上海漢遜酵母表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)

大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)在實際應(yīng)用中具有一系列優(yōu)勢和局限性：優(yōu)勢：1.高表達(dá)水平：大腸桿菌能夠?qū)崿F(xiàn)高水平的目標(biāo)蛋白表達(dá)，通常能夠達(dá)到目標(biāo)蛋白總細(xì)胞蛋白的10-50%左右。2.簡單易用：培養(yǎng)和操作相對簡單，不需要復(fù)雜的培養(yǎng)條件和設(shè)備。3.高純度蛋白：目標(biāo)蛋白通常以包涵體形式存在，通過簡單的離心和洗滌步驟，可以得到高純度的蛋白。4.經(jīng)濟(jì)實惠：培養(yǎng)成本相對較低，成本效益高。5.高生物活性：表達(dá)的蛋白通常具有較高的生物活性，適合功能研究和生物活性測試。局限性：1.蛋白質(zhì)折疊問題：作為原核細(xì)胞，大腸桿菌可能無法正確折疊某些復(fù)雜蛋白質(zhì)，導(dǎo)致表達(dá)產(chǎn)物不具功能性。2.內(nèi)毒的素產(chǎn)生：表達(dá)系統(tǒng)中細(xì)胞壁內(nèi)毒的素的產(chǎn)生可能導(dǎo)致細(xì)胞毒性，并對目標(biāo)蛋白的純化和功能造成困擾。3.限制于溶解態(tài)蛋白質(zhì)：主要適用于溶解態(tài)蛋白質(zhì)表達(dá)，對于聚集態(tài)或難溶性蛋白質(zhì)的表達(dá)可能存在困難。Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在突變研究中的作用 低錯誤率特性使其成為點(diǎn)突變、插入確保結(jié)果準(zhǔn)確性。上海漢遜酵母表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)

漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)是一種新型的酵母菌表達(dá)平臺，它具有高密度培養(yǎng)和高效表達(dá)外源蛋白的能力。在臨床前研究中，漢遜酵母被用于表達(dá)瘤病毒（HPV）病毒樣顆粒（VLPs），這為開發(fā)HPV疫苗提供了一種有希望的策略。HPVB19是一種高度傳染性的病毒，對免疫功能低下者和胎兒可能造成嚴(yán)重后果。目前，尚無針對HPVB19的批準(zhǔn)疫苗或抗病毒藥物，因此開發(fā)有效的疫苗顯得尤為重要。漢遜酵母表達(dá)的VLPs，特別是VP1與VP2共組裝的VLP(VP1/VP2VLP)，可能成為HPVB19疫苗開發(fā)的候選免疫原。在一項研究中，漢遜酵母成功表達(dá)了HPV68bL1蛋白，并形成了VLPs。這些VLPs在小鼠模型中顯示出良好的免疫原性，能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生較高滴度的中和抗體，并且對HPV68a型也表現(xiàn)出一定的交叉保護(hù)作用。這表明漢遜酵母表達(dá)的HPV68bVLPs可能作為多價HPV疫苗的組分，用于疫苗生產(chǎn)。漢遜酵母表達(dá)系統(tǒng)還提供了一整套從表達(dá)載體構(gòu)建到產(chǎn)業(yè)化發(fā)酵和蛋白純化的通用技術(shù)平臺，適合不同規(guī)模的企業(yè)使用。在HPV68bL1蛋白的VLPs研究中，通過高密度發(fā)酵和系列純化步驟，獲得了純度超過95%的VLPs，這些VLPs在形態(tài)上與天然病毒顆粒相似，并通過假病毒體外中和試驗證明了其免疫學(xué)效果。北京人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)在保存方面，DNA Marker I可在室溫下穩(wěn)定保存3個月，長期保存建議置于-20℃。

Fc融合蛋白技術(shù)通過將Fc片段（免疫球蛋白G的恒定區(qū)）融合到目標(biāo)蛋白上，可以帶來以下提高蛋白穩(wěn)定性的優(yōu)勢：1.提高溶解度：Fc片段通常具有較高的溶解性，能夠減少目標(biāo)蛋白的聚集，從而提高其在細(xì)胞內(nèi)的溶解度。2.延長半衰期：Fc片段具有較長的體內(nèi)半衰期，這一特性可以傳遞給融合蛋白，延長其在體內(nèi)的循環(huán)時間。3.增強(qiáng)穩(wěn)定性：Fc片段的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性有助于維持融合蛋白的構(gòu)象，減少變性和降解。4.免疫效應(yīng)：Fc片段可以與體內(nèi)多種免疫相關(guān)細(xì)胞和因子相互作用，如通過Fcγ受體介導(dǎo)的效應(yīng)，增強(qiáng)蛋白的免疫原性或免疫調(diào)節(jié)功能。5.易于純化：Fc片段可以利用蛋白A或蛋白G親和層析高效地從培養(yǎng)液中純化融合蛋白。6.改善藥代動力學(xué)特性：Fc片段的融合可以改善蛋白的藥代動力學(xué)特性，例如改變其在體內(nèi)的分布和清理速率。7.減少免疫原性：Fc片段有時可以掩蓋目標(biāo)蛋白的免疫原性表位，減少其在體內(nèi)的免疫反應(yīng)。8.促進(jìn)ADCC效應(yīng)：Fc片段可以介導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）效應(yīng)，增強(qiáng)對特定細(xì)胞的靶向作用。

DNA Marker III：高效、精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker III 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)，廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中，用于快速估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成，能夠為DNA分析提供清晰、準(zhǔn)確的分子量參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成：DNA Marker III 通常包含7-9條不同長度的DNA片段，覆蓋從100 bp到10,000 bp的范圍。具體片段長度可能因品牌而異，但常見的片段包括100 bp、200 bp、500 bp、1,000 bp、2,000 bp、5,000 bp和10,000 bp。即用型設(shè)計：預(yù)混了1×Loading Buffer，無需額外添加，直接上樣，節(jié)省時間和操作步驟。清晰的條帶：電泳圖像清晰，背景干凈，條帶亮度均勻，便于在紫外燈下觀察。穩(wěn)定性高：在室溫下可穩(wěn)定保存6個月，長期保存建議置于-20℃，避免反復(fù)凍融。使用方法樣量：建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬，可適當(dāng)增加樣量。電泳條件：推薦使用1.0%-2.0%的瓊脂糖凝膠，1×TAE或0.5×TBE緩沖液，電壓5-10 V/cm。染色與觀察：電泳結(jié)束后，使用溴化乙錠（EB）或其他DNA染料染色，在紫外燈下觀察。注意事項保存條件：建議低溫保存，避免反復(fù)凍融，以防止核酸酶污染導(dǎo)致條帶降解。瓊脂糖質(zhì)量：電泳時應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖，獲得比較好分離效果。TBE緩沖液因其穩(wěn)定的pH值和良好的導(dǎo)電性，能夠為DNA電泳提供理想的條件。

DNA Marker VII：精細(xì)助力分子生物學(xué)實驗在分子生物學(xué)研究中，DNA Marker VII是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)，主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由6條帶狀雙鏈DNA條帶組成，覆蓋300 bp到2500 bp的分子量范圍，具體條帶大小分別為300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。DNA Marker VII具有明顯的實驗優(yōu)勢。其中，1500 bp的條帶濃度為100 ng/5 μL，顯示為加亮帶，便于快速定位和半定量分析，而其他條帶濃度約為50 ng/5 μL。此外，該產(chǎn)品已預(yù)混1×loading buffer，可直接取2-5 μL進(jìn)行電泳，操作簡便，電泳圖像清晰。在實驗中，DNA Marker VII適用于多種瓊脂糖凝膠濃度，建議電泳條件為1.0%的凝膠濃度、5-7 cm的凝膠長度、4-10 V/cm的電壓，電泳時間約為20-25分鐘。通過EB染色或Goldview等染料進(jìn)行染色后，可在紫外燈下清晰觀察條帶。DNA Marker VII的保存條件為-20℃，有效期可達(dá)一年，短期頻繁使用可置于4℃保存。它不僅適用于DNA片段大小的確定，還可用于DNA含量的粗略定量，但不適用于精確定量?？傊?，DNA Marker VII憑借其清晰的條帶、便捷的操作和穩(wěn)定的性能，已成為分子生物學(xué)實驗中不可或缺的工具，為科研人員提供了可靠的分子量參考。Pfu DNA Polymerase是一種源自嗜熱菌Pyrococcus furiosus的高度熱穩(wěn)定DNA聚合酶廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究中.北京人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)

Taq PCR Master Mix (2×) 的優(yōu)勢在于其高度優(yōu)化的配方和高質(zhì)量的組分。該預(yù)混液含有高活性的Taq DNA聚合酶。上海漢遜酵母表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)

在分子生物學(xué)實驗中，RNA的分離與分析是研究基因表達(dá)和調(diào)控的重要環(huán)節(jié)。BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)作為一種為RNA電泳設(shè)計的緩沖液，因其高效、穩(wěn)定且無核酸酶污染的特點(diǎn)，成為實驗室中不可或缺的工具。BPTE電泳緩沖液的主要成分包括PIPES、Tris和EDTA，這些成分共同作用，為RNA電泳提供了理想的環(huán)境。該緩沖液經(jīng)過0.1% DEPC處理，確保了無RNase污染，從而保護(hù)RNA樣品免受降解。其pH值約為6.5，適合RNA在電泳過程中的穩(wěn)定遷移。優(yōu)勢與特點(diǎn)無核酸酶污染：BPTE緩沖液經(jīng)過DEPC處理，確保無RNase污染，適合RNA樣品的電泳分析。高效分離：該緩沖液能夠提供穩(wěn)定的電泳條件，確保RNA條帶清晰、分辨率高。即用型設(shè)計：BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)為即用型溶液，無需額外配制，直接使用即可。廣適用性：適用于多種類型的RNA電泳實驗，包括小片段RNA和長片段RNA的分離。使用方法BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)可以直接用于制備瓊脂糖凝膠或作為電泳槽的緩沖液。使用時需注意以下幾點(diǎn)：確保所有實驗器材和試劑均經(jīng)過RNase-free處理。在電泳結(jié)束后，建議使用RNase-free的核酸染料進(jìn)行染色，以避免RNA降解。