實現(xiàn)高保真、高效擴(kuò)增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Phusion DNA聚合酶的保真性與優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個便捷、可靠的實驗平臺。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Phusion DNA聚合酶以其高保真性著稱,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的優(yōu)先工具。此外,Phusion酶的延伸速度可達(dá)15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,明顯提高了實驗效率。預(yù)混液的無染料配方為實驗提供了更大的靈活性。實驗人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,而無需擔(dān)心染料對結(jié)果的干擾。這種無染料設(shè)計特別適合需要進(jìn)一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M(jìn)行下游功能分析。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計進(jìn)一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Recombinant Cynomolgus B7-2/CD86 Protein,His Tag