動物用PCR豬病診斷

大多數寵物醫(yī)院運用的診斷方法為：PCR和試紙條。其區(qū)別是：試紙條原理是基于抗體抗原的免疫學方法，通過顏色或熒光標記來判讀，和PCR檢測是基于不同方法學的檢測方式。PCR通過檢測樣本中有無病毒DNA（RNA）來確診，靈敏度高、特異性強、支持檢測項目多，是人醫(yī)醫(yī)學界公認的診斷金標準，兩者區(qū)別可以理解為滴血認親（免疫學方法）與親子鑒定（分子診斷）的區(qū)別。目前專業(yè)的的寵物疾病機構就是使用PCR檢測。巧亦捷核酸檢測一體機采用國際**的薄膜微流控技術，實現(xiàn)了從核酸提取、PCR擴增、熒光檢測全流程自動化芯片內完成，可以實現(xiàn)專業(yè)實驗室級別的核酸檢測，且檢測時間短，全程無需專業(yè)技術人員參與，可實現(xiàn)基于病癥的多項目聯(lián)檢，更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站、養(yǎng)殖場等現(xiàn)場快檢應用場景。微流控PCR技術是一種通過將PCR反應微型化來實現(xiàn)PCR反應的高通量、低成本和快速的方法。動物用PCR豬病診斷

巧亦捷核酸一體機采用的探針法熒光PCR與常規(guī)PCR的不同之處在于：在上、下游引物外還加入了具有序列特異性的探針（探針本身具有熒光標記），該探針根據需要擴增的靶序列設計因此只能與待檢測序列結合，與染料法相比提高了實驗的特異性。目前市場上的探針主要種類有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探針應用寬泛。TaqMan探針的結構：長度與普通PCR引物類似，大約20bp左右。在5’與3’端各標記有一個熒光基團，5’的熒光基團稱為報告基團（Report），3’的熒光基團稱為淬滅基團（Quencher）。TaqMan探針的性能：在探針結構完整的情況下用特定的波長激發(fā)報告基團，由于報告基團與淬滅基團的空間位置很近，因此報告基團能夠通過FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）將接受的能量轉移到淬滅基團，使后者以發(fā)射熒光或熱量的方式釋放能量，而報告基團并不發(fā)射特定波長的熒光信號。蘇州核酸PCR儀器生產企業(yè)巧亦捷利用了先進的薄膜微流控技術和qPCR核酸檢測技術。

傳統(tǒng)PCR檢測系統(tǒng)常見的痛點：“一是“繁”，即操作繁瑣，需要手動進行核損提取、純化；二是“?！?，即需要專業(yè)操作人員和**的操作臺，耗費人力、物力；三是“污”，即因PCR系統(tǒng)靈敏性和特異性高，人員操作，容易污染，導致結果不準。四是“半”，即市面上幾乎所有的PCR儀都是半自動。”于是瞄準這一痛點，巧亦捷快速核酸檢測一體機正式面世。相較于傳統(tǒng)PCR檢測系統(tǒng)，我們擁有三大特色：一是全自動：自動完成繁瑣的核酸提取+PCR擴增，全自動核酸提取，手工操作時間少于1分鐘，至少節(jié)省一個專業(yè)操作人員。二是全封閉：避免人為干擾，消除人和實驗室的污染，降低對實驗室環(huán)境的高要求。三是可檢測：貓皰疹病毒、貓杯狀病毒、貓冠狀病毒、貓瘟熱病毒、犬瘟熱病毒、犬細小病毒等多種病原體。

PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復制核酸片段并提高DNA產量的技術，即所謂的聚合酶鏈式反應，這種技術可以在數小時內大量復制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點，PCR技術被應用在寵物疾病分子的診斷上，將從疑似患病寵物（血液、眼鼻分泌物、糞便，尿液或腹水）中采樣的極微量病原(細菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本，透過PCR的方式大量被復制，再以核酸電泳的方式判讀結果，從而獲得早期、快速、穩(wěn)定和準確的診斷結果.許多寵物醫(yī)生表示自己在工作中已經離不開PCR儀的幫助了。

樣本處理、核酸提取、PCR擴增和數據處理是PCR的四個步驟。其中核酸提取可以幫助研究人員準確地快速地分離細胞或分子材料中的有效核酸，并獲得足夠的樣本為后續(xù)實驗提供依據。無論是病毒、細菌還是體細胞，遺傳物質都不是裸露在細胞外，都是在細胞內。需要有一個核酸提取試劑將遺傳物質釋放到外界，保證PCR反應效率。將核酸釋放出來后，提取與純化過程中同樣需要將樣本中的一些PCR抑制物去除掉，獲得純度比較高的核酸，比較大限度的保證PCR反應中抑制物的濃度降低，提高核酸檢測的準確性。因此核酸提取與純化這一步，也是保證PCR反應結果的關鍵一步。巧亦捷核酸檢測一體機采用磁珠法提取，效率高且可確保結果更準確。巧亦捷核算檢測一體機從樣本處理開始，所有檢測項目可在30-60分鐘完成，自動生成報告，檢測效率極大提高。江蘇分子檢測PCR試劑

巧亦捷全自動核酸一體機無需專業(yè)檢測人員，儀器上樣簡便，軟件操作易于掌握。動物用PCR豬病診斷

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）的作用下，由一對特異性引物經熱變性-退火-延伸反應，三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內，以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物，第一步，模板DNA變性，以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物，目的基因作為模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA經過80-90℃高溫變性，使模板DNA雙鏈經PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步，模板DNA與引物退火（復性），模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃，引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán)，2-4分鐘即可完成一個循環(huán)，2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍，從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制，因此PCR反應具有高度特異性。動物用PCR豬病診斷