在分子生物學(xué)研究中,RNA的完整性分析是評(píng)估RNA質(zhì)量和功能的重要環(huán)節(jié)。10×RNALoadingBuffer作為一種高效、便捷的上樣緩沖液,在RNA電泳實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮著不可或缺的作用。本文將詳細(xì)介紹10×RNALoadingBuffer的產(chǎn)品特點(diǎn)和性能。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高濃度設(shè)計(jì)10×RNALoadingBuffer是一種10倍濃縮的上樣緩沖液,使用時(shí)需稀釋至1×。這種高濃度設(shè)計(jì)減少了試劑的使用量,同時(shí)保證了樣品在電泳過(guò)程中的穩(wěn)定性和均勻性。示蹤染料的雙重指示該緩沖液含有溴酚藍(lán)(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)兩種示蹤染料。溴酚藍(lán)在1.2%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳中與約500個(gè)堿基的RNA遷移速率相當(dāng),而二甲苯青則與約5000個(gè)堿基的RNA遷移速率相當(dāng)。這種雙重示蹤設(shè)計(jì)能夠直觀地反映電泳的進(jìn)程,幫助實(shí)驗(yàn)人員準(zhǔn)確判斷RNA的遷移情況。無(wú)RNase污染RNA分子對(duì)RNase極為敏感,因此在RNA實(shí)驗(yàn)中,避免RNase污染是關(guān)鍵。10×RNALoadingBuffer經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保無(wú)RNase雜質(zhì)污染,從而保證RNA樣品的完整性。適用性該緩沖液適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、小RNA以及特定RNA的片段的電泳分析。它不僅可用于甲醛變性的瓊脂糖凝膠電泳,也適用于非變性電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。Phusion DNA Polymerase是一種高性能的熱穩(wěn)定DNA聚合酶,以其高保真度快速擴(kuò)增和穩(wěn)健反應(yīng)而聞名于科研領(lǐng)域。Recombinant Human HMGB1(His Tag)
Probe qPCR Mix (2×, Low ROX):高特異性與低背景校正的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及低濃度ROX,能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測(cè)。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測(cè)靈敏度。低濃度ROX校正:適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止假陽(yáng)性??焖俜磻?yīng):支持快速qPCR程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),提高實(shí)驗(yàn)效率。操作簡(jiǎn)便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),只需加入引物、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過(guò)探針?lè)▽?shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。Recombinant Human HMGB1(His Tag)其優(yōu)化的緩沖體系和擴(kuò)增因子使其在長(zhǎng)片段擴(kuò)增中表現(xiàn)出色,即使對(duì)于高GC含量或復(fù)雜結(jié)構(gòu)的模板,也能實(shí)現(xiàn)。
一、靈敏度與特異性該試劑采用 SYBR Green I 熒光染料,這種染料能夠特異性地結(jié)合到雙鏈 DNA 上,當(dāng) DNA 在 PCR 過(guò)程中被擴(kuò)增時(shí),熒光信號(hào)也隨之增強(qiáng)。其靈敏度極高,即使在樣本中目標(biāo)基因的初始拷貝數(shù)極低的情況下,也能準(zhǔn)確地檢測(cè)到其擴(kuò)增信號(hào)。同時(shí),通過(guò)優(yōu)化的反應(yīng)體系,有效減少了非特異性擴(kuò)增的產(chǎn)生,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的特異性。例如,在對(duì)微量的病毒核酸進(jìn)行檢測(cè)時(shí),SYBR Green qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus) 能夠識(shí)別并擴(kuò)增目標(biāo)病毒基因,避免了其他非病毒核酸的干擾,為病原體的早期診斷提供了有力支持。二、高濃度 ROX 參考染料,穩(wěn)定可靠qPCR 實(shí)驗(yàn)中,ROX 參考染料的作用不容小覷。SYBR Green qPCR Mix (2×, High ROX, UDG Plus) 中的高濃度 ROX 參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號(hào)的差異,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和穩(wěn)定性。在多孔板實(shí)驗(yàn)中,不同孔之間的熒光信號(hào)可能會(huì)因儀器的微小差異、加樣量的不均勻等因素而產(chǎn)生波動(dòng)。高濃度的 ROX 參考染料如同一把標(biāo)尺,對(duì)這些波動(dòng)進(jìn)行校正,使得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確可靠。無(wú)論是單次實(shí)驗(yàn)還是大規(guī)模的樣本檢測(cè),都能保證結(jié)果的一致性,為科研數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析提供了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
dNTP Mix(脫氧核苷三磷酸混合物)是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的基礎(chǔ)試劑,廣泛應(yīng)用于PCR、DNA測(cè)序、克隆以及體外DNA合成等領(lǐng)域。dNTP Mix (25 mM each) 提供了四種脫氧核苷三磷酸(dATP、dTTP、dCTP和dGTP),每種濃度均為25 mM,能夠滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。產(chǎn)品特點(diǎn)dNTP Mix (25 mM each) 是一種高濃度的即用型試劑,包含四種脫氧核苷三磷酸,每種濃度均為25 mM。這種高濃度設(shè)計(jì)使其能夠兼容多種實(shí)驗(yàn)體系,無(wú)論是常規(guī)PCR、高通量測(cè)序還是復(fù)雜的基因編輯實(shí)驗(yàn),都能滿足需求。此外,該試劑經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保純度和穩(wěn)定性,能夠?yàn)镈NA合成提供高質(zhì)量的原料保障。dNTP Mix中的四種核苷酸是DNA聚合酶合成DNA鏈時(shí)的關(guān)鍵底物,其純度和濃度直接影響DNA合成的效率和準(zhǔn)確性。高純度的dNTP Mix能夠減少雜質(zhì)干擾,降低錯(cuò)誤摻入率,從而提高實(shí)驗(yàn)的成功率和重復(fù)性。應(yīng)用場(chǎng)景dNTP Mix是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的重要試劑,廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR反應(yīng):dNTP Mix是PCR反應(yīng)的關(guān)鍵組分之一,為DNA鏈的延伸提供了必要的核苷酸。在常規(guī)PCR、多重PCR和實(shí)時(shí)定量PCR中,dNTP Mix的純度和濃度直接影響擴(kuò)增效率和特異性。由于Cas9 NLS系統(tǒng)不涉及DNA的整合,因此降低了外源DNA整合至細(xì)胞基因組的風(fēng)險(xiǎn) 。
One Step RT-qPCR Probe Kit:高效、特異的RNA定量檢測(cè)解決方案One Step RT-qPCR Probe Kit 是一種為探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的一步法試劑盒,適用于以RNA為模板的定量檢測(cè)。該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中,操作簡(jiǎn)便,能夠有效防止污染,提高檢測(cè)效率。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性:采用高質(zhì)量的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠?qū)崿F(xiàn)高靈敏度和高特異性的檢測(cè)。防污染設(shè)計(jì):部分試劑盒引入了dUTP/UNG防污染系統(tǒng),有效防止PCR產(chǎn)物污染,避免假陽(yáng)性結(jié)果。操作簡(jiǎn)便:RT和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,減少了操作步驟,降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。適用范圍廣:適用于多種RNA模板,包括病毒RNA、總RNA和低豐度基因的檢測(cè)。多重檢測(cè)能力:支持多重qPCR反應(yīng),可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。應(yīng)用場(chǎng)景病毒檢測(cè):適用于RNA病毒的快速定量檢測(cè),如流感病毒、病毒等?;虮磉_(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平,尤其適合微量RNA樣本。多重檢測(cè):可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因,適用于高通量樣本分析。熱啟動(dòng)技術(shù)有效抑制了非特異性擴(kuò)增,使得Hot-Start Taq DNA Polymerase在低拷貝數(shù)模板檢測(cè)中表現(xiàn)出色。Somatostatin
與一些其他 DNA 聚合酶不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5’→3’外切酶活性,不會(huì)對(duì) DNA 鏈的 5’端進(jìn)行切割和修飾。Recombinant Human HMGB1(His Tag)
AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型2×預(yù)混液,專為快速、有效的PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)。該預(yù)混液包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase、dNTPs、優(yōu)化的緩沖體系以及電泳指示染料,能夠明顯提高PCR反應(yīng)的速度和特異性。產(chǎn)品特點(diǎn)該預(yù)混液的重要優(yōu)勢(shì)在于其快速擴(kuò)增能力,擴(kuò)增速度可達(dá)15秒/kb,甚至在1 kb以內(nèi)的片段中,極限速度可達(dá)5秒/kb。此外,預(yù)混液中的高保真DNA聚合酶具有3'-5'外切酶活性,能夠有效降低錯(cuò)誤率,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。其優(yōu)化的緩沖體系和延伸因子使其能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)13 kb的片段,適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增。預(yù)混液中還添加了電泳指示染料,PCR產(chǎn)物可直接進(jìn)行電泳,無(wú)需額外添加上樣緩沖液。此外,該產(chǎn)品含有特異保護(hù)劑,即使經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融,仍能保持穩(wěn)定的活性。應(yīng)用場(chǎng)景AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 廣應(yīng)用于常規(guī)PCR、基因克隆、復(fù)雜模板擴(kuò)增以及高通量建庫(kù)等場(chǎng)景。其快速擴(kuò)增能力和高特異性使其特別適合大規(guī)模基因檢測(cè)、菌落PCR以及微量DNA的檢測(cè)。總之,AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 憑借其快速擴(kuò)增、高特異性和便捷性,為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了高效的解決方案,尤其適合需要快速結(jié)果和高通量操作的場(chǎng)景。Recombinant Human HMGB1(His Tag)