蘇州熒光PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）的作用下，由一對(duì)特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng)，三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi)，以一對(duì)人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物，第一步，模板DNA變性，以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物，目的基因作為模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過(guò)80-90℃高溫變性，使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步，模板DNA與引物退火（復(fù)性），模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃，引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對(duì)。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán)，2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán)，2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬(wàn)倍，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制，因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。傳統(tǒng)的免疫學(xué)檢測(cè)（如：熒光和膠體金）存在靈敏性和特異性的局限性。蘇州熒光PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用

市面上現(xiàn)有PCR儀器都有以下幾個(gè)弊端：1.由于PCR靈敏度極高，實(shí)際應(yīng)用中污染較嚴(yán)重，一旦有少量外源性污染就可出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。2.條件控制不當(dāng)會(huì)造成各種產(chǎn)物突變，從而降低特異性和靈敏度。3.PCR技術(shù)需要以已知DNA模板作為擴(kuò)充模板，必須知道引物的結(jié)合部位序列才能合成特異性引物，局限性較大。巧亦捷核酸一體機(jī)采用薄膜微流控技術(shù)，檢測(cè)過(guò)程為全封閉且自動(dòng)進(jìn)行核酸提取及PCR擴(kuò)增，無(wú)需高標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)環(huán)境，可很大程度上降低污染。結(jié)果快速、準(zhǔn)確且穩(wěn)定。江蘇貓PCR儀器哪家好PCR是可以做到病原體準(zhǔn)確診斷的技術(shù)，與膠體金試紙及熒光定量試紙的應(yīng)用場(chǎng)景相同。

PCR在傳染病診斷中有靈敏度高的優(yōu)勢(shì)，可以做到早期診斷，實(shí)現(xiàn)及時(shí)診療，減少患病動(dòng)物痛苦，獲得更好的療效。預(yù)后評(píng)估，監(jiān)控診療效果。且適用范圍廣不同傳染病的檢測(cè)效果相同。不存在諸如免疫學(xué)方法中出現(xiàn)的貓類檢測(cè)試紙卡效果不佳的情況。PCR是目前大多數(shù)犬貓傳染病的診斷方法。也是寵物醫(yī)院必備的儀器之一，但市面上大多數(shù)都是PCR擴(kuò)增儀，即需要人工進(jìn)行核酸提取和純化。而巧亦捷核酸一體機(jī)則囊括了核酸提取和PCR擴(kuò)增部分，儀器自動(dòng)操作，極大減少了寵物醫(yī)院的儀器預(yù)算，真正做到全自動(dòng)一體化檢測(cè)。

如犬瘟熱、貓瘟、細(xì)小、貓杯狀病毒等，能夠快速準(zhǔn)確地確定病原體的存在。遺傳性疾病篩查：PCR可以用于檢測(cè)寵物遺傳性疾病的基因突變，如遺傳性眼疾、遺傳性肌肉疾病等，幫助寵物主人了解寵物的遺傳疾病風(fēng)險(xiǎn)。免疫性疾病診斷：PCR可用于檢測(cè)寵物免疫性疾病相關(guān)的免疫標(biāo)記物或基因表達(dá)水平的變化，幫助診斷和診療免疫相關(guān)疾病。何時(shí)考慮進(jìn)行PCR檢查在以下情況下，應(yīng)考慮進(jìn)行PCR檢查：寵物出現(xiàn)不明原因的癥狀：當(dāng)寵物出現(xiàn)不明原因的發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、咳嗽等癥狀時(shí)，應(yīng)考慮進(jìn)行PCR檢查以排除感*性疾病。如可以使用巧亦捷犬/貓消化道五聯(lián)檢、呼吸道五聯(lián)檢、貧血五聯(lián)檢等試劑，可快速篩查致病因。遺傳性疾病篩查：對(duì)于某些易患遺傳性疾病的品種，如柯基、金毛等，可以考慮在寵物出生后進(jìn)行遺傳性疾病的基因篩查。免疫性疾病診斷：當(dāng)寵物出現(xiàn)免疫相關(guān)的疾病癥狀，如食欲不振、關(guān)節(jié)腫脹等時(shí)，可考慮進(jìn)行PCR檢查以輔助診斷。綜上所述，PCR檢查作為一種高效、準(zhǔn)確的分子生物學(xué)技術(shù)，在寵物醫(yī)療診斷中發(fā)揮著重要作用。在適當(dāng)?shù)那闆r下，及時(shí)進(jìn)行PCR檢查可以幫助寵物主人更好地了解寵物的健康狀況，并及時(shí)采取相應(yīng)的診療和預(yù)防措施，保障寵物的健康和幸福。傳染病是由某些具有致病性的微生物，如細(xì)菌、病毒等引起的，能夠在某種動(dòng)物或多種動(dòng)物之間傳播的一些疾病。

巧亦捷核酸一體機(jī)采用的TaqMan探針?lè)ń榻B：TaqMan探針?lè)ㄊ蔷哂懈叨忍禺愋缘亩縋CR技術(shù)。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對(duì)PCR引物和一條探針，探針的5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)，3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)，探針只與模板特異結(jié)合，其結(jié)合位點(diǎn)在兩條引物之間。當(dāng)探針完整的時(shí)候，報(bào)告基團(tuán)的熒光能量被淬滅基團(tuán)吸收，所以儀器搜集不到信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)展，Taq酶遇到探針，利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷，導(dǎo)致報(bào)告基團(tuán)的熒光能量不能被淬滅基團(tuán)吸收，產(chǎn)生了熒光信號(hào)，因此信號(hào)的強(qiáng)度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。巧亦捷能夠快速準(zhǔn)確地識(shí)別病原體，為寵物的健康問(wèn)題提供關(guān)鍵信息。巧亦捷PCR熒光探針?lè)?/p>

巧亦捷核酸一體機(jī)針對(duì)不同傳染病的檢測(cè)效果相同。不存在免疫學(xué)方法中出現(xiàn)的貓類檢測(cè)試紙卡效果不佳的情況。蘇州熒光PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用

經(jīng)過(guò)多年的科研，PCR技術(shù)應(yīng)用于動(dòng)物疫病的檢測(cè)和診斷中，具有特異性高和便于操作等特點(diǎn)，得到了寬泛的臨床應(yīng)用。該技術(shù)能夠在比較短的時(shí)間內(nèi)使基因進(jìn)行快速的擴(kuò)增，從而使微量的基因檢測(cè)在臨床中得到應(yīng)用實(shí)踐。在PCR技術(shù)實(shí)際應(yīng)用的過(guò)程中，其優(yōu)點(diǎn)主要包括以下幾方面。首先，操作性較強(qiáng)，技術(shù)能夠簡(jiǎn)單的應(yīng)用于實(shí)際的工作中。其次，高效的擴(kuò)增結(jié)果，能夠?qū)崿F(xiàn)成果的轉(zhuǎn)化。***，特異性較高，技術(shù)性較強(qiáng)?，F(xiàn)階段，該技術(shù)能夠在很短的時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速擴(kuò)張的形勢(shì)使微量基因得到快速的檢測(cè)。蘇州熒光PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用