便攜式PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用

目前，市面上的寵物用分子檢測(cè)平臺(tái)普遍存在操作復(fù)雜，單價(jià)偏高，靈敏度不佳等問(wèn)題，巧亦捷依托于自主研發(fā)的薄膜微流控技術(shù)，經(jīng)多年沉淀，研發(fā)出全自動(dòng)快速核酸檢測(cè)一體機(jī)及多種配套檢測(cè)試劑，儀器自動(dòng)進(jìn)行核酸提取和PCR擴(kuò)增，讓使用者將樣本加入薄膜囊袋中就可上機(jī)進(jìn)行核酸檢測(cè)，且支持多重聯(lián)檢功能，一次可檢測(cè)多種病原體。多重寵物檢測(cè)試劑除了可解決操作的復(fù)雜性問(wèn)題，也由于采用常規(guī)的多重PCR策略，可大幅降低檢測(cè)試劑的費(fèi)用。巧亦捷以薄膜微流控技術(shù)為依托，實(shí)現(xiàn)分子診斷在臨床應(yīng)用端的場(chǎng)景邊界的拓展創(chuàng)新。便攜式PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用

巧亦捷核酸一體機(jī)采用的TaqMan探針?lè)ń榻B：TaqMan探針?lè)ㄊ蔷哂懈叨忍禺愋缘亩縋CR技術(shù)。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對(duì)PCR引物和一條探針，探針的5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)，3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)，探針只與模板特異結(jié)合，其結(jié)合位點(diǎn)在兩條引物之間。當(dāng)探針完整的時(shí)候，報(bào)告基團(tuán)的熒光能量被淬滅基團(tuán)吸收，所以儀器搜集不到信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)展，Taq酶遇到探針，利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷，導(dǎo)致報(bào)告基團(tuán)的熒光能量不能被淬滅基團(tuán)吸收，產(chǎn)生了熒光信號(hào)，因此信號(hào)的強(qiáng)度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。動(dòng)物源PCR動(dòng)物檢疫在寵物醫(yī)療中，目前病毒檢測(cè)主要包括膠體金檢測(cè)（試紙）和PCR檢測(cè)。

巧亦捷核酸一體機(jī)采用的探針?lè)晒釶CR與常規(guī)PCR的不同之處在于：在上、下游引物外還加入了具有序列特異性的探針（探針本身具有熒光標(biāo)記），該探針根據(jù)需要擴(kuò)增的靶序列設(shè)計(jì)因此只能與待檢測(cè)序列結(jié)合，與染料法相比提高了實(shí)驗(yàn)的特異性。目前市場(chǎng)上的探針主要種類有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探針應(yīng)用寬泛。TaqMan探針的結(jié)構(gòu)：長(zhǎng)度與普通PCR引物類似，大約20bp左右。在5’與3’端各標(biāo)記有一個(gè)熒光基團(tuán)，5’的熒光基團(tuán)稱為報(bào)告基團(tuán)（Report），3’的熒光基團(tuán)稱為淬滅基團(tuán)（Quencher）。TaqMan探針的性能：在探針結(jié)構(gòu)完整的情況下用特定的波長(zhǎng)激發(fā)報(bào)告基團(tuán)，由于報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)的空間位置很近，因此報(bào)告基團(tuán)能夠通過(guò)FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）將接受的能量轉(zhuǎn)移到淬滅基團(tuán)，使后者以發(fā)射熒光或熱量的方式釋放能量，而報(bào)告基團(tuán)并不發(fā)射特定波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。

巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)能“穩(wěn)、準(zhǔn)、快”的檢測(cè)出禽病。以犬瘟為例，CDV經(jīng)由鼻、咽和上呼吸道侵入機(jī)體后首先在其附近的淋巴結(jié)和扁挑體中增殖，動(dòng)物表現(xiàn)為ZUI初的體溫升高和白細(xì)胞減少(主要是淋巴細(xì)胞減少)。傳染第、一周會(huì)出現(xiàn)病毒血癥，通過(guò)血液循環(huán)，CDV散布到全身的淋巴器1官、骨髓和上皮結(jié)構(gòu)的固有膜，身體的所有分泌物中開(kāi)始向外排毒。因此在病毒傳染初期是無(wú)法在眼鼻分泌物中采集到病毒的，即便有少量病毒存在，膠體金試紙板也很難檢測(cè)出正確的結(jié)果。這是由于膠體金試紙板上包被的抗體需要和特異抗原結(jié)合后再和預(yù)先包被的二抗結(jié)合才能顯示結(jié)果，這其中需要的抗原（病毒）量較多。而PCR檢測(cè)是將抗原進(jìn)行擴(kuò)增，只要存在抗原就可以通過(guò)特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，可見(jiàn)到預(yù)期大小的DNA條帶出現(xiàn)，從而對(duì)病原體的基因組片段作出鑒定。因此，我們更推薦獸醫(yī)師們使用巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)。傳染病是由某些具有致病性的微生物，如細(xì)菌、病毒等引起的，能夠在某種動(dòng)物或多種動(dòng)物之間傳播的一些疾病。

在當(dāng)今的防疫工作和養(yǎng)殖業(yè)中，及時(shí)、準(zhǔn)確地檢測(cè)疾病是確保人類和動(dòng)物健康的關(guān)鍵。隨著科技的不斷發(fā)展，巧亦捷全自動(dòng)薄膜微流控核酸檢測(cè)系統(tǒng)作為一種現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)利器，正在成為防疫中心工作人員、養(yǎng)殖場(chǎng)工作人員等的必備。本文將探討巧亦捷核酸檢測(cè)系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)及其在疾病檢測(cè)中的應(yīng)用。巧亦捷核酸檢測(cè)系統(tǒng)簡(jiǎn)介巧亦捷核酸檢測(cè)系統(tǒng)是一種基于薄膜微流控技術(shù)的現(xiàn)代化檢測(cè)設(shè)備。該系統(tǒng)結(jié)合了微流體控制、PCR溫度控制及光學(xué)檢測(cè)單元，能夠?qū)崿F(xiàn)核酸提取、擴(kuò)增檢測(cè)、數(shù)據(jù)分析和自動(dòng)化報(bào)告的全流程集成。其主要特點(diǎn)包括：1.樣本進(jìn)，結(jié)果出：巧亦捷全自動(dòng)薄膜微流控核酸檢測(cè)系統(tǒng)采用全自動(dòng)化的檢測(cè)流程，樣本處理簡(jiǎn)單快速，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可**提高檢測(cè)效率。2.現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用：該系統(tǒng)體積小巧、操作簡(jiǎn)便，可隨時(shí)隨地進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，適用于各種環(huán)境和場(chǎng)景下的疾病監(jiān)測(cè)。3.多樣化應(yīng)用：巧亦捷核酸檢測(cè)系統(tǒng)可用于多種常見(jiàn)病原體的檢測(cè)，包括人畜共患病、家禽養(yǎng)殖業(yè)中的常見(jiàn)疾病等，具有廣泛的應(yīng)用前景。巧亦捷核酸檢測(cè)系統(tǒng)在防疫工作中的應(yīng)用：防疫中心工作人員可以利用巧亦捷核酸檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)YQ進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和控制YQ的蔓延。巧亦捷使用的PCR擴(kuò)增酶酶活是同類酶的3倍以上，檢測(cè)靈敏度高。江蘇微流控PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用

巧亦捷核酸一體機(jī)采用的磁珠法對(duì)樣本的要求低，可有效去除污染物，避免接下來(lái)的PCR反應(yīng)出現(xiàn)問(wèn)題。便攜式PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用

近三年寵物PCR檢測(cè)普及率極大增加，一、線城市普及率約80%，二線城市普及率約60%。中國(guó)現(xiàn)有寵物醫(yī)院數(shù)量約15000家，一、二線城市寵物醫(yī)院數(shù)量占比65%，并且未來(lái)寵物醫(yī)院數(shù)量將持續(xù)增長(zhǎng)，綜合來(lái)看中國(guó)1.5萬(wàn)家寵物醫(yī)院PCR普及率約60%。寵物醫(yī)院對(duì)PCR儀器主要關(guān)注3方面：1、全自動(dòng)檢測(cè)儀器，人工操作步驟少，由人為操作造成的失誤率更少，解放人力，提高人工工作效率。2、8通量檢測(cè)儀器，寵物醫(yī)院檢測(cè)量不高，8通量能夠滿足需求，節(jié)約成本。3、以投放模式采購(gòu)PCR檢測(cè)儀器(購(gòu)買(mǎi)一定量的檢測(cè)試劑，廠家贈(zèng)送檢測(cè)儀器)。便攜式PCR技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)的應(yīng)用