江蘇動(dòng)物檢疫PCR檢測方法

PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復(fù)制核酸片段并提高DNA產(chǎn)量的技術(shù)，即所謂的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，這種技術(shù)可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)大量復(fù)制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點(diǎn)，PCR技術(shù)被應(yīng)用在寵物疾病分子的診斷上，將從疑似患病寵物（血液、眼鼻分泌物、糞便，尿液或腹水）中采樣的極微量病原(細(xì)菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本，透過PCR的方式大量被復(fù)制，再以核酸電泳的方式判讀結(jié)果，從而獲得早期、快速、穩(wěn)定和準(zhǔn)確的診斷結(jié)果.微流控PCR技術(shù)是一種通過將PCR反應(yīng)微型化來實(shí)現(xiàn)PCR反應(yīng)的高通量、低成本和快速的方法。江蘇動(dòng)物檢疫PCR檢測方法

巧亦捷全自動(dòng)薄膜微流控核酸檢測儀器擁有多種重技術(shù)，保障結(jié)果準(zhǔn)確：其采用Taqman熒光探針和經(jīng)典PCR擴(kuò)增技術(shù)，能夠?qū)⑸飿?biāo)志物精確定量，同時(shí)輸出Ct值和擴(kuò)增曲線，結(jié)果判讀簡潔明了；質(zhì)控更全1面，結(jié)果更可靠，設(shè)備體積小巧，便于搬運(yùn)和攜帶，可在多種場景下隨心使用，且薄膜微流控芯片為封閉系統(tǒng)操作，可很大程度避免人為和環(huán)境的污染，降低對(duì)檢測環(huán)境的要求，以及對(duì)檢測人員的要求。更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站、養(yǎng)殖場等多種使用場景。動(dòng)物PCR擴(kuò)增巧亦捷全自動(dòng)核酸檢測一體已實(shí)現(xiàn)覆蓋貓、犬腸道類、呼吸道類、血液類、人畜共患類等多種病原體的診斷。

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）的作用下，由一對(duì)特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng)，三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi)，以一對(duì)人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物，第一步，模板DNA變性，以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物，目的基因作為模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性，使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步，模板DNA與引物退火（復(fù)性），模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃，引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對(duì)。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán)，2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán)，2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制，因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。

當(dāng)犬貓的一些疾病處于潛伏期時(shí)，該階段動(dòng)物體內(nèi)的病原體含量過低。而目前市場上的一些檢測工具主要檢測寵物體內(nèi)是否產(chǎn)生對(duì)抗某種病原的抗體，雖然快速，但在初期傳染時(shí)，寵物免疫系統(tǒng)尚未產(chǎn)生抗體，所以檢測出現(xiàn)偽陰性，進(jìn)而延誤診療。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一體機(jī)則可以很好的解決這一問題，即便處于疾病潛伏期，巧亦捷核酸一體機(jī)也可以得到準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，做到早期診斷，實(shí)現(xiàn)及時(shí)診療，減少患病動(dòng)物痛苦，獲得更好的療效。預(yù)后評(píng)估，監(jiān)控診療效果。傳染性疾病在寵物中比較常見，由多種病原體如寄生蟲，細(xì)菌，病毒等引起，且多具有傳染性，死亡率也較高。

使用平常的抗原試紙做動(dòng)物診斷常會(huì)出現(xiàn)誤診的情況，如用抗原試紙條對(duì)剛買的小狗帶到做檢測，犬瘟試紙條檢測是陰性，但回家養(yǎng)幾天后小狗開始出現(xiàn)打噴嚏、咳嗽等癥狀，此時(shí)再去做檢查，犬瘟檢測則變成陽性，這種情況在寵物臨床上并不少見。很有可能這只小狗在第、一次檢查的時(shí)候已經(jīng)傳染并且向外排毒了，但是由于抗原滴度低排毒量比較小，試紙條檢測不出來，錯(cuò)失了及早診療的機(jī)會(huì)。另一方面，抗體檢測試紙并不能及時(shí)準(zhǔn)確知道機(jī)體是否傳染這個(gè)病原，就比如現(xiàn)在常見的貓咪弓形蟲檢測，只有貓咪接觸病原一段時(shí)間后，才能產(chǎn)生足量的抗體，抗體試紙才出現(xiàn)陽性結(jié)果。當(dāng)這些情況發(fā)生，結(jié)果都是令人很難過的。因?yàn)檫@不僅*意味著后期要花更多的Money用于診療，還會(huì)出現(xiàn)診療困難，毛孩子們受罪，甚至?xí)霈F(xiàn)我們都不愿意接受的死亡。所以我們更建議使用PCR技術(shù)進(jìn)行臨床診斷。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)可以為寵物PCR檢測提供嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臏?zhǔn)確結(jié)果，為檢測人員提供信心保證。江蘇PCR擴(kuò)增

傳統(tǒng)的免疫學(xué)檢測（如：熒光和膠體金）存在靈敏性和特異性的局限性。江蘇動(dòng)物檢疫PCR檢測方法

巧亦捷推出的全自動(dòng)薄膜微流控快速核酸檢測一體機(jī)采用PCR熒光探針技術(shù)、通過大量臨床病例驗(yàn)證，準(zhǔn)確率高達(dá)99%，可以針對(duì)犬貓等寵物、畜禽動(dòng)物、水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物等常見的傳染病進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的核酸檢測，具有檢測速度快、靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，可以在動(dòng)物患病早期未表現(xiàn)出明顯癥狀時(shí)及時(shí)進(jìn)行準(zhǔn)確判斷，有效杜絕漏檢、誤診的風(fēng)險(xiǎn)，幫助獸醫(yī)師們對(duì)動(dòng)物疾病診斷實(shí)現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早診療、早康復(fù)，以減輕它們的痛苦，盡早恢復(fù)健康。江蘇動(dòng)物檢疫PCR檢測方法

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